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1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具,資料分析,位于費(fèi)城托馬斯杰斐遜大學(xué)的希拉里和她的同事成功地將人體狂犬病抗體的DNA譯碼移入煙草作物中。 轉(zhuǎn)基因煙草作物可以產(chǎn)生一種人體蛋白質(zhì),而這種物質(zhì)能抗擊致命性的狂犬病病毒。,此轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)實(shí)現(xiàn)了哪種生物的哪些性狀在另外哪種生物中表達(dá)? 性狀的表達(dá)與我們從前學(xué)過(guò)的什么過(guò)程有關(guān)? 要實(shí)現(xiàn)藥物基因在煙草中的表達(dá),要提前做哪些關(guān)鍵工作?,基因工程的概念,基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù),生物體外,基因,DNA分子水平,人類(lèi)需要的基因產(chǎn)物,剪切, 拼接, 導(dǎo)入, 表達(dá),基因重組,基因工程的概念,基因工程培育抗蟲(chóng)棉的簡(jiǎn)要過(guò)程:,普通棉花(無(wú)抗蟲(chóng)特性),蘇云金芽孢桿菌,提取,抗蟲(chóng)基因,與運(yùn)載體DNA拼接 導(dǎo)入,棉花細(xì)胞(含抗蟲(chóng)基因),棉花植株(有抗蟲(chóng)特性),上述培育抗蟲(chóng)棉的關(guān)鍵步驟是什么?,基因工程培育抗蟲(chóng)棉的關(guān)鍵步驟:,關(guān)鍵步驟一:,抗蟲(chóng)基因從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái),關(guān)鍵步驟二:,抗蟲(chóng)基因與運(yùn)載體DNA連接,關(guān)鍵步驟三:,抗蟲(chóng)基因?qū)胧荏w(棉花)細(xì)胞,DNA重組技術(shù)的基本工具,準(zhǔn)確切割DNA的工具(“分子手術(shù)刀”) 限制性?xún)?nèi)切酶 DNA片段的連接工具(“分子縫合針”) DNA連接酶 基因轉(zhuǎn)移工具(“分子運(yùn)輸車(chē)”) 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,基因的大小以納米計(jì)算,要對(duì)它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒(méi)有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具:,思考,從哪里可以找到這種切割外來(lái)的DNA而對(duì)自身不切割的物質(zhì)? 科學(xué)家是怎樣找到這種酶的? 這種酶具有什么作用?,限制性核酸內(nèi)切酶的作用: 能識(shí)別特定核苷酸序列; 從特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切開(kāi)。,限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”,內(nèi)切酶切割DNA厚形成的 末端黏性末端、平末端是如何形成的?,重播,DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端,能夠通過(guò)互補(bǔ)進(jìn)行配對(duì)。,基因的針線(xiàn)DNA連接酶,連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的DNA分子。,切斷的DNA片段要與受體細(xì)胞的DNA連接,你覺(jué)得可以用什么酶?,DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點(diǎn)?,閱讀思考,限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果,一種產(chǎn)生黏性末端,一種產(chǎn)生平末端。那么恢復(fù)它們的連接時(shí),所用DNA連接酶是否可以不加選擇?,基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來(lái)的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是載體。,基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制將怎樣? 作為載體沒(méi)有切割位點(diǎn)將怎樣? 目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞,你如何察覺(jué)? 如果載體對(duì)受體細(xì)胞有害將怎樣?如果不能分離會(huì)怎樣?,作為載體的必要條件,能自我復(fù)制 有切割位點(diǎn) 能與目的基因結(jié)合 能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá); 有遺傳標(biāo)記基因 對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害、容易分離 比較容易得到,3、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體,能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制,有切割位點(diǎn),有標(biāo)記基因的存在,將來(lái)可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。,3) 基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的基本步驟中,不進(jìn)行堿
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