肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素的影響.doc

肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素的影響 張偉雯楊鳳嘯：廣州醫(yī)科大學附屬第三醫(yī)院廣東廣州510150 【摘要】目的 探討肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素（TotalBilirubin，TB）結(jié)果的影響。方法采用釩酸鹽氧化法平行測定300例患者的血清和肝素抗凝血漿標本中TB含量，并對兩種方法的檢測結(jié)果進行分析和比較。結(jié)果肝素抗凝血漿致釩酸鹽氧化法測定TB結(jié)果降低。TB含量在1?7300mol/L范圍內(nèi)，肝素抗凝血漿的TB檢測結(jié)果普遍低于血清245mol/L；隨著TB濃度的升高，檢測結(jié)果的偏差越大；血清TB值y對于肝素抗凝血漿TB值?x?的校正公式為：?y?=1?1974?x?+2?2047；線性試驗和方法比較試驗均顯示兩者具有良好的相關(guān)性。結(jié)論肝素抗凝血漿致釩酸鹽氧化法測定TB結(jié)果降低。 【關(guān)鍵詞】肝素釩酸鹽氧化法總膽紅素 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofheparinonthetotalbilirubinleveldetectedbyvanadateoxidationmethod. MethodsVanadateoxidationmethodwasappliedtodetecttotalbilirubininarangeof300heparinanticoagulantplasmaandserumsamples. ResultsHeparinmadelowresaltinthedetectionofvanadateoxidationmethod;thetotalbilirubininheparinanticoagulantplasmawaslowerthanserum. ConclusionInordertoensuretheaurateandrisibleresult;theserumsamplesshouldbeadoptedinsteadofheparinanticoagulantplasmasamples. 【Keywords】Heparin,VanadateOxidationMethod,TotalBilirubin 【Authorsaddress】TheThirdAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou,GuangdongProbince510150PRC? doi:10.3969/j.issn.1671-332X.xx.06.030 膽紅素是老化的紅細胞中血紅蛋白經(jīng)過單核-吞噬細胞系統(tǒng)處理后的代謝產(chǎn)物，血液中膽紅素的改變能反映出機體中某些臟器（如肝臟、膽囊、腎臟等）的功能狀況?1?。其準確有效的測定有助于判斷黃疸的程序和類型。長期以來，人們一直在尋找測定膽紅素行之有效又適合臨床需求的方法，而釩酸鹽氧化法測定膽紅素的誕生，恰恰解決了這方面的需求，因此，釩酸鹽氧化法也成為目前各臨床實驗室測定膽紅素中應用較為普遍的方法之一。由于釩酸鹽氧化法使用的反應起動劑（釩酸鹽）本身呈淺黃綠色，在450nm處有一定的吸光度（A值），反應啟動后的讀點比實際值略高，從而使反應前后的A值減小，這種差異在A值變化較小的低值總膽紅素（TotalBilirubin，TB）的檢測中易于體現(xiàn)出來。在臨床生化檢測工作中，血清的分離需要2030min，若對一些急診項目的檢測嘗試以肝素抗凝血漿取代血清，可以減少等待血清分離的時間，實現(xiàn)結(jié)果的快速報告?2?。但在測定過程中我們發(fā)現(xiàn)，用肝素抗凝血漿代替血清測定TB時（釩酸鹽氧化法），其測定結(jié)果往往偏低。為進一步解釋此現(xiàn)象，筆者收集300份來本院就診的患者的血清和肝素抗凝血漿標本進行TB的測定，分析比較兩者之間的差別，以評價肝素抗凝血漿是否滿足于臨床實驗室的檢測需求。? 1材料與方法? 1.1儀器? 日立Hitachi7170全自動生化分析儀。? 1.2檢測試劑與器材? 利德曼生化股份有限公司生產(chǎn)的總膽紅素測定試劑盒-TBIL（釩酸鹽氧化法；Lot：305062D）。主要組成成分R1：檸檬酸緩沖液（100mM），反應促進劑（1mmol/L），表面活性劑（2mmol/L）；R2：磷酸緩沖液（10mM），偏釩酸鈉（4mmol/L）。陽普醫(yī)療科技股份有限公司生產(chǎn)的普通真空管和肝素抗凝管。? 1.3檢測原理? 在pH3?0附近，表面活性劑和釩酸作用于膽紅素，使之氧化成膽綠素，而此時膽紅素所持有的黃色減少，由此測定釩酸鹽氧化前后450nm處吸光度差值求出樣本中膽紅素濃度?3?。 1.4方法? 1.4.1標本采集選擇300例來我院就診的患者，采用真空采血針按常規(guī)方法采集兩管靜脈血：一管為普通真空管，離心分離血清；另一管為肝素抗凝管，離心分離血漿。2h內(nèi)完成檢測。另以每100l同一患者的血清和肝素抗凝血漿標本分裝，置于-20冰凍避光保存。? 1.4.2實驗操作采用同一儀器，同一試劑，同一方法，同一操作人員，盡可能做到其它條件一致。分別對300份血清和肝素抗凝血漿標本平行測定其TB含量，并將結(jié)果記錄下來，進行對比分析。? 1.4.3線性試驗取無明顯脂血溶血的高TB病人血清和肝素抗凝血漿標本各一例，用釩酸鹽氧化法測得血清TB=335?1mol/L，血漿TB=286?4mol/L。對兩例標本用生理鹽水進行2、4、8、16、32、64倍稀釋，共計取得7個不同濃度