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實(shí)驗(yàn)一小鼠的基本實(shí)驗(yàn)操作一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過實(shí)際操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、標(biāo)記、給藥(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾靜脈注射)、取血(眶后靜脈叢,摘眼球)、脊椎脫臼法處死、大體解剖。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明小鼠2只(1雌1雄)三、實(shí)驗(yàn)步驟1、抓取和固定,標(biāo)記2、去毛3、給藥:消化道、腹腔注射、尾靜脈注射4、取血:眼眶后靜脈叢、尾靜脈、眼球摘除法、斷頭法5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉6、處死:脊椎脫臼法7、解剖:雄性:睪丸、附睪、輸精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,膠質(zhì)狀,透明)雌性:雙角子宮、卵巢腎上腺、膽囊、甲狀腺、胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟、甲狀腺四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、抓取和固定標(biāo)記:抓?。鹤バ∈蟮奈哺抗潭ǎ鹤プ⌒∈蟮奈哺?,讓小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠兩耳及其間的頸部皮膚,小指和無名指將尾巴固定在手掌面。并標(biāo)記:2、灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃針,沿一側(cè)口角進(jìn)針,緊貼咽后壁,頭后仰以便伸直消化道,進(jìn)針2/3后灌生理鹽水0.5ml3、注射給藥:腹腔注射:從下腹部的兩側(cè)進(jìn)針,進(jìn)針時(shí)針與腹部成45。進(jìn)針后稍微晃動(dòng)針,如無粘滯感則可注射藥物尾靜脈注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指將尾拉直,食指托住尾部,在尾動(dòng)脈位置進(jìn)針注射0.5ml生理鹽水。注射完畢拔出針頭,用無菌棉球壓迫止血。4、采血從眼角內(nèi)側(cè)0.5cm處進(jìn)針眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持彎頭鑷在眼球根部將眼球摘除,頭朝下,眼眶內(nèi)血迅速流出。5、麻醉:0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的藥量給藥,2分鐘麻醉成功6、處死:脊椎脫臼法:按住頭部,將尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死7、解剖:雄性:尋找到睪丸、附睪、輸精管、鼠蹊腺雌性:雙角子宮、卵巢3.7.2腎上腺:米粒大小胰腺:位于胃下方,類似于脂肪組織,渾濁狀3.7.4,膽囊:芝麻大小,淺綠色,半透明,甲狀腺:緊貼環(huán)狀軟骨,另可解剖出胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟。五、實(shí)驗(yàn)討論1、小鼠抓取的感受:小鼠性情較溫順,一般不會(huì)咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時(shí),用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠完全固定。如要進(jìn)行手術(shù)或心臟采血應(yīng)先行麻醉再操作,如進(jìn)行解剖實(shí)驗(yàn)則必須先行無痛處死后再進(jìn)行。2、小鼠尾靜脈注射感受:首先,注射前尾巴用稍熱的水浸泡幾分鐘,有利于注射;其次,先遠(yuǎn)后盡,不要一開始就從尾根部,那樣失敗了不好辦;再次,進(jìn)血管后注意保持穩(wěn)定,針尖很容易刺穿血管的。尾靜脈就在尾巴的正左右兩邊,先用酒精用力擦,可以去掉部分角質(zhì),然后按住近心端讓充血,就很容易看到了。進(jìn)針大概12厘米是最合適的。尾靜脈注射時(shí),可用4550度的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭,可使血管擴(kuò)張,同時(shí)也可軟化表皮角質(zhì)。以左手拇指和食指夾住鼠尾,使靜脈充盈,中指幫助無名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(連5號(hào)細(xì)針頭),針頭與靜脈夾角一般小于30度,從距尾尖2-3厘米處進(jìn)針,此處皮薄易進(jìn)入,先抽回血,見到血后再緩慢注入少量藥液,如無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,可繼續(xù)注入。一般推注速度為0.05-0.10ml/秒,一次注入量為0.05-0.25ml/10g體重。如反復(fù)注入,應(yīng)盡可能從尾末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射。實(shí)驗(yàn)二大鼠的基本實(shí)驗(yàn)操作二、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過實(shí)際操作,掌握大鼠的一般操作方法,包括大鼠的抓拿、標(biāo)記、給藥(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾靜脈注射)、取血(眶后靜脈叢,摘眼球)、脊椎脫臼法處死、大體解剖。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:大鼠2只(1雌1雄)三、實(shí)驗(yàn)步驟1、抓取和固定,標(biāo)記2、去毛3、給藥:消化道、腹腔注射、尾靜脈注射4、取血:眼眶后靜脈叢、尾靜脈、眼球摘除法、斷頭法5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉6、處死:脊椎脫臼法7、解剖:雄性:睪丸、附睪、輸精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,膠質(zhì)狀,透明)雌性:雙角子宮、卵巢腎上腺、胰腺、膽囊、甲狀腺、胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟顱部。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、抓取和固定標(biāo)記:抓?。鹤ゴ笫蟮奈哺抗潭ǎ鹤プ〈笫蟮奈哺浚尨笫笤诖植谄矫嫔吓佬?,后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住大鼠兩耳及其間的頸部皮膚,小指和無名指將尾巴固定在手掌面。并標(biāo)記:2、灌胃法:左手抓取大鼠固定后,右手持特制灌胃針,沿一側(cè)口角進(jìn)針,緊貼咽后壁,頭后仰以便伸直消化道,進(jìn)針2/3后灌生理鹽水0.5ml3、注射給藥:腹腔注射:從下腹部的兩側(cè)進(jìn)針,進(jìn)針時(shí)針與腹部成45。進(jìn)針后稍微晃動(dòng)針,如無粘滯感則可注射藥物尾靜脈注射:一人固定大鼠,另一人用左手中指和拇指將尾拉直,食指托住尾部,在尾動(dòng)脈位置進(jìn)針注射0.5ml生理鹽水。注射完畢拔出針頭,用無菌棉球壓迫止血。4、采血從眼角內(nèi)側(cè)0.5cm處進(jìn)針眼球摘除法:左手抓取用固定大鼠,右手持彎頭鑷在眼球根部將眼球摘除,頭朝下,眼眶內(nèi)血迅速流出。5、麻醉:0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本大鼠重320g,按100mg/kg的藥量給藥,5分鐘麻醉成功6、處死:脊椎脫臼法:按住頭部,將尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死7、解剖:雄性:尋找到睪丸、附睪、輸精管、鼠蹊腺雌性:雙角子宮、卵巢3.7.2腎上腺:米粒大小胰腺:位于胃下方,類似于脂肪組織,渾濁狀3.7.4,膽囊:芝麻大小,淺綠色,半透明,甲狀腺:緊貼環(huán)狀軟骨。顱部:視交叉:將大鼠過量麻醉致死后,剪開顱頂部皮膚,暴露顱骨,用鑷子咬除顱頂部骨,充分暴露大腦半球。用鑷子從額部將腦組織翻至枕后,可見位于顱底的視交叉、視神經(jīng)和視束(白色纖維)。垂體:夾斷視神經(jīng),充分暴露顱底,可見位于垂體窩中的垂體,色白,米粒大小。另可解剖出胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟。五、實(shí)驗(yàn)討論大鼠牙齒和爪子銳利,個(gè)頭大,抓取時(shí)要小心,不要被其抓傷或咬傷。初學(xué)者為確保安全,可佩戴棉紗手套。提尾部時(shí)應(yīng)靠近尾根部提取,以防大鼠身體搖晃,或扭頭過來咬人。一手不容易固定時(shí),可另請(qǐng)另一人協(xié)助操作。健康雄性大鼠的體重明顯超過同齡雌性大鼠。如進(jìn)針不順,須暫停操作
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