生物制藥工藝學(xué)第一、二章緒論.ppt

第一章 緒論,第一章 概 述,一、什么是生物藥物？,生物藥物是利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、生物分離與純化技術(shù)和藥學(xué)的原理與加工方法進(jìn)行加工、制造而成的一大類預(yù)防、診斷、治療疾病的物質(zhì)。,抗生素 生化藥物 生物制品,p1 抗生素 治療感染性疾病的藥物 生化藥品 生理活性物質(zhì) 生物制品 病源生物體或其代謝產(chǎn)物，預(yù)防、診斷、治療制品,識(shí)別 生化藥品與生物制品,1、概念不同 菌苗、疫苗、毒素、類毒素、免疫血清、血液制品、免疫球蛋白、抗原、變態(tài)反應(yīng)原、細(xì)胞因子、激素、酶、發(fā)酵產(chǎn)品、單克隆抗體、DNA重組產(chǎn)品、體外免疫診斷制品等。 氨基酸、核苷、核苷酸及其衍生物、多肽、酶、輔酶、脂質(zhì)及多糖類等生化物質(zhì)。 2、批準(zhǔn)文號(hào)不同 生物制品批準(zhǔn)文號(hào)為“國藥準(zhǔn)字S”開頭，如乙肝疫苗、人血白蛋白等； 生化藥品批準(zhǔn)文號(hào)一般為“國藥準(zhǔn)字H”開頭，如胰島素、18種氨基酸注射液等。,3、生物制品的貯存與保管 須專冊(cè)登記 (品名、規(guī)格、生產(chǎn)單位、經(jīng)銷單位、進(jìn)貨數(shù)量、進(jìn)貨日期、批準(zhǔn)文號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期)，在庫貯存應(yīng)嚴(yán)格按中國生物制品規(guī)程和產(chǎn)品說明書規(guī)定的貯存條件(溫度、濕度、避光、密閉等要求)分類存放。貯存期如發(fā)現(xiàn)質(zhì)量可疑現(xiàn)象，應(yīng)立即復(fù)檢或與供應(yīng)商聯(lián)系，及時(shí)退貨、換貨。 4、使用管理 所有生物制品必須憑醫(yī)生處方使用，而部分生化藥品為非處方藥不需要醫(yī)生處方即可購買使用。生物制品使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格掌握適應(yīng)癥，須做過敏試驗(yàn)的，一定要做過敏反應(yīng)試驗(yàn)。并嚴(yán)格掌握使用方法、劑量及禁忌癥，對(duì)含有活菌和活性毒素的生物制品的使用器具及殘留物，要嚴(yán)格按規(guī)定妥善處理，不得隨意丟棄，對(duì)于使用中發(fā)現(xiàn)的不良反應(yīng)要及時(shí)上報(bào)藥學(xué)部。,識(shí)別 生化藥品與生物制品,二、生物藥物特性,1、藥理學(xué)特性,2、原料的生物學(xué)特性,3、生產(chǎn)制備的特殊性,4、檢驗(yàn)的特殊性,5、制劑要求的特殊性,6、保藏及運(yùn)輸?shù)奶厥庑?三、生物制藥的分類,（一）按照藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和特性分類,1、氨基酸類藥物及其衍生物,2、多肽和蛋白類藥物,3、酶類藥物,4、核酸及其降解物和衍生物,5、糖類藥物,6、脂類藥物,7、維生素,（二）按原料來源分類,1、人體組織來源的生物制藥,2、動(dòng)物組織來源的生物藥物,3、植物來源的生物藥物,4、微生物來源的生物藥物,5、海洋生物來源的生物藥物,（三）按生理功能和用途分類,1、治療藥物 2、預(yù)防藥物 3、診斷藥物 4、其他生物醫(yī)藥用品,四、生物藥物的來源,（一） 人體組織來源 血液、分泌物和其他代謝產(chǎn)物 （二）動(dòng)物組織來源 （三）海洋生物 （四）植物 （五）微生物,人血白蛋白一直有“生命制品”、“救命藥”之稱。人血白蛋白是從健康人的血液中提取的，可直接靜脈注射到病人體內(nèi)，主要用于失血?jiǎng)?chuàng)傷、燒傷引起的休克，腦水腫及損傷引起的顱壓升高，肝硬化及腎病引起的水腫或腹水，癌癥術(shù)后恢復(fù)等方面的治療，是臨床急救的一種特殊藥品。,（一）人體組織來源,1、人血液制品,2、人胎盤制品,3、人尿制品,（二） 動(dòng)物臟器,1、胰島素,是機(jī)體內(nèi)唯一降低血糖的激素，也是唯一同時(shí)促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成的激素。作用機(jī)理屬于受體酪氨酸激酶機(jī)制。主要用于治療糖尿病、消耗性疾病。,（1）動(dòng)物胰島素：從豬和牛的胰腺中提取，兩者藥效相同，但與人胰島素相比，豬胰島素中有1個(gè)氨基酸不同，牛胰島素中有3個(gè)氨基酸不同，因而易產(chǎn)生抗體。 （2）半合成人胰島素：將豬胰島素第30位丙氨酸，置換成與人胰島素相同的蘇氨酸，即為半合成人胰島素。 （3）生物合成人胰島素（現(xiàn)階段臨床最常使用的胰島素）：利用生物工程技術(shù)，獲得的高純度的生物合成人胰島素，其氨基酸排列順序及生物活性與人體本身的胰島素完全相同。,胰島素的分類：,糖尿?。?糖尿病癥狀可總結(jié)為“三多一少”，所謂“三多”是指“多食、多飲、多尿”，“一少”指“體重減少”。,胰島素適用于1型糖尿病和2型糖尿病晚期病人的治療。,（三）海洋生物,魚肝油中主要是維生素A和D。,維生素A的主要功能是維持機(jī)體正常生長、生殖、視覺、上皮組織健全及抗感染免疫功能。另外，許多研究顯示皮膚癌、肺癌、喉癌、膀胱癌和食道癌都跟維生素A的攝取量有關(guān)；不過這些研究仍待臨床更進(jìn)一步的證實(shí)其可靠性。,維生素D的主要功能是促進(jìn)小腸黏膜對(duì)鈣、磷的吸收；促進(jìn)腎小管對(duì)鈣磷的重吸收。維生素D缺乏時(shí)可引起：鈣磷經(jīng)腸道吸收減少，骨樣組織鈣化障礙；佝僂病，表現(xiàn)為易驚、多汗、煩躁和骨骼改變。,它的生理功能是能增進(jìn)食欲，維持神經(jīng)正常活動(dòng)等，缺少它會(huì)得腳氣病、神經(jīng)性皮炎等。成人每天需攝入2mg。它廣泛存在于米糠、蛋黃、牛奶、番茄等食物中，目前已能由人工合成。,維生素B1,維生素B2,人體缺少它易患口腔炎、皮炎、微血管增生癥等。成年人每天應(yīng)攝入24mg，它大量存在于谷物、蔬菜、牛乳和魚等食品中。,又叫L-抗壞血酸，是一種水溶性維生素，能夠治療壞血病并且具有酸性,所以稱作抗壞血酸。在檸檬汁、綠色植物及番茄中含量很高。,維生素C,（四）植物,1、生物堿（alkaloid）是存在于自然界（主要為植物，但有的也存在于動(dòng)物）中的一類含氮的堿性有機(jī)環(huán)狀化合物。,博落回果實(shí),全草主要含有五種生物堿：血根堿、白屈菜紅堿、原阿片堿、-別隱品堿、-別隱品堿。而博落回果實(shí)中總生物堿含量達(dá)5，隨著對(duì)博落回有毒成分的分析研究，證明博落回中所含的生物堿在抗菌，抗腫瘤等方面有顯著的藥用效果，,2、黃酮,黃酮具有多種藥理作用，其中包括：抗氧化作用、消炎作用、抗癌和抗基因誘變作用。蔬菜中的“芹菜配質(zhì)”可抑制致癌物質(zhì)引起的細(xì)胞癌變；大豆中的“染料木素”可大大降低乳癌、前列腺癌的發(fā)病率；來自茶葉的“茶多酚”已被證實(shí)具有防止多種腫瘤（如結(jié)直腸癌、胃癌、食管癌、肺癌、乳癌、皮膚癌等）的功效。 某些黃酮與黃烷酮已被證實(shí)有很強(qiáng)的抗心血管病作用。如來自松樹皮的黃酮、葡萄籽中的白藜蘆醇、來自酸果蔓汁中的花青素和大豆異黃酮均有防止動(dòng)脈粥樣硬化和抗中風(fēng)、心肌梗塞以及冠心病的效果。,產(chǎn)品,（五）微生物,抗生素來源于微生物，一般來說，抗生素是微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物，是利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的一類主要用于治療感染性疾病的藥物?？股厥巧镌谄渖顒?dòng)過程中產(chǎn)生的（或并用化學(xué)、生物或生物化學(xué)方法衍生的）、在低濃度下能選擇性抑制他種生物機(jī)能的化學(xué)物質(zhì)。,（一） -內(nèi)酰胺類：青霉素類和頭孢菌素類的分子結(jié)構(gòu)中含有-內(nèi)酰胺環(huán)。 （二）氨基糖甙類：包括鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小諾霉素、阿斯霉素等。 （三）四環(huán)素類：包括四環(huán)素、土霉素、金霉素及強(qiáng)力霉素等。 （四）氯霉素類：包括氯霉素、甲砜霉素等。 （五）大環(huán)內(nèi)脂類：臨床常用的有紅霉素、白霉素、無味紅霉素、乙酰螺旋霉素、麥迪霉素、交沙霉素等、阿奇霉素。,在治療上，大多數(shù)革蘭氏陽性菌都對(duì)青霉素敏感（結(jié)核桿菌對(duì)青霉素不敏感）；而革蘭氏陰性菌則對(duì)青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對(duì)青霉素敏感），而對(duì)鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區(qū)分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。,常見的革蘭氏陽性菌有：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌、破傷風(fēng)桿菌等； 常見的革蘭氏陰性菌有：痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、百日咳桿菌、霍亂弧菌及腦膜炎雙球菌等。,革蘭氏染色法,五、生物制藥的發(fā)展歷程,天然生物材料的提取制藥,發(fā)酵工程制藥,酶工程制藥,細(xì)胞工程制藥,基因工程制藥,六、生物藥物研究新進(jìn)展,與疾病相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn) HGP 新型疫苗的研制 與血管發(fā)生有關(guān)的細(xì)胞生長因子的研制 基因工程活性肽的生產(chǎn) 蛋白質(zhì)工程藥物的開發(fā) 新的高效表達(dá)系統(tǒng) 新劑型研究 其他,生物藥物特性,1、藥理學(xué)特性,2、原料的生物學(xué)特性,3、生產(chǎn)制備的特殊性,4、檢驗(yàn)的特殊性,5、制劑要求的特殊性,6、保藏及運(yùn)輸?shù)奶厥庑?生物藥物的質(zhì)量管理與控制,生化藥物：熱源檢查、過敏試驗(yàn)、異常毒性試驗(yàn)等,第二章 生物藥物的質(zhì)量管理與控制 一、 新藥研究開發(fā)的主要過程 二、 生物藥物的科學(xué)管理 三、 生物藥物質(zhì)量的評(píng)價(jià) 四、 藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 五、 常用定量分析法 六、 基因工程藥物質(zhì)量控制,高風(fēng)險(xiǎn)的研發(fā)過程,1 2個(gè)產(chǎn)品,研發(fā)一個(gè)新藥平均需 12-15 年, 8億美元,發(fā)現(xiàn),探索性研究,想法,藥品,12 - 15 年,充分性研究,I期臨床試驗(yàn),II 期臨床試驗(yàn),III 期臨床試驗(yàn),0,5,10,臨床前藥理學(xué),臨床前安全性,篩選數(shù)百萬的化合物,臨床藥理學(xué)&安全性,新藥研發(fā)的六個(gè)主要步驟,一、研發(fā)靶標(biāo)的確立、新藥物實(shí)體的發(fā)現(xiàn)和確立 二、臨床前研究 三、研究新藥申請(qǐng)（IND，即申請(qǐng)臨床試驗(yàn)） 四、臨床試驗(yàn)+臨床前研究（繼續(xù)）補(bǔ)充 五、新藥申請(qǐng)（NDA） 六、上市及監(jiān)測(cè),一、新藥研究開發(fā)主要過程,發(fā)現(xiàn)新藥的途徑,定向篩選：設(shè)計(jì)某一特定的疾病模型或觀察指標(biāo)；設(shè)計(jì)、合成一定結(jié)構(gòu)的化合物進(jìn)行篩選； 廣泛篩選：有目的、有針對(duì)性的對(duì)大量樣品進(jìn)行廣泛的活性篩選，以供進(jìn)一步研究，如化學(xué)藥物所用的高通量篩選、生物菌株等的廣泛篩選等； 一藥多篩：建立模擬人類疾病的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，即篩選系統(tǒng)，對(duì)每樣品進(jìn)行系統(tǒng)篩選； 藥效關(guān)系研究：化學(xué)結(jié)構(gòu)相似或立體結(jié)構(gòu)相似的化合物，可能具有相似或相反的生物活性。 （圖1-1，1-2）； 新方法、新技術(shù)：評(píng)價(jià)生物活性的新方法、新技術(shù)，對(duì)于發(fā)現(xiàn)新的活性物質(zhì)致關(guān)重要；如對(duì)高通量篩選的反思、對(duì)現(xiàn)有評(píng)價(jià)思路的反思和發(fā)展（藥效、藥代效果甚至制劑方法等的綜合考量）； 偶然發(fā)現(xiàn)。建立在大量的研發(fā)工作和細(xì)心全面的總結(jié)的基礎(chǔ)上，如“偉哥”的發(fā)現(xiàn)。,主要的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu),主要二氫吡啶類鈣拮抗劑的化學(xué)結(jié)構(gòu),一、研發(fā)靶標(biāo)的確立、新藥物實(shí)體的發(fā)現(xiàn)和確立,根據(jù)化學(xué)或生物學(xué)藥物設(shè)計(jì)、天然藥物、生物藥物既有的經(jīng)驗(yàn)理論、偶然的發(fā)現(xiàn)或 現(xiàn)有臨床的經(jīng)驗(yàn)啟發(fā)等等確立研發(fā)靶標(biāo)及新藥物實(shí)體（化學(xué)或生物實(shí)體）的來源方案 天然物的提取和篩選 植物：長春花長春堿、長春新堿 太平洋紅豆杉樹紫杉醇 動(dòng)物：胰島素、激素、天花疫苗 有機(jī)合成和篩選 分子設(shè)計(jì) 合成 體外、體內(nèi)的活性篩選 特異性疾病動(dòng)物模型篩選 （藥效、藥代等） 化合物結(jié)構(gòu)優(yōu)化 再評(píng)價(jià) 新化合物實(shí)體（NCE） 既有藥物的分子改造（藥物的升級(jí)換代） 頭孢菌素：從第一代發(fā)展到第四代，其抗菌范圍和抗菌活性也不斷擴(kuò)大和增強(qiáng)。 生物制品實(shí)體的設(shè)計(jì)、發(fā)現(xiàn)和篩選 其他途徑：如既有藥物的適應(yīng)癥的拓展和轉(zhuǎn)變、復(fù)方的研發(fā)等,二、臨床前研究,原料藥的研究 化學(xué)結(jié)構(gòu) 元素分析、官能團(tuán)分析、光譜分析、氨基酸序列分析、結(jié)晶水 理化性質(zhì) 性狀 理化常數(shù)（溶解性、晶型、油水分配系數(shù)、解離值、立體異構(gòu)、其他） 新藥的鑒別 定性、專屬性 新藥的純度 方法的靈敏度 新藥穩(wěn)定性研究 物理穩(wěn)定性 化學(xué)穩(wěn)定性：影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)、留樣考察、穩(wěn)定性評(píng)價(jià)（有效期、使用期、儲(chǔ)存器） 微生物穩(wěn)定性,化學(xué)或生物實(shí)體的工藝研發(fā)及產(chǎn)品制備 開發(fā)出符合新藥申報(bào)要求的化合物實(shí)體制備工藝研發(fā)，并按照該工藝制備足夠量的化合物實(shí)體(藥物)用以臨床前試驗(yàn)、臨床研究、小規(guī)模和大規(guī)模制劑制備等等，每一步必須進(jìn)行質(zhì)量控制和驗(yàn)證。 生物學(xué)特性研發(fā)及方案確立 藥理學(xué) 藥代動(dòng)力學(xué) 毒理學(xué) 處方研究 物化性質(zhì) 最初的處方設(shè)計(jì),化學(xué)或生物實(shí)體的工藝研發(fā)及產(chǎn)品制備,該部分為確立（化學(xué)、生物）藥物實(shí)體后臨床前研發(fā)的主體工作； 該部分研發(fā)是系統(tǒng)的體系，需要嚴(yán)格依據(jù)相應(yīng)指導(dǎo)原則等的要求，過程和結(jié)果必須符合指導(dǎo)原則、結(jié)果必須考慮放大和生產(chǎn)的可能性、藥品的有效性和安全性（兩方面都必須與既有的類似品種對(duì)照）、原料藥/制劑/藥理藥代的過程系統(tǒng)配合和效果融合等等； 研發(fā)過程中不斷的判斷宏微觀效果、并作方案的調(diào)整、優(yōu)化和再評(píng)價(jià)，并在不同的階段作出相應(yīng)的決策。,生物學(xué)特性研發(fā)及方案確立,目的 判斷一個(gè)化合物是否具有足夠的安全性和有效性，使之繼續(xù)成為一個(gè)有前景的新藥，必須經(jīng)過全面研究以獲得有關(guān)藥效；如何吸收、在體內(nèi)的整個(gè)分布/積蓄/代謝/排泄的情況；以及如何作用于機(jī)體的細(xì)胞、組織和器官。 參入范圍 需要應(yīng)用于新藥開發(fā)的生物學(xué)家、微生物學(xué)家、分子生物學(xué)家、生物化學(xué)家、遺傳學(xué)家、藥理學(xué)家、生理學(xué)家、藥物動(dòng)力學(xué)家、病理學(xué)家、毒理學(xué)家、統(tǒng)計(jì)學(xué)家等參與共同完成。,生物學(xué)特性之藥理學(xué),與治療作用有關(guān)的主要藥效學(xué)研究 一般藥理學(xué)研究 毒理學(xué)研究 -急性毒性試驗(yàn) -大鼠長期毒性試驗(yàn) -犬長期毒性試驗(yàn) -皮膚刺激性試驗(yàn) -皮膚過敏試驗(yàn) -致突變?cè)囼?yàn) -生殖毒性試驗(yàn) -致癌試驗(yàn) 藥物依賴性試驗(yàn),受試樣品：API相關(guān)事宜； 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：離體動(dòng)物組織、整體動(dòng)物試驗(yàn)（嚙齒動(dòng)物和非嚙齒動(dòng)物） 實(shí)驗(yàn)方法： -體外實(shí)驗(yàn)：分子水平-酶系統(tǒng)工作 -細(xì)胞水平：體外細(xì)胞培養(yǎng)和樣品測(cè)試 -組織、器官水平 -整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)分組： 空白（模型）對(duì)照 陽性藥對(duì)照 樣品：低劑量、中劑量、高劑量 給藥方式：靜脈注射(iv)、腹腔注射(ip)、口服(po)、皮下注射(sc)、灌胃(ig)； 生物統(tǒng)計(jì)處理,與治療作用有關(guān)的主要藥效學(xué)研究,目的：了解新藥主要藥效作用以外的廣泛藥理作用。 指導(dǎo)原則： “當(dāng)發(fā)現(xiàn)一種化合物具有某種藥理活性時(shí)，應(yīng)進(jìn)行廣泛的動(dòng)物藥理學(xué)試驗(yàn)，以測(cè)定其是否具有任何可供治療應(yīng)用的作用”。“應(yīng)在機(jī)體的主要器官系統(tǒng)上進(jìn)行綜述，以揭示藥物的其它作用，不論這種作用是希望的，還是不希望的”。 主要觀察指標(biāo)： 1、精神神經(jīng)系統(tǒng) 2、心血管系統(tǒng) 3、呼吸系統(tǒng) 4、其它,一般藥理學(xué)研究,目的：觀察受試樣品一次給予動(dòng)物后所引起的毒性 反應(yīng)和死亡情況。 動(dòng)物： 樣品： 方法：劑量選擇 給藥途徑、體積 觀察指標(biāo) 結(jié)果：LD50或最大給藥量 Note: LD50是半數(shù)致死劑量，指在預(yù)定時(shí)間之內(nèi)，如96h，導(dǎo)致50%被暴露個(gè)體死亡的劑量。常與ED50【半最大效應(yīng)濃度】配合計(jì)算治療指數(shù)LD50/ED50，用以評(píng)價(jià)藥物的安全性，治療指數(shù)大的藥物相對(duì)安全。,急性毒性試驗(yàn),目的：觀察受試樣品連續(xù)給予動(dòng)物后所引起的毒性反應(yīng)和嚴(yán)重程度， 提供毒性反應(yīng)的靶器官及損害的可逆性，確定無毒反應(yīng)劑量。 動(dòng)物： 樣品： 方法：試驗(yàn)分組：對(duì)照組、低、中、高劑量 動(dòng)物數(shù)： 給藥方法： 檢測(cè)指標(biāo)： 一般觀察、血液學(xué)、血液生化、尿液、系統(tǒng)尸解、組織病理學(xué)、心電圖（只對(duì)犬）、其它； 恢復(fù)性觀察 資料整理,大鼠、犬長期毒性試驗(yàn),目 的：觀察動(dòng)物皮膚接觸受試物后所產(chǎn)生的刺激 反應(yīng)情況。 試驗(yàn)材料：動(dòng)物 受試物 試驗(yàn)方法：用藥后不同時(shí)間，觀察用藥部位紅斑，水腫情況。 結(jié)果判斷：表1、2,皮膚刺激試驗(yàn),根據(jù)受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及對(duì)遺傳物質(zhì)作用終點(diǎn)的不同， 進(jìn)行微生物回復(fù)突變?cè)囼?yàn)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)、動(dòng)物微核試驗(yàn) 1、微生物回復(fù)突變?cè)囼?yàn) 組胺酸缺陷型鼠傷寒沙門氏菌 樣品（溶媒，陽性藥） 回變菌落數(shù) 哺乳動(dòng)物肝微粒體酸（S9） 結(jié)果判定： （1）受試物誘發(fā)的回變菌落數(shù)增加，超過對(duì)照2倍，有 量效關(guān)系。 （2）某測(cè)試點(diǎn)超過對(duì)照2倍以上，可重復(fù)并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。,致突變?cè)囼?yàn),48-72h,2、哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 中國倉鼠肺細(xì)胞 樣品（溶媒，陽性藥） 染色體畸變率 陰性對(duì)照 結(jié)果判定： （1）受試物誘發(fā)的染色體畸變數(shù)的增加劑量相關(guān)。 （2）某一側(cè)試點(diǎn)呈現(xiàn)可重復(fù)的，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加。 3、嚙齒動(dòng)物微核試驗(yàn) NIH小鼠給樣品(溶媒、陽性藥) 取骨髓、涂片、染色 微核出現(xiàn)頻度 結(jié)果判定： （1）受試物誘發(fā)微核頻率的增加與劑量相關(guān)。 （2）某一測(cè)試點(diǎn)微核增加可呈重復(fù)，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加,12-72h,選合適選樣時(shí)間,計(jì)數(shù)1000個(gè)多染紅細(xì)胞,觀察100個(gè)中期分裂相,1、一般生殖毒性試驗(yàn) 設(shè)計(jì)：合籠前給藥，60-80d，14d。孕后雌鼠繼續(xù)給藥至多數(shù)器官形成期。 觀察指標(biāo)：一般狀況，體重、受孕率、死胎數(shù)、活胎數(shù)及重量。外觀及內(nèi)臟和骨骼變化。 2、致畸敏感期毒性試驗(yàn) 設(shè)計(jì)：于胚胎器官形成期給藥，大鼠孕后6-15d，小鼠 6-15d，兔6-18d，20d處死動(dòng)物。 計(jì)錄指標(biāo)：孕鼠重、黃體數(shù)、死胎數(shù)、活胎數(shù)、活胎重、性別、外觀、1/2胎仔作內(nèi)臟檢查，1/2胎仔作骨骼檢查。 3、圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn) 設(shè)計(jì)：孕中后期開始給藥，至產(chǎn)后21d（小鼠），28d（大鼠），31d（兔）。 計(jì)錄指標(biāo)：母體及胎仔情況，包括子代生長發(fā)育情況。,生殖毒性試驗(yàn),1、短期致癌試驗(yàn)： 哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、小鼠肺腫瘤誘發(fā)短期試驗(yàn) 2、動(dòng)物長期致癌試驗(yàn),致癌試驗(yàn),1、身體依賴性試驗(yàn)： 自然戒斷試驗(yàn) 替代試驗(yàn) 催促試驗(yàn) 誘導(dǎo)試驗(yàn) 2、精神依賴性試驗(yàn),藥物依賴性試驗(yàn),生物學(xué)特性藥動(dòng)學(xué)研究,ADME（吸收：absorption、分布：distribution、代謝：metabolism 及排泄excretion ） 方法：及時(shí)收集和分析尿液、血液和糞便樣品及對(duì)動(dòng)物解剖后的組織和器官。 目的： 藥物從各種途徑給藥后的吸收程度和速度，包括一種推薦為人體給出藥的途徑 藥物在體內(nèi)的分布速度和藥物滯留部位及持續(xù)的時(shí)間 藥物在體內(nèi)的代謝的速度、初級(jí)和次組位點(diǎn)及機(jī)理，以及代謝物化學(xué)性質(zhì)和藥理學(xué)。 藥物從體內(nèi)消除的比例及消除的速率和途徑,藥物在生物樣品中的分離和測(cè)定 1、靈敏度 2、特異性 3、重現(xiàn)性 4、標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率 5、待測(cè)樣品測(cè)定 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)測(cè)定 1、藥時(shí)曲線 2、主要參數(shù) 靜脈注射：t1/2()、t1/2()（分布）、K12、K10、Vd（表觀分布容積 ）、CL（藥物清除率） 、AUC（AUC: Area Under Curve ） 血管外給藥：Ka、t1/2、CL、Vd、Cmax（峰濃度）、Tmax（達(dá)峰時(shí)間）、AUC 藥物的分布 藥物的排泄 血漿蛋白結(jié)合,藥動(dòng)學(xué)研究側(cè)重內(nèi)容,處方研究,物化性質(zhì) 溶解度 分配系數(shù) 溶解速率 物理形態(tài) 穩(wěn)定性 擬定、研發(fā)最初處方 I期臨床試驗(yàn)期間，對(duì)于口服給藥，直接應(yīng)用僅含活性藥物無其他藥用輔料的膠囊劑。II期臨床試驗(yàn)的處方通常含少量有藥用輔料。在II期臨床試驗(yàn)期間，最終的劑型被選擇和開發(fā)作III期臨床使用并代表了提交FDA上市申請(qǐng)的處方。,三、新藥研究申請(qǐng) （Investigational New Drug Application, IND),遞交申請(qǐng)（臨床研究方案） SFDA(或其他）審核 發(fā)補(bǔ)、獲得臨床批件,四、臨床試驗(yàn)+臨床前研究（繼續(xù)）補(bǔ)充,表： 臨床試驗(yàn)的分期,NOTE:平均20個(gè)候選藥物中的1個(gè)最終被批準(zhǔn)上市（參考：FDA consumer，1987；21：12）,臨床前研究的繼續(xù)（補(bǔ)充）,長期動(dòng)物毒性 產(chǎn)品處方(在II期臨床試驗(yàn)期間作最后的制劑處方優(yōu)化） 生產(chǎn)和控制 包裝和標(biāo)簽設(shè)計(jì),五、新藥申請(qǐng)（NDA）,在臨床前和臨床研究完成以后,可以提交新藥 申請(qǐng)(NDA)以求獲準(zhǔn)上市新產(chǎn)品。 接受、獲得受理號(hào) SFDA(或FDA及其他）審核 工廠檢查、現(xiàn)場核查 SFDA(或FDA及其他）決定,六、上市及監(jiān)測(cè),IV期臨床研究和上市后監(jiān)測(cè) 理解藥物的作用機(jī)理和范圍； 研究藥物可能的新的治療作用； 說明需要補(bǔ)充的劑量規(guī)格 上市后的藥物副作用（Adverse drug reaction, ADR) 報(bào)告 發(fā)現(xiàn)并在15個(gè)工作日內(nèi)報(bào)告SFDA(或FDA及其他） 年度報(bào)告,藥品注冊(cè)管理辦法 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 GLP 良好藥品試驗(yàn)研究規(guī)范 GCP 良好藥品臨床試驗(yàn)規(guī)范,二、生物藥物的科學(xué)管理,藥品的研制、生產(chǎn)、供應(yīng)、臨床使用 全面質(zhì)量控制 科學(xué)管理,制藥工藝：從發(fā)現(xiàn)-藥物上市,發(fā)現(xiàn),臨床前,臨床,毒理,注冊(cè),生產(chǎn),GLP,GCP,GMP,化學(xué)藥物 生物藥物 中藥,劑型開發(fā) 過程開發(fā),工業(yè)制藥工業(yè)制藥 技術(shù)開發(fā)技術(shù)開發(fā),GLP藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范 GCP 藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范 GMP 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范,藥品安全試驗(yàn)規(guī)范（GLP） GLP是Good Laboratory Practice的簡稱，即藥品安全試驗(yàn)規(guī)范，亦稱藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范。 主要內(nèi)容是在規(guī)定試驗(yàn)條件下，進(jìn)行藥效、毒性動(dòng)物試驗(yàn)的準(zhǔn)則：對(duì)急性，亞急性，慢性毒性試驗(yàn)，生殖試驗(yàn)，致癌，致畸，致突變以及其它毒性試驗(yàn)等臨床前安全試驗(yàn)作出規(guī)定，是保證藥品安全有效的法規(guī)。,藥物臨床試驗(yàn)管理規(guī)范（GCP） GCP是Good Clinical Practice的簡稱，即藥物臨床試驗(yàn)管理規(guī)范。 藥品臨床試驗(yàn)是指在任何人體（病人或健康的志愿者）進(jìn)行的藥品系統(tǒng)性研究，以證實(shí)或揭示試驗(yàn)用藥品的作用及不良反應(yīng)等。 制定GCP的目的：保證臨床試驗(yàn)過程規(guī)范，結(jié)果科學(xué)可靠，保證受試者的權(quán)益并保障其安全。,藥品注冊(cè)管理辦法簡介,GMP簡介,(一)顯著特點(diǎn)： 1、藥品與人的健康、疾病和生命有直接的關(guān)系，因此在生產(chǎn)和使用過程中，不允許有“萬一” 的錯(cuò)誤。 2、藥品從本質(zhì)來說， 對(duì)機(jī)體是一種異物，因此在使用方法上必須給予極大的關(guān)注。,3、藥品是用于疾病的預(yù)防和治療為目的，多數(shù)是給病人使用的，同正常人比較病人身體較弱，抵抗力不強(qiáng)，對(duì)藥品的質(zhì)量要求較高。 4、藥品質(zhì)量在多數(shù)情況下，不能通過外觀進(jìn)行判斷，這種屬性決定了藥品生產(chǎn)以至使用，必須加強(qiáng)質(zhì)量上的管理。,(二)GMP總要求：所有醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)，在投產(chǎn)前，對(duì)生產(chǎn)過程必須規(guī)定明確，所有必要設(shè)備必須經(jīng)過檢驗(yàn)，所有人員必須經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)，要求符合規(guī)定的廠房建筑及裝備，使用合格原料，采用經(jīng)過批準(zhǔn)的生產(chǎn)方法，而且還必需具有符合條件的倉儲(chǔ)及運(yùn)輸設(shè)施。,1、所有操作方法均應(yīng)明文規(guī)定，且知道達(dá)到預(yù)期效果。 2、提供一切必要的裝備，包括：經(jīng)過培訓(xùn)在合適人員；合適的設(shè)備及維修服務(wù)；正確的材料、容器標(biāo)簽； 經(jīng)過批準(zhǔn)的方法；合適的儲(chǔ)存及運(yùn)輸。 3、操作方法應(yīng)書寫成文，用詞簡潔明了。 4、操作人員經(jīng)常培訓(xùn)，能正確操作。,（三） GMP的三大要素： 1、人為產(chǎn)生的錯(cuò)誤減小到最低； 2、防止對(duì)醫(yī)藥品的污染和低質(zhì)量醫(yī)藥品的產(chǎn)生； 3、保證產(chǎn)品高質(zhì)量的系統(tǒng)設(shè)計(jì)。,三、 生物藥物質(zhì)量的評(píng)價(jià),一、生物藥物質(zhì)量檢驗(yàn)的程序與方法 基本程序： 取樣鑒別檢查含量測(cè)定寫出檢驗(yàn)報(bào)告 1、取樣： 2、藥物的鑒別試驗(yàn)： 3、藥物的雜質(zhì)檢查： 4、藥物的安全性檢查： 5、藥物含量（效價(jià)）測(cè)定： 6、檢驗(yàn)報(bào)告的書寫：,二、藥物的ADME A表示吸收（absorption）； D表示分布（distribution）； M表示代謝（metabolism）； E表示代謝（excretion）。,三、 生物藥物質(zhì)量的評(píng)價(jià),一、生物藥物質(zhì)量檢驗(yàn)的程序與方法 基本程序： 取樣鑒別檢查含量測(cè)定寫出檢驗(yàn)報(bào)告 1、取樣： 2、藥物的鑒別試驗(yàn)： 3、藥物的雜質(zhì)檢查： 4、藥物的安全性檢查： 5、藥物含量（效價(jià)）測(cè)定： 6、檢驗(yàn)報(bào)告的書寫：,四、 藥物質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn),為了控制藥品質(zhì)量，對(duì)藥品生產(chǎn)、儲(chǔ)存、供應(yīng)及使用各個(gè)環(huán)節(jié)應(yīng)有一個(gè)統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，以便執(zhí)法部門定期進(jìn)行監(jiān)控，使藥品質(zhì)量的監(jiān)管工作有法可依。藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是藥品生產(chǎn)和管理的依據(jù)，并具有法定的約束力。,藥典的內(nèi)容,藥典(pharmacopoeia)：是一個(gè)國家記載藥品規(guī)格、標(biāo)準(zhǔn)的法典。由國家組織的藥典委員會(huì)