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細(xì)菌細(xì)胞觀察 劉佩珊,口腔中微生物菌叢之觀察,在口腔中唾液含有水分、胺基酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、醣類及一些無(wú)機(jī)物,因此適合菌體生長(zhǎng)。 牙齒表面亦會(huì)有大量菌體存在形成牙菌斑。 主要菌群為厭氣性螺旋體與弧菌、葡萄球菌、乳酸桿菌及鏈球菌 乳酸桿菌及鏈球菌附著於齒面上,可醱酵醣類產(chǎn)生乳酸,造成牙齒脫鈣作用,進(jìn)而形成細(xì)微穿孔導(dǎo)致齵齒。 本實(shí)驗(yàn)以牙籤採(cǎi)集口腔及牙齒面檢體,並藉由簡(jiǎn)單的染色來(lái)觀察口腔中的細(xì)菌。,蓋玻片一端滴加一滴methylene blue染劑(圖D) 以吸水紙由另一端將水吸出(圖E),口腔中微生物菌叢之觀察,鼻腔中金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureus)之鑑定,天然存在人體的微生物稱為正常菌群 在鼻腔中主要菌群為金黃葡萄球菌及表皮葡萄球菌 MSA含高濃度鹽類,可抑制葡萄球菌屬以外之微生物生長(zhǎng) MSA含甘露醇(mannitol),經(jīng)醱酵產(chǎn)酸後,可經(jīng)由酚紅(phenol red)顯示pH值之改變 金黃葡萄球菌能醱酵甘露醇,使菌落周圍呈黃色,表皮葡萄球菌不醱酵甘露醇,顏色不改變。,以無(wú)菌棉棒伸進(jìn)鼻孔約2.5公分,輕輕旋轉(zhuǎn)棉棒使之與鼻孔黏膜接觸。 壓舌板壓住舌頭,以無(wú)菌棉棒於咽喉表面充分旋轉(zhuǎn),採(cǎi)集檢體。勿觸及舌頭。 將採(cǎi)樣的棉棒直接以鋸齒狀劃線接種於MSA plate上。,表皮葡萄球菌,大腸桿菌,鏈球菌,金黃葡萄球菌,細(xì)菌簡(jiǎn)單染色,染劑( Stains ),簡(jiǎn)單染色( Simple stains ),使用單一染劑 使用鹼性染劑(正電荷) 觀察細(xì)菌形狀(球狀、桿狀、螺旋狀)、大小、排列情形(成鏈、成簇、成對(duì)、四聯(lián)) 甲烯藍(lán)(1-2分鐘)、結(jié)晶紫(20-60秒)、石炭酸複紅(15-30秒),製備染色抹片,準(zhǔn)備乾淨(jìng)之載玻片 自肉湯培養(yǎng)或固體培養(yǎng)製備抹片 熱固定 過(guò)火數(shù)次或浸泡於甲醇中一分鐘,簡(jiǎn)單染色步驟,將菌製備成抹片,各抹片於染色前需先經(jīng)過(guò)熱固定。 將玻片置於染色盤上,覆以染色液,並注意適宜之染色時(shí)間。 以蒸餾水尖嘴瓶小心沖去過(guò)剩染色液,此時(shí)玻片應(yīng)與水流成平行,如此可減少微生物自抹片中流失。 以吸水紙吸乾抹片

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