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農(nóng)林學(xué)類論文-淺談馬鈴薯脫毒苗快繁生產(chǎn)管理技術(shù)論文關(guān)鍵詞馬鈴薯脫毒苗;快繁;管理技術(shù)論文摘要從培養(yǎng)基制作、溫度控制、瓶裝苗及其污染控制、消毒滅菌和定期檢查等方面介紹了馬鈴薯脫毒苗快繁生產(chǎn)管理技術(shù),以期為馬鈴薯脫毒苗快繁生產(chǎn)提供參考。隨著高科技的發(fā)展,作為植物營養(yǎng)繁殖的一個新手段,組織培養(yǎng)技術(shù)成為現(xiàn)代生物領(lǐng)域及現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一項基本操作手段,其繁殖速度是一般常規(guī)方法所不能比的。通過無菌方法進行快繁的方法能在較短的時間和較少的空間內(nèi)由1個個體迅速繁殖大量群體,實驗室脫毒馬鈴薯試管苗的離體繁殖正是借助這一顯著優(yōu)勢在國內(nèi)外種薯生產(chǎn)上得以廣泛利用,是脫毒馬鈴薯原種大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的前提。青海省農(nóng)科院生物中心是青海省最大的脫毒馬鈴薯科研、生產(chǎn)相結(jié)合的經(jīng)濟實體,生產(chǎn)能力達200多萬株脫毒馬鈴薯試管苗,為青海省脫毒馬鈴薯原種生產(chǎn)最大的省級單位。經(jīng)過多年的實際探索及對馬鈴薯實驗室的改進,大幅度增加了脫毒馬鈴薯原種的生產(chǎn)數(shù)量,而脫毒馬鈴薯的優(yōu)勢,即高產(chǎn)和不易腐爛,被農(nóng)民(特別是靠天吃飯及高海拔地區(qū)的農(nóng)民)及市場接受,收到了良好的經(jīng)濟和社會效益,為青海省的經(jīng)濟發(fā)展做出了貢獻。1培養(yǎng)基及其制作對瓶裝苗的生長影響1.1培養(yǎng)基材料對試管苗的生長影響培養(yǎng)基包括大量元素、微量元素、鐵鹽、食用白糖、自來水、瓊脂。試管苗單節(jié)切斷繁殖宜采用固體培養(yǎng)基,如果工作人員在培養(yǎng)基滅菌過程中,不慎放氣不均,一般滅菌后拿出來的培養(yǎng)基過?。ǔ珊隣睿绊懡用缳|(zhì)量和幼苗生長;相反,如果培養(yǎng)基硬度太大,切斷不易插入培養(yǎng)基中,影響苗切斷與培養(yǎng)基的接觸。1.2培養(yǎng)基制作對試管苗成活率的影響在快繁苗時,所需的培養(yǎng)基一般應(yīng)提前2周做,以防使用被污染的培養(yǎng)基,影響試管苗的成活率。如筆者4月中旬快繁大西洋苗時,由于培養(yǎng)基的污染超過了10%,影響很大。另外,培養(yǎng)基的瓶或盒上的水珠影響快繁苗的污染和強壯生長。2溫度對瓶裝脫毒苗生長的影響夏天晝長夜短,日光燈照射比冬天短,而自然照射光多,可提高組培瓶苗移栽后的成活率;但夏天比冬天室內(nèi)溫度高,污染增高,所以室內(nèi)需裝空調(diào)。一般溫度應(yīng)控制在2025范圍內(nèi),溫度高于26,則苗頂端易產(chǎn)生燒苗現(xiàn)象,高于33,則苗停止生長。另外,瓶中或盒中的培養(yǎng)基要比平時多放,以防抽干盒或瓶中的培養(yǎng)基,影響幼苗的正常生長。生長間的生長架以用玻璃層為宜,因利用散射光可提高組培瓶苗移栽后的成活率。試驗表明,用玻璃作為培養(yǎng)層的生長架比用鐵作為生長架好。用鐵做的生長架,散熱效果比較差,當(dāng)生長間放滿用鐵做的生長架時,一般早上關(guān)燈后,繼續(xù)讓空調(diào)再開23h才能保證整個生長間的溫度較適合幼苗的生長。3快繁瓶裝苗的控制在快繁脫毒苗時,瓶中如少放脫毒苗,其長得快,脫毒苗節(jié)間長、葉大且須根發(fā)達;如放多脫毒苗,其長得慢,脫毒苗弱、葉小且挨瓶的苗腐爛。這2種情況對快繁都不利,故快繁苗時,在瓶中放4050根脫毒苗為宜;同時快繁脫毒苗應(yīng)控制苗的節(jié)間。4瓶苗污染的控制在脫毒瓶苗的繼代培養(yǎng)過程中,常因種種原因出現(xiàn)細菌類和真菌類污染,細菌污染苗極弱,且擴繁后下一代大部分表現(xiàn)為細菌污染,在生產(chǎn)中通常用抗生素來處理細菌污染。對于真菌污染的脫毒瓶苗,除嚴(yán)格操作規(guī)程外,可在培養(yǎng)基中配制不同濃度多菌靈來減輕瓶苗污染率。最主要是快繁留的基礎(chǔ)脫毒苗沒有細菌和真菌的污染。而對于繼代擴繁4年以上的瓶苗,要定期進行病毒檢測確認(rèn)是無病毒苗。因此,要定期更新脫毒瓶苗,每年應(yīng)通過剝離莖尖組織的辦法培養(yǎng)新鮮無病毒瓶苗,以確保繼代培養(yǎng)脫毒瓶苗質(zhì)量。5無菌操作室內(nèi)消毒滅菌5.1操作前消毒一是無菌室剛開始工作或間隔12個月未進行消毒時,先把高錳酸鉀倒入培養(yǎng)皿,再倒入甲醛,關(guān)閉門窗進行熏蒸消毒,間隔12d即可在室內(nèi)工作;二是將工作服、口罩、拖鞋、盛裝75%的酒精瓶、剪刀、鑷子、苗源瓶、快繁瓶等無菌室所需物品放在無菌室固定位置,啟動超凈工作臺,通風(fēng)殺菌,并將室內(nèi)紫外燈打開消毒,工作人員快速離開無菌室,滅菌2530min即可。5.2操作中消毒工作人員進入隔離間,穿戴好消毒服裝,在組培室用75%的酒精將雙手消毒,再用酒精泡的酒精棉擦超凈工作臺,同時將鑷子、剪刀和支撐干用酒精擦過后,放在加熱器進行56s的消毒,并將已挑揀好的無污染的脫毒苗放在超凈工作臺上,先打開滅菌過的快繁瓶放在超凈工作臺上,然后擰開脫毒苗瓶的口,用已滅菌過的鑷子將脫毒苗瓶中的小苗夾出瓶口,只留根部在瓶內(nèi),用剪刀剪掉根部,然后再用鑷子夾小苗離快繁瓶口12cm(注意不要讓小苗挨上快繁瓶瓶口,以防感染),剪帶1片小葉莖放在快繁瓶中。蓋上蓋子,在苗瓶外壁用打號槍注明該品種的編號及快繁日期。6定期檢查放在生長間的快繁脫毒苗,一般每隔7d要用稀釋好的清潔爾滅噴撒滅菌,每天早關(guān)燈和晚開燈時,發(fā)現(xiàn)有污染的瓶苗,必須馬上將其拿出生長間,并放入高壓滅菌鍋滅菌,然后用清潔熱水加入適量洗衣粉,用刷子涮洗苗瓶,并換水沖洗,然后倒置木架上晾干水珠待用。健康苗20多天

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