骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題.doc

骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題*胡榮，席煥久BonemarrowstromacellsandtraditionalChinesemedicinetotreatcerebralischemicinjuryHuRong,XiHuan-jiuAbstract:Bonemarrowstromacellspossesshighcapabilitiesofproliferationandnervedifferentiation,theyarebecomingtheidealcellsinrepairinginjuryofcentralnervoussystem.Themechanismsofactionmaybethatbonemarrowstromacellsdifferentiateintonervecells,rebuildneuralnetwork,andsecretecellfactorstopromoteendogenousnervestemcellstoproliferateanddifferentiate,thuspromotingtherecoveryofneuralfunctionandreduceapoptosisofischemiczone.TraditionalChinesemedicinehassignificanteffectsinthetreatmentofcerebralischemiainjury,andcanpromoteproliferationandnervedifferentiationofbonemarrowstromacells,sothecombinationofbonemarrowstromacellsandtraditionalChinesetreatmenthasapotentialapplicationintreatingcerebralischemiainjury.Manyproblemsareurgenttobesolved,suchasselectingquantity,stylesofimportingcells,biologysafety,thebesttimeinimplantingbonemarrowstromacellsandtraditionalChinesemedicinetogether,quantityanddosageformoftraditionalChinesemedicine.HuR,XiHJ.BonemarrowstromacellsandtraditionalChinesemedicinetotreatcerebralischemicinjury.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiuyuLinchuangKangfu2008；12(43):8544-8548(China)/zglckf/ejournal/upfiles/08-43/43k-8544(ps).pdf摘要：骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有高度的增殖能力和神經(jīng)分化潛能，是修復(fù)中樞系統(tǒng)神經(jīng)損傷的理想細(xì)胞，其作用途徑可能是通過(guò)增殖、分化替代受損神經(jīng)細(xì)胞并整合到原有的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)當(dāng)中，并分泌細(xì)胞因子促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化，以促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，減少損傷區(qū)細(xì)胞凋亡等。中藥治療缺血性腦損傷療效顯著，而且可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖與神經(jīng)分化，將中藥與骨髓基質(zhì)細(xì)胞聯(lián)合治療缺血性腦損傷具有很好的應(yīng)用前景。目前亟需解決的是骨髓基質(zhì)細(xì)胞的輸入量、途徑以及生物安全性，中藥與骨髓基質(zhì)細(xì)胞合用的時(shí)間窗、中藥的劑型和濃度等問(wèn)題。關(guān)鍵詞：骨髓細(xì)胞；中藥療法；腦缺血；腦損害胡榮，席煥久.骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題J.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2008，12(43):8544-8548/zglckf/ejournal/upfiles/08-43/43k-8544(ps).pdf0學(xué)術(shù)背景近年來(lái)高血壓、高血脂及動(dòng)脈硬化等的發(fā)病率明顯增多，導(dǎo)致腦卒中的發(fā)病率及死亡率逐年上升。因此對(duì)于缺血性腦損傷的研究意義重大，目前臨床上多使用普通藥物及溶栓治療，療效并不顯著。1學(xué)術(shù)背景很多研究證明，干細(xì)胞移植能夠促進(jìn)損傷腦神經(jīng)的修復(fù)。骨髓基質(zhì)細(xì)胞因易從體內(nèi)獲得，體外擴(kuò)增相對(duì)容易，可以自體移植、靜脈給藥等優(yōu)點(diǎn)，越來(lái)越受到人們的關(guān)注。近年來(lái)，以活血化淤為主的中草藥注射劑也應(yīng)用在缺血性腦損傷的治療中，不僅療效顯著，且不良反應(yīng)少。2目的綜合分析骨髓基質(zhì)細(xì)胞、中藥及其聯(lián)合應(yīng)用治療缺血性腦損傷的效果，并探討中藥對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的影響。3資料和方法3.1文獻(xiàn)檢索檢索人：第一作者。檢索文獻(xiàn)時(shí)限：2000-01/2007-12。檢索數(shù)據(jù)庫(kù)：Pubmed數(shù)據(jù)庫(kù)（/PubMed）及中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（/yixue/index.asp）。檢索關(guān)鍵詞：英文檢索詞“bonemarrowstromacells，traditionalChinesedrug,cerebralischemiainjury，braindamage”；中文檢索詞“骨髓基質(zhì)細(xì)胞，中藥，腦缺血，腦損害”。檢索文獻(xiàn)量：初檢得到301篇文獻(xiàn)。3.2檢索方法納入標(biāo)準(zhǔn)：骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化特性。骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療缺血性腦損傷。中藥AnthropologyLaboratoryofLiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001,LiaoningProvince,ChinaHuRong,Studyingformastersdegree,AnthropologyLaboratoryofLiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001,LiaoningProvince,CCorrespondenceto:XiHuan-jiu,Master,Professor,Doctoralsupervisor,AnthropologyLaboratoryofLiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001,LiaoningProvince,CSupportedby:theNaturalScienceFundofLiaoningProvincialEducationBureau,No.05L129*Received:2008-04-10Accepted:2008-06-30遼寧醫(yī)學(xué)院人類學(xué)研究所，遼寧省錦州市121001胡榮，女，1984年生，湖北省仙桃市人，漢族，遼寧醫(yī)學(xué)院在讀碩士，主要從事骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究。通訊作者：席煥久，碩士，教授，博士生導(dǎo)師，遼寧醫(yī)學(xué)院人類學(xué)研究所，遼寧省錦州市121001“骨髓基質(zhì)細(xì)胞修復(fù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷機(jī)制的研究”遼寧省教育廳自然基金項(xiàng)目（05L129）*中圖分類號(hào):R394.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1673-8225(2008)43-08544-05收稿日期：2008-04-10修回日期：2008-06-30(54200804070024/GY)綜述胡榮,等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題ISSN1673-8225CN21-1539/RCODEN:ZLKHAH8545治療缺血性腦損傷。骨髓基質(zhì)細(xì)胞及中藥聯(lián)合應(yīng)用治療缺血性腦損傷過(guò)程中中藥對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的影響。排除標(biāo)準(zhǔn)：篩選明顯重復(fù)、時(shí)間久遠(yuǎn)及一些明顯非隨機(jī)實(shí)驗(yàn)的文章。檢索文獻(xiàn)類型：初檢得到301篇文獻(xiàn)，中文136篇，英文165篇。閱讀標(biāo)題和摘要進(jìn)行初篩，排除因研究目的與本課題無(wú)關(guān)者160篇，內(nèi)容重復(fù)、時(shí)間久遠(yuǎn)的文獻(xiàn)71篇，再?gòu)氖Ｏ碌?0篇文獻(xiàn)中選取與本文密切相關(guān)的文獻(xiàn)30篇作為參考文獻(xiàn)。文獻(xiàn)選擇：納入的30篇文獻(xiàn)中有關(guān)骨髓基質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)分化的文獻(xiàn)11篇1-11，有關(guān)骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療缺血性腦損傷的文獻(xiàn)5篇12-16，有關(guān)中藥治療缺血性腦損傷的文獻(xiàn)7篇17-23，有關(guān)中藥對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞作用的文獻(xiàn)7篇24-30。4文獻(xiàn)證據(jù)綜合提煉4.1骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化骨髓基質(zhì)細(xì)胞最早是從骨髓中分離出來(lái)的，經(jīng)過(guò)幾十年的研究，已成功地分離了大鼠、小鼠、人、兔、狗等的骨髓基質(zhì)細(xì)胞。骨髓基質(zhì)細(xì)胞可分泌細(xì)胞外基質(zhì)和多種與造血有關(guān)的調(diào)控因子（細(xì)胞因子、黏附分子等），發(fā)揮調(diào)控造血的作用。同時(shí)骨髓基質(zhì)細(xì)胞也具有多向分化潛能：在不同的誘導(dǎo)條件下，骨髓基質(zhì)細(xì)胞可分化成為骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞，脂肪細(xì)胞等，同時(shí)還可跨胚層分化為神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞1-2。體外分化：研究表明在體外特定的條件下，人和動(dòng)物的骨髓基質(zhì)細(xì)胞都能迅速誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞3。這樣骨髓基質(zhì)細(xì)胞可成為神經(jīng)細(xì)胞源源不斷的供體，克服從腦組織中獲得神經(jīng)干細(xì)胞的危害。目前體外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)分化多使用抗氧化劑和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。Woodbury等4將成年大鼠和人的骨髓基質(zhì)細(xì)胞先在含-巰基乙醇的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h，隨后在含有丁羥基苯甲醚、二甲亞砜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，60min內(nèi)骨髓基質(zhì)細(xì)胞即有神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的改變，1周之內(nèi)，超過(guò)50的骨髓基質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的改變，并表達(dá)神經(jīng)元標(biāo)記物神經(jīng)元特異性烯醇化酶、N-乙酰神經(jīng)氨酸、NF-M等。Egusa等5用加入了腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的培養(yǎng)液培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1d之后圓形細(xì)胞占大多數(shù)，接著這些細(xì)胞長(zhǎng)出軸突和樹(shù)突形成類似神經(jīng)細(xì)胞的外形，并且還表達(dá)編碼-微管蛋白(一種早期神經(jīng)元標(biāo)記)和巢蛋白(nestin，1種神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記)的mRNA序列，但是卻很少表達(dá)神經(jīng)外胚層的標(biāo)記物Pax6和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白和MBP，這說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞在體外可以不經(jīng)過(guò)外胚層過(guò)程直接分化為神經(jīng)細(xì)胞。近年來(lái)的研究又發(fā)現(xiàn)除了抗氧化劑和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子外，還有其他物質(zhì)可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖。Deng等6體外研究發(fā)現(xiàn)，在骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入適量的環(huán)磷酸腺苷，25可分化成典型的神經(jīng)元細(xì)胞，且表達(dá)神經(jīng)元前體細(xì)胞的多種表面標(biāo)志，如微管蛋白1、神經(jīng)元微管蛋白、神經(jīng)元特定烯醇酸酶和波形蛋白。Sagara等7的研究發(fā)現(xiàn)GSH也能促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外神經(jīng)分化。體內(nèi)分化：Kopen等8將骨髓基質(zhì)細(xì)胞注入到新生鼠的腦中，12d后骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移至前腦、小腦，并不破壞腦組織結(jié)構(gòu)。有些骨髓基質(zhì)細(xì)胞（紋狀體和海馬）表達(dá)膠質(zhì)纖維酸性蛋白，分化成星狀細(xì)胞。大部分骨髓基質(zhì)細(xì)胞存在于小腦外顆粒層，而且在腦干皮質(zhì)中發(fā)現(xiàn)神經(jīng)纖維陽(yáng)性細(xì)胞，說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞在移植腦內(nèi)后也能分化成神經(jīng)元。研究表明腦梗死區(qū)特殊的微環(huán)境有利于腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子等神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)，這些神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子不但是內(nèi)源性干細(xì)胞分化信號(hào)分子，也是骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化成神經(jīng)細(xì)胞所必需的9。Lu等10的研究發(fā)現(xiàn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞不僅可通過(guò)血腦屏障到達(dá)缺血損傷部位，而且還表達(dá)微管蛋白2、N-乙酰神經(jīng)氨酸和神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白等神經(jīng)細(xì)胞的標(biāo)志性抗原蛋白。Shen等11將骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植到大腦中動(dòng)脈栓塞模型大鼠體內(nèi)，1年后取腦組織做免疫組化染色，結(jié)果發(fā)現(xiàn)供體骨髓基質(zhì)細(xì)胞仍然存在，（22.31.95）%表達(dá)星形膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物，（16.82.13）%表達(dá)神經(jīng)元表面標(biāo)志物，（5.50.42）%表達(dá)小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物。說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植體內(nèi)后也可以分化為神經(jīng)細(xì)胞，并長(zhǎng)期穩(wěn)定存在。4.2目前骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療缺血性腦損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究目前骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療缺血性腦損傷的研究主要是在動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，其療效已在不同的實(shí)驗(yàn)中得到了肯定。Borlongan等12將小鼠來(lái)源的骨髓基質(zhì)細(xì)胞直接移植到永久性大腦中動(dòng)脈栓塞四五小時(shí)后的大鼠紋狀體，結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠腦血流量和血腦屏障恢復(fù)到相對(duì)正常水平的時(shí)間要早的多；實(shí)驗(yàn)組大鼠移植的骨髓基質(zhì)細(xì)胞存活，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子水平增加。說(shuō)明移植的骨髓基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)恢復(fù)改善腦血流量和血腦屏障，從而能很快的改善神經(jīng)功能評(píng)分。邊穎等13通過(guò)尾靜脈注射骨髓基質(zhì)細(xì)胞到永久性大腦中動(dòng)脈栓塞大鼠體內(nèi)，于缺血后3，7及14d采用神經(jīng)損傷評(píng)分檢測(cè)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)功能，神經(jīng)損傷評(píng)分在第7，14天有明顯變化，而第3天和第7天無(wú)明顯變化；免疫組化方法檢測(cè)顯示神經(jīng)生長(zhǎng)因子在不同時(shí)間點(diǎn)均明顯高于對(duì)照組、梗死側(cè)大腦半球有大量的5-溴脫氧尿核苷陽(yáng)性細(xì)胞，而對(duì)側(cè)半球則僅有少量，并且5-溴脫氧尿核苷陽(yáng)性細(xì)胞在梗死邊緣區(qū)與周邊反應(yīng)區(qū)的分布呈現(xiàn)出從中心向周邊遞減趨勢(shì)。這些結(jié)果說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)血腦屏障的機(jī)制可能與腦梗死后血腦屏障的破壞、受損傷的腦組織釋放一些趨化因子有關(guān)，骨髓基質(zhì)細(xì)胞能夠提高缺血腦組織中的神經(jīng)生長(zhǎng)因子、促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，靜脈移植骨髓基質(zhì)細(xì)胞治胡榮,等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題P.O.Box1200,S療缺血性腦梗死是一種簡(jiǎn)單有效的方法。Li等14將雌鼠大腦中動(dòng)脈栓塞2h，然后在缺血24h后經(jīng)靜脈注射雄鼠同種異體或同系基因來(lái)源的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)分別接受同種異體和同系基因來(lái)源骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療的神經(jīng)功能恢復(fù)無(wú)明顯異。接受同種異體基因細(xì)胞治療的鼠體內(nèi)也未發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞的活化增生及體液性抗體的產(chǎn)生。星形膠質(zhì)細(xì)胞從肥大的星形轉(zhuǎn)變?yōu)轵蝌叫危叶级ㄏ虻饺毖獡p傷區(qū)。缺血邊緣帶個(gè)別軸突和髓鞘明顯增多，胼胝體明顯增厚，新紋狀體內(nèi)的白質(zhì)束增多，軸突放射從個(gè)別實(shí)質(zhì)神經(jīng)元擴(kuò)展到全部類似定向，增長(zhǎng)了反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞的放射狀突起，加強(qiáng)了與反應(yīng)性少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的軸突的再塑。實(shí)驗(yàn)說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞能促進(jìn)軸突的再生，接受同種異體和同系基因來(lái)源骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療的鼠得到了神經(jīng)學(xué)上的明顯恢復(fù)，而且無(wú)明顯免疫排斥反應(yīng)。Wei等15將人骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植到大腦中動(dòng)脈栓塞模型大鼠體內(nèi)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)損傷的腦神經(jīng)功能得到明顯改善，移植的細(xì)胞能夠遷移并存活一段時(shí)間，但是卻沒(méi)有發(fā)現(xiàn)表達(dá)人骨髓基質(zhì)細(xì)胞表面抗原標(biāo)志的神經(jīng)細(xì)胞。這說(shuō)明直接替代作用并不是骨髓基質(zhì)細(xì)胞修復(fù)腦損傷的主要機(jī)制。Ukai等16在大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞6h后，經(jīng)靜脈途徑將鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植鼠體內(nèi)，在缺血6h，1，3和7d觀察腦，結(jié)果實(shí)驗(yàn)組腦損傷區(qū)明顯縮小，局部腦血流量改良，神經(jīng)功能評(píng)分也得到明顯改善。這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說(shuō)明了骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)腦缺血大鼠發(fā)揮治療作用是通過(guò)多種機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)的，主要包括缺血區(qū)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子分泌增加、缺血半暗帶凋亡細(xì)胞減少和腦室下區(qū)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖等。4.3中藥在治療缺血性腦損傷中的作用中藥在國(guó)內(nèi)臨床用于預(yù)防和治療腦卒中占有重要地位，國(guó)內(nèi)研究人員通過(guò)現(xiàn)代藥理研究已發(fā)現(xiàn)許多中藥化合物及有效部位有預(yù)防和治療缺血性腦損傷的作用。這些中藥對(duì)于缺血性腦損傷的作用主要體現(xiàn)在下幾個(gè)方面。改善血液凝聚功能：有學(xué)者發(fā)現(xiàn)人參、丹參、元胡3種中藥飲片的有效組分可明顯降低花生四烯酸、二磷酸腺苷和膠原誘導(dǎo)的家兔血小板聚集率，抑制大鼠體外血栓的形成，降低全血黏度和血漿黏度。有人證明丹參、海藻、銀杏葉、膽南星、川芎、絞股藍(lán)、三七、石菖蒲、肉蓯蓉組成的復(fù)方可降低急性血瘀模型大鼠的高中低切黏度、血漿黏度、還原黏度、聚集指數(shù)、電泳時(shí)間、血沉、纖維蛋白原、紅細(xì)胞壓積，增加小鼠耳廓毛細(xì)血管開(kāi)放數(shù)目及血流速度；減輕腦缺血模型大鼠的腦水腫，降低腦指數(shù)及血管通透性。葛根素注射液能明顯降低缺血性腦血管疾病患者的全血黏度、血漿比黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞比積和纖維蛋白原定量，明顯改善缺血性腦血管疾病患者的療效17。還有研究表明龍血竭總黃酮有抑制靜脈血栓形成的作用。增加腦血流量：含有鹽酸川芎嗪、三七總皂苷、銀杏提取物的藥物復(fù)方能促進(jìn)腦膜微循環(huán)，增加血流量，防治局部腦缺血。人參、丹參、元胡3種中藥飲片為原料提取的有效組分可明顯增加腦血流量，對(duì)不完全性腦缺血、急性腦缺血、局灶性腦缺血均有保護(hù)作用。從藿香中分離到的揮發(fā)油對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦膜血流量有明顯升高作用，并有升高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦一氧化氮含量的作用。黃芪可以降低血液黏度，減輕腦水腫及血管狹窄，減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞及管周腫脹，加快血流速度，改善腦部血液供應(yīng)，增加腦血流量，保護(hù)血管正常功能、維持微血管正常形態(tài)，改善微循環(huán)18。腦缺血損傷的保護(hù)作用：研究發(fā)現(xiàn)黃芪、丹參、川芎、蒼術(shù)、石菖蒲、黃連、冰片組成的復(fù)方可提高學(xué)習(xí)和記憶能力，可用于慢性腦功能不全綜合征，腦血栓、腦動(dòng)脈硬化、腦創(chuàng)傷、腦卒中、腦炎引起的意識(shí)障礙等癥，見(jiàn)效快，療效顯著，對(duì)氣虛血淤，虛實(shí)夾雜型的效果最好。知母中的知母總皂苷明顯改善大鼠腦缺血再灌注損傷引起的行為癥狀、縮小腦梗死體積、降低腦缺血大鼠腦水腫，為防治腦卒中提供了1種新的藥物來(lái)源。葛根素水溶性較差，有學(xué)者發(fā)明了含水溶性基團(tuán)的系列葛根素化合物的制法，該組合物可用于治療或預(yù)防心腦血管疾病。葛根索對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞有保護(hù)作用，其機(jī)制與葛根索在機(jī)體缺血再灌注時(shí)通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2+的聚集，減輕細(xì)胞損傷有關(guān)，還可能與葛根素通過(guò)上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，下調(diào)Bax蛋白的表達(dá)從而抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡發(fā)揮神經(jīng)元保護(hù)作用等相關(guān)19。當(dāng)歸能顯著減少腦梗死體積，有助于神經(jīng)功能的恢復(fù)，且使血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2的mRNA表達(dá)明顯增加，并通過(guò)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與其相互作用發(fā)揮了血管生成和神經(jīng)保護(hù)的作用；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2的大量表達(dá)，增加了新生血管形成及側(cè)支循環(huán)的建立，有助于缺血半暗帶向有利的方向發(fā)展，促進(jìn)了缺血性腦損傷疾病的恢復(fù)20。4.4中藥在缺血性腦損傷中的臨床應(yīng)用近年來(lái)隨著制藥工業(yè)的發(fā)展又出現(xiàn)了中藥注射液，使用更加方便，在急性缺血性腦卒中的治療中也體現(xiàn)出更大價(jià)值，再來(lái)中藥不良反應(yīng)相對(duì)較少，因此中藥在缺血性腦損傷中的臨床應(yīng)用越來(lái)越廣泛、重要。中藥常用劑型：中藥的劑型發(fā)展到現(xiàn)在，總的來(lái)講可分為兩大類：一類為傳統(tǒng)制劑，如丸散膏丹、酒露湯飲等；另一類稱為新制劑，如酊水油膏、針片沖栓等。湯劑是國(guó)內(nèi)應(yīng)用最早、使用最廣泛的一種劑型，以能適應(yīng)中醫(yī)辨癥施治，隨癥加減的原則為獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)又具有液體制劑的優(yōu)點(diǎn)，既吸收快，又能迅速發(fā)揮藥效，至今仍在臨床廣泛應(yīng)用，但是其口服味苦，體積大，并不適合對(duì)重癥急癥的搶救。丸劑、散劑也是中國(guó)古代中藥常用劑型，但是由于其本身的限制性，現(xiàn)代醫(yī)療中使用越來(lái)越少。隨著制藥工業(yè)及中藥事業(yè)的發(fā)展，又逐漸胡榮,等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題ISSN1673-8225CN21-1539/RCODEN:ZLKHAH8547出現(xiàn)了沖劑、針劑等，使得使用更加方便。沖劑保留了湯劑作用迅速、吸收快的特點(diǎn)，又克服了湯劑煮煎不便等缺點(diǎn)，臨床應(yīng)用也十分廣泛。近四五十年出現(xiàn)了中藥注射劑，它直接進(jìn)入血液循環(huán)，吸收快作用迅速，且不受消化系統(tǒng)的影響，已成為現(xiàn)在臨床治療缺血性腦損傷的主要?jiǎng)┬?。近年?lái)治療缺血性腦損傷臨床常使用的中藥注射液主要有清開(kāi)靈及醒腦靜針劑、舒血寧注射液、川芎嗪注射液、刺五加注射液、燈盞花素注射液、葛根素注射液、紅花注射液、益母草注射液、黃芪注射液、通脈酯注射液、生脈注射液、血栓通注射液、銀杏針劑等。中藥在缺血性腦損傷中的臨床療效：由于中藥注射液的廣泛使用，中藥治療缺血性腦損傷的療效大大提高，且不良反應(yīng)少。很多臨床實(shí)驗(yàn)也證明了中藥在缺血性腦損傷中的顯著療效。王紅等21將76名腦梗死患者分為兩組，對(duì)照組給予腦梗死常規(guī)治療，包括降顱內(nèi)壓，抗凝，溶栓擴(kuò)充血容量，降血壓、降血脂、降血糖等治療，實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用葛根素注射液。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組總有效率為92.11%，只有3名患者病情無(wú)明顯變化，其余都有不同程度好轉(zhuǎn)；對(duì)照組總有效率為71.05%，還有2名患者病情惡化。楊霄鵬等22選擇88例急性腦梗死患者，隨機(jī)分成治療組和對(duì)照組。治療組給予燈盞花注射液，對(duì)照組給予丹參注射液，結(jié)果治療組神經(jīng)功能明顯改善，優(yōu)于對(duì)照組；總有效率88.6%，明顯高于對(duì)照組的59.1%，并且并無(wú)不良反應(yīng)出現(xiàn)，說(shuō)明燈盞花注射液治療腦梗死十分安全有效?？抵拘鄣?3將確診的80名急性腦梗死患者隨機(jī)分為兩組：治療組用紅花注射液40mL加生理鹽水250mL靜脈輸注；對(duì)照組用丹參針16mL加生理鹽水250mL靜脈輸注，兩組治療均1次/d，療程均為15d。結(jié)果治療組總有效率為90%，100%，明顯優(yōu)于對(duì)照組的62%，50%；治療組梗死灶體積縮小較對(duì)照組更明顯，整個(gè)治療過(guò)程中未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。隨著中藥及現(xiàn)代制藥工業(yè)的發(fā)展，越來(lái)越多的中藥應(yīng)用到臨床治療缺血性腦損傷，效果越來(lái)越顯著，不良反應(yīng)逐漸減少，中藥使用愈加安全有效。4.5中藥對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的作用近年來(lái)在很多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的研究也取得了一定的成果，但是卻未取得重大性的突破，未能應(yīng)用于臨床，因此急需尋找一些新的突破點(diǎn)。目前國(guó)內(nèi)外一些研究者已利用一些神經(jīng)因子成功轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞，并且證明了轉(zhuǎn)染過(guò)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞修復(fù)腦損傷的作用更強(qiáng)。近年來(lái)開(kāi)始有一些研究者把目光轉(zhuǎn)向中國(guó)傳統(tǒng)的中醫(yī)藥。以活血化淤為主的中草藥通過(guò)改善血液凝聚功能，增加腦血流量，以及對(duì)腦缺血損傷的保護(hù)作用可以為骨髓基質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮作用提供一個(gè)穩(wěn)定的微環(huán)境。這為二者的聯(lián)合應(yīng)用提供了良好的基礎(chǔ)。而且近年來(lái)已有一些研究報(bào)道某些中藥本身對(duì)于骨髓基質(zhì)細(xì)胞有促進(jìn)作用。一些以活血化淤為主的中藥可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖：研究表明某些中草藥本身就可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖。劉海江等24分別用淫羊藿苷和黃芪苷處理狗骨髓基質(zhì)細(xì)胞，繪制骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線以及骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌堿性磷酸酶的吸光度曲線，處理組與對(duì)照組相比生長(zhǎng)曲線最高值與堿性磷酸酶吸光度值明顯高很多，說(shuō)明淫羊藿苷和黃芪苷能促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶的分泌。Luo等25的研究也表明益中藥腎清火處方能促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖。郭平等26研究發(fā)現(xiàn)川芎嗪通過(guò)促進(jìn)人骨髓成纖維樣基質(zhì)細(xì)胞由G0/G1期進(jìn)入S期，從而促進(jìn)人骨髓成纖維基質(zhì)細(xì)胞增殖，并使該細(xì)胞的9種蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)。但是這些中藥促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖的機(jī)制還不清楚。某些中藥可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化：多年來(lái)的研究已確證抗氧化劑能夠促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化，而很多用來(lái)治療缺血性腦損傷的中藥其主要成分都具有抗氧化的作用。如葛根素、丹參、當(dāng)歸和黃芪等。夏文杰等27利用隱丹參酮體外誘導(dǎo)成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)加入隱丹參酮誘導(dǎo)液3h后骨髓基質(zhì)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，胞質(zhì)向核收縮，呈典型的核周體形態(tài)，7h后，大多數(shù)骨髓基質(zhì)細(xì)胞均轉(zhuǎn)變?yōu)轭愃朴谏窠?jīng)元形態(tài)，突起伸出(軸突)，并在軸突末端出現(xiàn)1級(jí)和2級(jí)分支，類似樹(shù)突。免疫組織化學(xué)染色顯示大多數(shù)細(xì)胞Nestin染色陽(yáng)性，呈棕黃色，從簡(jiǎn)單的雙極細(xì)胞到復(fù)雜的多極細(xì)胞均有出現(xiàn)，部分神經(jīng)元拉成網(wǎng)狀，對(duì)照組無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)。細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示神經(jīng)元特定烯醇酸酶陽(yáng)性細(xì)胞為(79.23.4)%，NF-M陽(yáng)性細(xì)胞為(78.13.1)%，NF-H陽(yáng)性細(xì)胞為(74.22.6)%。次年，夏文杰等28又成功利用丹參酮A在體外誘導(dǎo)成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞（隱丹參酮和丹參酮A都是中藥丹參的主要成分）。陸長(zhǎng)青等29用丹參誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，誘導(dǎo)后90min，神經(jīng)元樣細(xì)胞數(shù)目逐漸增多，相鄰神經(jīng)元樣細(xì)胞胞體或突起相連，形成網(wǎng)狀；提取誘導(dǎo)前后的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)ngn-1，mash-I（mash-1和ngn-I都是發(fā)育相關(guān)基因，同屬于bHLH家族，與細(xì)胞分化成熟過(guò)程密切相關(guān)。尤其與神經(jīng)元的分化成熟密切關(guān)系）的表達(dá)，結(jié)果未經(jīng)誘導(dǎo)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞ngn-1，mash-1mRNA為陰性，誘導(dǎo)后有表達(dá)，表明誘導(dǎo)出的神經(jīng)元樣細(xì)胞除在形態(tài)上具有神經(jīng)元的特征外，在基因水平也有改變。免疫組化結(jié)果顯示誘導(dǎo)后的細(xì)胞神經(jīng)元特定烯醇酸酶和神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白呈陽(yáng)性反應(yīng)。丹參能夠誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化可能與其抗氧化作用有關(guān)。王媛等30用刺五加液體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞，4h后細(xì)胞折光性變強(qiáng)，部分胞體收縮呈三角形、圓形或不規(guī)則形，偽足形成細(xì)長(zhǎng)突起，類似神經(jīng)細(xì)胞，少量細(xì)胞脫落、死亡；24h后突起增多呈網(wǎng)絡(luò)狀，神經(jīng)元標(biāo)志物神經(jīng)元特定烯醇酸酶及微管蛋白2陽(yáng)性，而神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白表達(dá)陰性，表明這些細(xì)胞為神經(jīng)元樣細(xì)胞而不是膠質(zhì)細(xì)胞。胡榮,等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞與中藥合用治療缺血性腦損傷的相關(guān)問(wèn)題P.O.Box1200,S其他：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子既是一種高度特異的內(nèi)皮細(xì)胞絲裂原，又是血管生成素、細(xì)胞生長(zhǎng)因子。血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、T，B淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞、血小板等為其特異性靶細(xì)胞。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子通過(guò)與靶細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖、移行，增加血管通透性，調(diào)節(jié)血管新生及血管形成。有研究發(fā)現(xiàn)川芎嗪可能通過(guò)增加骨髓基質(zhì)細(xì)胞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平，從而促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育及功能。另有研究表明當(dāng)歸注射液能夠促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體表達(dá)。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等都可以促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)，增殖和分化，為移植入缺血損傷區(qū)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞提供存活、分化的有利環(huán)境，促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)分化。骨髓基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)靜脈或者腹腔注射等其他途徑移植體內(nèi)時(shí)，并非所有細(xì)胞都能通過(guò)血腦屏障，利用活血化淤的中草藥可以改善和促進(jìn)全身血循環(huán)的特點(diǎn)是否可以促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)血腦屏障；在體內(nèi)中草藥是否可以與骨髓基質(zhì)細(xì)胞相互促進(jìn)協(xié)同，使雙方都能發(fā)揮更大作用等等。中藥對(duì)于骨髓基質(zhì)細(xì)胞多方面的作用說(shuō)明骨髓基質(zhì)細(xì)胞和中藥聯(lián)合應(yīng)用治療缺血性腦損傷具有很好的醫(yī)療前景。5結(jié)論國(guó)內(nèi)外大量研究證實(shí)，骨髓基質(zhì)細(xì)胞能夠治療缺血性腦損傷。一些研究也表明某些以活血化淤為主的中藥能夠促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、神經(jīng)分化，改善缺血受損腦組織的微循環(huán)，促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞修復(fù)腦損傷的作用。但是具體作用途徑還不清楚，將中藥與骨髓基質(zhì)細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用還處于初步階段，其中有很多問(wèn)題需要進(jìn)一步研究解決。比如用中藥先處理骨髓基質(zhì)細(xì)胞還是將中藥和細(xì)胞都移植入體內(nèi)；分別將骨髓基質(zhì)細(xì)胞和中藥移植體內(nèi)的最佳時(shí)間窗；中藥采用何種劑型、何種劑量效果最佳；何種中藥效果最佳等。這些問(wèn)題的解決有待進(jìn)一步研究，爭(zhēng)取早日將骨髓基質(zhì)細(xì)胞應(yīng)用于臨床。6參考文獻(xiàn)1ChenX,WangXD,ChenG,etal.StudyofinvivodifferentiationofratbonemarrowstromacellsintoSchwanncell-likecells.Microsurgery2006；26(2):111-1152SuzukiH,TaguchiT,TanakaH,etal.Neurospheresinducedfrombonemarrowstromacellsaremulti-potentfordifferentiationintoneuron,astrocyte,andoligodendrocytephenotypes.BiochemBiophysResCommun2004；322(3):918-9223DezawaM,KannoH,HoshinoM.,etal.Specificinductionofneuronalcellsfrombonemarrowstromacellsandapplicationforautologoustransplantation.ClinInvest2004；113(12):1701-17104WoodburyD,SchwarzEJ,ProckopDJ,etal.Adultratandhumanbonemarrowstromacellsdifferentiateintoneurons.NeurosciRes2000；61(4):364-3705EgusaH,SchweizerFE,WangCC,etal.Neuronaldifferentiationofbonemarrow-derivedstromalstemcellsinvolvessuppressionofdiscordantphenotypesthroughgenesilencing.BiolChem2005；280(25):23691-236976DengW,ObrockaM,FicherI,etalInvitrodifferentiationofhumanmarrowstromacellsintoearlyprogenitorsofneuralcellsbyconditionsthatincreaseintracellularcyclicAMP.BiochemBiophysResCommun2001；282(1):148-1527SagaraJ,MakinoN.Glutathioneinducesneuronaldifferentiationinratbonemarrowstromalcells.NeurochemRes2008；33(1):16-218KopenGC,ProckopDJ,PhinneyDG,etal.Marrowstromacellsmigratethroughoutforebrainandcerebellumandtheydifferentiateintoastrocytesafterinjectionintoneonatalmousebrains.ProcNatlAcadSciUSA1999；96(19):10711-107169AbeK,Therapeuticpotentialofneurotrophicfactorsandneuralstemcellsagainstischemicbraininjury.CerebBloodFlowMetab2000；20(10):1393-140810LuD，LiY，WangL，etal.Intraarterialadministrationofmarrowstromacellsinaratmodeloftraumaticbraininjury.Neumtrauma2001；18(8):813-81911ShenLH,LiY,ChenJ,etal.One-yearfollow-upafterbonemarrowstromacelltreatmentinmiddle-agedfemaleratswithstroke.Stroke2007；38(7):2150-215612BorlonganCV,LindJG,Dillon-CarterO,etal.Bonemarrowgraftsrestorecerebralbloodflowandbloodbrainbarrierinstrokerats.BrainRes2004；1010(1-2):108-11613邊穎,何志義,石艷玲,等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療大鼠缺血性腦梗死對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子的影響J.中國(guó)醫(yī)學(xué)雜志,2005,8(15)：2278-228014LiY,McIntoshK,ChenJ,etal.Allogeneicbonemarrowstromacellspromoteglial-axonalremodelingwithoutimm