質(zhì)譜培訓(xùn)教材.ppt

ThermoScientificChina-DemoCenter-,LTQ液質(zhì)聯(lián)用儀培訓(xùn)教材,質(zhì)譜基本常識,第一章,“ThebasisinMS(massspectrometry)istheproductionofions,thataresubsequentlyseparatedorfilteredaccordingtotheirmass-to-charge(m/z)ratioanddetected.Theresultingmassspectrumisaplotofthe(relative)abundanceoftheproducedionsasafunctionofthem/zratio.”（質(zhì)譜的基礎(chǔ)是產(chǎn)生離子，這些離子隨后按質(zhì)荷比大小被分離過濾并被檢測。得到的質(zhì)譜圖是產(chǎn)生離子質(zhì)荷比的相對豐度圖譜。）,Niessen,W.M.A.;VanderGreef,J.,LiquidChromatographyMassSpectrometry:PrinciplesandApplications,1992,MarcelDekker,Inc.,NewYork,p.29.,什么是質(zhì)譜？,怎樣理解質(zhì)譜,LC-MS垂直置于壁上氣化溶劑冷卻后不被凝結(jié),所改進(jìn)的不銹鋼的廢液排出部件,探針垂直安裝液滴直接進(jìn)入廢液排出口，即使氮?dú)庥猛?，也不會在腔室?nèi)累積溶劑。,非塑料外殼,便于觀看的兩個(gè)視角,鈦制成的新型Skimmers:直徑較大，提高靈敏度鈦材料更有利于保持skimmer的熱平衡，不銹鋼材料會逐漸冷卻所以可作為加熱器,IonMax源:Skimmer,APIStack裝配示意圖,LC-MS條件優(yōu)化,第二章,Sampleconcentration樣品濃度Choiceofcolumnandsolvents柱子型號和溶劑Flowratesandtheireffects流速及影響,LC/MS條件優(yōu)化,樣品信息你需要得到盡可能多的樣品信息！,目標(biāo)分析物的信息包括以下分子式,結(jié)構(gòu)(官能團(tuán))分子量溶解性,pKa穩(wěn)定性,儲存是否有標(biāo)準(zhǔn)品濃度水平和范圍基質(zhì)信息:類型,狀態(tài)(液體,固體)溶解性不同成份,樣品預(yù)處理提高靈敏度,去除基質(zhì)干擾離子抑制建立去除基質(zhì)干擾的方法(SPE,萃取,過濾等)進(jìn)樣濃度與進(jìn)樣量和柱內(nèi)徑有關(guān),ESI:1L/min-1mL/min最佳使用流速:200L/min一般來說,高流速需要高的毛細(xì)管溫度和氣體流速。APCI:200L/min-2mL/minOptimalFlowRate:500L/min一般來說，高流速需要更高的鞘氣和輔助氣流量，但不需要提高毛細(xì)管溫度,LC建議流速,液相柱(標(biāo)準(zhǔn)裝柱填料直徑5.0mm)最適合的流速(線性速度),流速柱子直徑1.0mL/min4.6mm0.5mL/min3.0mm0.2mL/min2.1mm50mL/min1.0mm10mL/min毛細(xì)管,使用窄內(nèi)徑的柱子可以提高分離效果,LC添加劑,酸不要使用無機(jī)酸(可能會導(dǎo)致腐蝕)推薦使用醋酸和甲酸堿不要使用堿金屬堿(可能會導(dǎo)致腐蝕)推薦使用氫氧化銨和氨水表面活性劑清潔劑和其他表面活性劑會產(chǎn)生離子抑制三氟醋酸(TFA)可以提高液相的分離度，但是在質(zhì)譜正負(fù)離子模式下會產(chǎn)生離子抑制作用三乙胺/三甲胺(TEA/TMA)有助于形成負(fù)離子,增加TFA用量(乙腈:水=50:50)對質(zhì)譜信號強(qiáng)度的影響,本結(jié)果是兩次實(shí)驗(yàn)的平均值.*注:不加TFA的結(jié)果是不確定的，因?yàn)樵谌芤簾o法肽段質(zhì)子化。對照樣品是50/50/0.1,甲醇/水/甲酸(N=6,平均信號強(qiáng)度=1.10 x106counts.,*S.Baldwin,K.Stoney,K.Wheeler,I.Mychreest.“LowpHSolventAlternativestoTFASolventsandTheirEffectonHPLC/ESI-MSofPeptides”,PosterPaperPresentedatASMS96.,液質(zhì)聯(lián)用中緩沖鹽使用的注意事項(xiàng)(pH),當(dāng)使用非揮發(fā)性的鹽時(shí),一定要使用吹掃擋錐（sweepcone）。盡量避免使用如下的非揮發(fā)性鹽堿金屬磷酸鹽硼酸鹽檸檬酸鹽經(jīng)常使用緩沖鹽需要定期清洗金屬毛細(xì)管,乙酸甲酸氫氧化銨氨水溶液三氯乙酸(0.02%v/v)三氟乙酸(0.02%v/v)三乙胺(Activation2.設(shè)定ActivationType，DefaultChargeState，IsolationWidth和NormalizedCollisionEnergy,BuildingDoublePlay:ScanEventTwo,選擇ScanEventCurrentScanEvent設(shè)定Minimumsignalthreshold(counts，絕對強(qiáng)度)；用一級全掃描模式采集一個(gè)空白數(shù)據(jù)，在QualBrowser里查看該數(shù)據(jù)得到；確定兩處均設(shè)為1；,實(shí)驗(yàn)總結(jié),常用DataDependentLCQExperiments設(shè)定,Big3:步驟:一級全掃描對最強(qiáng)的離子，第二強(qiáng)的離子以及第三強(qiáng)的離子做數(shù)據(jù)相關(guān)DataDependent(dd)MS2優(yōu)點(diǎn)/缺點(diǎn):MS2花費(fèi)時(shí)間很長能采到峰頂點(diǎn)位置的信號DoublePlaywithDynamicExclusion:步驟:一級全掃描啟用DynamicExclusion，對最強(qiáng)的離子做數(shù)據(jù)相關(guān)DataDependent(dd)MS2優(yōu)點(diǎn)/缺點(diǎn):為分析共流出物提供可能可能丟失出峰的頂點(diǎn)位置,DynamicExclusion共流出物的MS&MS2,DynamicExclusion,1.選擇GlobalDynamicExclusion2.設(shè)定Repeatcount,Repeatduration,Exclusionlistsize,Exclusionduration和Exclusionmasswidth,*以上設(shè)置導(dǎo)致0.2分鐘內(nèi)采集了三次MS/MS圖譜，0.3分鐘后該排除離子獲得釋放*ExclusionMassWidth中Low和High的設(shè)置可以是不對稱的，High的設(shè)定較寬，可以包含同位素峰,DivertValve操作,方法總結(jié),DataDependentTriggers數(shù)據(jù)相關(guān)采集系列,第九章,Xcalibur-SequenceSetup,XcaliburHomePageSequenceSetup,打開SequenceSetup,點(diǎn)擊ViewSequenceSetupView,也可點(diǎn)擊SequenceSetup,創(chuàng)建序列,1.雙擊添加InstrumentMethod,2.如果此路徑下沒有該文件夾,你可以輸入文件夾名，該文件夾將會創(chuàng)建,3.設(shè)定FileName(無空格),Position和InjVol,如果你的樣品數(shù)比較少，從SequenceSetup主頁建序列更方便,運(yùn)行序列需要提供的基本信息:FileName,Path,InstMeth,Position,InjVol,創(chuàng)建序列,熱鍵F2，可以編輯該文本,右擊并選擇OpenFile可以打開InstrumentFile,用新序列模板創(chuàng)建序列,如果你需要運(yùn)行大量的樣品,使用NewSequenceTemplate創(chuàng)建序列會比較方便,1.點(diǎn)擊New,新序列模板,1.選擇BaseFileName,Path,&InstrumentMethod,3.選擇起始的VialPosition,2.輸入unknown樣品的個(gè)數(shù),4.如果你已經(jīng)有ProcessingMethod,在上面指定好，你可以添加Standards,Blanks以及QCs。會自動(dòng)生成包括processingmethod相關(guān)信息的序列,新序列模板,一旦你在NewSequenceTemplate界面點(diǎn)擊OK,文件名會自動(dòng)根據(jù)BaseFileName自動(dòng)往下遞增,新序列模板,IfyouwanttotypeanewFileName:,2.選擇Edit點(diǎn)擊FillDown,1.輸入Filename,改變序列中ColumnArrangement,1.選擇Change點(diǎn)擊ColumnArrangement,2.從左邊的AvailableColumns選擇需要的內(nèi)容,4.點(diǎn)擊MoveUp或者Down改變顯示次序,3.點(diǎn)擊Add,改變用戶標(biāo)簽,1.選擇Change并點(diǎn)擊UserLabels,2.改變labels,改變Tray,當(dāng)前配置的自動(dòng)進(jìn)樣器能夠使用的所有進(jìn)樣架列表,1.選擇Change點(diǎn)擊TrayName,2.選擇使用的Tray型號,將序列輸出到Excel,1.選擇File，點(diǎn)擊ExportSequence,將序列輸出到Excel,1.選擇需要輸出的內(nèi)容并點(diǎn)擊Browse,2.命名該文件,3.序列文件將輸出為.csv格式,輸出序列示例,確保重新將該序列導(dǎo)入Xcalibur,第一行必須包含文本BracketType=nwheren=1-4.每個(gè)數(shù)字代表特定的bracket類型:1=Overlapped,2=None,3=Non-overlapped,4=Open,從Excel中導(dǎo)入序列,2.選擇你需要輸入的內(nèi)容，點(diǎn)擊Browse找到輸入文件,1.選擇File并點(diǎn)擊ImportSequence,運(yùn)行序列,1.可以選擇RunOneSample或RunSequence,運(yùn)行序列,顯示在InstrumentConfiguration界面配置的所有儀器,允許自動(dòng)處理樣品數(shù)據(jù),如果沒選,序列將不會運(yùn)行，除非你點(diǎn)擊ActionsStartAnalysis,確認(rèn)這些行是待運(yùn)行的,可以優(yōu)先運(yùn)行提交的序列,選擇在序列運(yùn)行前或后儀器的運(yùn)行方法,信息條,AcquisitionQueue-SequenceProgress,Status,通過點(diǎn)擊ViewanduncheckingInfoView打開或關(guān)閉InfoView,Status鍵顯示所有配置儀器的狀態(tài),提交序列后,就會出現(xiàn)在AcquisitionQueue。點(diǎn)擊Sample旁邊的方框，框內(nèi)打勾，鍵盤上再點(diǎn)擊Delete鍵即可刪除該樣品,實(shí)時(shí)圖譜查看,1.選擇View，點(diǎn)擊RealTimePlotView,如果你更改了該頁面的一些設(shè)定,點(diǎn)擊解鎖鍵，重新監(jiān)測實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)采集,第十章,QualBrowser定性瀏覽器,打開QualBrowser,你可以在XcaliburHomepage右擊QualBrowser,打開原始數(shù)據(jù)或序列,打開QualBrowser,QualBrowser主界面,InfoBar,放大按鈕，可以放大色譜圖或質(zhì)譜中某段區(qū)域,主要工具,最多每個(gè)窗口一次可以顯示16個(gè)cells，每個(gè)cell最多包含8個(gè)plots,右上角有Cell的標(biāo)志,在QualBrowser界面打開文件,2.選擇replace(當(dāng)前window,cell或plot),addanewwindoworplot(默認(rèn)是增加一個(gè)新窗口),選擇輸出的Layout,1.點(diǎn)擊File選擇Open(也可以打開序列或結(jié)果文件),TheInfoBar,TheCellInfo頁面提供對應(yīng)Cell中每個(gè)Plot信息,如果你打開的是序列或結(jié)果文件，將分別出現(xiàn)在InfoBar的第二頁和第三頁,當(dāng)你對色譜峰進(jìn)行積分時(shí)，會出現(xiàn)Integration頁面。你可以改變積分參數(shù)獲得合理的積分,TheInfoBarElementalComposition,2.設(shè)定分子式的限定條件,3.改變使用的元素,右擊選擇AddIsotopes，直接從元素周期表界面進(jìn)行選擇,1.輸入質(zhì)量數(shù)或在質(zhì)譜圖某個(gè)質(zhì)量數(shù)上右擊，選擇GenerateFormulafromMass,4.點(diǎn)擊Calculate，表格中即出現(xiàn)分子式信息,InfoBar之ElementalComposition幫助你計(jì)算最符合某個(gè)質(zhì)量數(shù)（來自于質(zhì)譜圖）的化學(xué)分子式,IsotopeSimulator同位素?cái)M合同位素?cái)M合頁面允許用戶建立一個(gè)化學(xué)分子式同位素分布質(zhì)譜圖,定性瀏覽器信息欄,IsotopeSimulator同位素?cái)M合allowsyoutocreateasimulatedspectrumforachemicalformulaentered,TheInfoBarIsotopeSimulator,2.設(shè)定參數(shù),輸入化學(xué)分子式,3.點(diǎn)擊new,4.出現(xiàn)該化學(xué)分子式的精確質(zhì)量數(shù)，擬合的圖譜出現(xiàn)在新的窗口,InfoBarMSnBrowser頁面顯示并幫助你分析MSn實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),TheInfoBarMSnBrowser,2.點(diǎn)擊顯示隱藏信息,1.如果MSnbrowser頁面不顯示任何數(shù)據(jù)，激活質(zhì)譜圖,3.可以雙擊得到平均（Average）或復(fù)合的質(zhì)譜圖(CompositeSpectrum),4.也可以右鍵選擇Includeindividualscans,QualBrowserLayouts,2.保存Layout或?qū)⒃揕ayout設(shè)置為默認(rèn)格式,1.根據(jù)需要設(shè)定好cells,plots,integration等等。,3.選擇Layout格式打開后續(xù)文件,放大,1.激活cell,2.平行X軸或Y軸拖動(dòng)鼠標(biāo)或在目標(biāo)區(qū)域拖動(dòng)成方框,將色譜圖中某個(gè)峰取平均質(zhì)譜圖,1.激活質(zhì)譜圖,2.鼠標(biāo)拖過對應(yīng)色譜峰得到平均質(zhì)譜圖,3.AV告訴你幾次掃描的平均(如：AV:7=七次掃描的平均質(zhì)譜圖),從色譜圖中提取某個(gè)離子,1.激活色譜圖,2.也可以直接鼠標(biāo)拖過質(zhì)譜峰得到鼠標(biāo)拖動(dòng)質(zhì)量范圍的EIC或者鼠標(biāo)點(diǎn)擊質(zhì)譜峰得到該質(zhì)量數(shù)的提取離子流圖。窗口大小根據(jù)chromatogram里Ranges中MassTolerance的設(shè)定自動(dòng)調(diào)整,右擊Chromatogram-PeakDetection,1.右擊chromatogram選擇PeakDetection,2.選擇ToggleDetectioninThisPlot或inAllPlots,3.InfoBar顯示積分參數(shù),右擊Chromatogram-AutoFilter,AutoFilter可以自動(dòng)顯示scanfilters(目標(biāo)物分析有用)，第一張圖(上)沒有任何ScanFilter。其他圖對應(yīng)在方法里設(shè)定的scanfilters(最多同時(shí)顯示8張圖),右擊Chromatogram-ChromatogramRanges,1.右擊chromatogram選擇Ranges,右擊Chromatogram-ChromatogramRanges,點(diǎn)擊添加plots(最多8個(gè)),點(diǎn)擊選擇文件,改變檢測器,積分算法和延遲時(shí)間,ChromatogramRangesScanFilter,點(diǎn)擊向下箭頭選擇任何更加特定的ScanFilter,可以在此輸入ScanFilter(如，F(xiàn)ullms,Fullms2,Fullms3等。依次逐個(gè)顯示所有MS,MS2和MS3掃描)。layout可以保存為默認(rèn)格式，這樣即使scanranges改變,也沒有必要改變ScanFilter。如果ScanFilter處是空白,將顯示采集的所有掃描，不管是MS，還是MSn),ChromatogramRangesPlotTypes,1.點(diǎn)擊更換Plottype,TIC每次Scan所有離子疊加的色譜圖BasePeak每次Scan最強(qiáng)離子提取的色譜圖BasePeak色譜圖會使Fullms數(shù)據(jù)通?？雌饋砀靡恍?，因?yàn)榇罅康脑胍舯蝗コ?ChromatogramRangesExtractedIonChromatogram,1.Scanfilter選為Fullms或者刪除Scanfilter查看所有Scan,3.在Range(s)框輸入質(zhì)量數(shù)或質(zhì)量數(shù)范圍。如果需要輸入多個(gè)質(zhì)量數(shù)，范圍將根據(jù)Automaticprocessing里masstolerance的設(shè)定來決定,2.可以選擇MassRange(TIC)或BasePeak,在ChromatogramRanges界面有多種方式可以提取離子,ChromatogramRangesNeutralFragment,1.刪除Scanfilter,2.選擇NeutralFragment,3.輸入NeutralFragment質(zhì)量數(shù),NeutralFragmentPlottype將顯示所有符合你設(shè)定中性丟失的碎片離子(從MS到MS2),ChromatogramRangesAutomaticProcessing,1.對色譜圖施加平滑參數(shù),平滑點(diǎn)數(shù)必須是奇數(shù),右擊Chromatogram-Display選項(xiàng),1.右擊chromatogram并選擇DisplayOptions,Display選項(xiàng)可以修改色譜圖顯示外觀(如Style,Color,Labels,Axis&Normalization),Xcalibur當(dāng)前設(shè)定的顯示結(jié)果,右擊Spectrum-SpectrumList（質(zhì)譜圖列表）,SpectrumList包括質(zhì)譜圖中每個(gè)離子的m/z,絕對強(qiáng)度和相對強(qiáng)度,右擊Spectrum-ScanHeader,ScanHeader允許查看信息如scanmode,ioninjectiontime,scantime等，和色譜上的每一次Scan相關(guān)聯(lián)（使用主工具欄上的箭頭瀏覽每次Scan的信息）,右擊Spectrum-TuneandInstrumentMethods,Tune和Instrument方法包含在RawFile中。當(dāng)選擇InstrumentMethod，首先顯示的是質(zhì)譜方法，點(diǎn)擊鍵盤上的向下鍵或主工具欄鍵瀏覽液相泵和自動(dòng)進(jìn)樣器的方法,右擊Spectrum-SpectralSubtraction,1.對目標(biāo)峰取平均質(zhì)譜圖,2.右擊spectrum選擇SubtractSpectra-2Ranges,3.在該峰前后拖動(dòng)鼠標(biāo)選擇被扣除的區(qū)域,右擊Spectrum-SpectrumRanges,1.右擊spectrum選擇Ranges,右擊Spectrum-SpectrumRanges,這里同樣可以設(shè)定SubtractSpectrum,在圖譜中添加備注,1.添加文本,點(diǎn)擊Display，選擇Annotate,2.輸入備注文本框,3.點(diǎn)擊激活的Cell添加該文本框,Chromatogram拷貝,1.到EditCopyCell拷貝當(dāng)前激活的Cell,2.Cell可以貼到其他的Office程序(MicrosoftWord,Powerpoint,Excel,etc.),第十一章,定量處理流程,定量數(shù)據(jù)處理QuantitativeProcessing,1.數(shù)據(jù)處理方法建立ProcessingSetup,輸入已知化合物用來識別設(shè)定峰檢測/積分參數(shù)選擇校準(zhǔn)/質(zhì)量控制類型，水平，重量選擇先前色譜峰處理,定量處理建立,XcaliburHomepage點(diǎn)擊ProcessingSetup按鈕開始設(shè)置定量處理方法,定量選項(xiàng),1.點(diǎn)擊Options,3.選擇LC,4.選擇CalibrationOptions,5.選擇實(shí)驗(yàn)是內(nèi)標(biāo)法還是外標(biāo)法,2.點(diǎn)擊ChromatographyBy,打開一個(gè)原始數(shù)據(jù)幫助建立定量處理方法,1.點(diǎn)擊File,2.點(diǎn)擊OpenRawFile,定量處理Identification,1.選擇并輸入組分名,2.選擇Detectortype和PeakDetectionalgorithm積分算法,3.選擇scanfilter和tracetype,4.點(diǎn)擊OK更新chromatogram,Chromatogram根據(jù)scanfilter和tracetype更新,定量處理Identification,1.輸入ExpectedRT(min),Window(sec)=組分洗脫允許的RT窗口范圍,如果有內(nèi)標(biāo)，你可以把內(nèi)標(biāo)作為RTReference,*注:如果你使用的內(nèi)標(biāo)法,ISTD必須首先設(shè)定，因?yàn)槠渌繕?biāo)組分要參考該內(nèi)標(biāo)。對于其他的組分,你可以選擇Adjustusing并選擇ISTD名稱.,2.點(diǎn)擊OK更新色譜圖,定量處理Detection,1.點(diǎn)擊Detection,2.改變積分參數(shù)得到滿意的積分效果,3.點(diǎn)擊OK更新色譜圖,定量處理-Calibration內(nèi)標(biāo)建立,1.點(diǎn)擊Calibration,2.選擇ISTD,3.輸入內(nèi)標(biāo)數(shù)量和單位，也可忽略不設(shè)此項(xiàng),定量處理-Calibration目標(biāo)物建立,1.選擇Targetcompound,如果使用ISTD,在此選擇內(nèi)標(biāo),2.選擇校正曲線的權(quán)重,3.對于校正曲線原點(diǎn)的處理,定量處理Levels,1.點(diǎn)擊Levels,2.輸入每個(gè)校正Level的名稱,3.輸入每個(gè)校正Level的具體量,4.輸入每個(gè)質(zhì)控QClevel的名稱name，amount和%Test,CopyingLevelstoAllTargetCompounds,Levels頁面只需輸入一個(gè)目標(biāo)組分的信息。右擊并選擇CopyLevelstoAllTargetComponents可以將Level的信息拷貝到其他組分,定量批處理,點(diǎn)擊SequenceSetup按鈕打開序列文件并在批處理前添加相關(guān)信息,打開序列并添加相關(guān)項(xiàng),2.添加Level,ProcMeth和SampleType到序列中,1.點(diǎn)擊Change并選擇ColumnArrangement,在序列中添加相關(guān)信息,AddLevel,ProcMethandSampleTypecolumnsintosequence,在序列中設(shè)定ProcMeth,SampleType和Level,批處理定量數(shù)據(jù),2.點(diǎn)擊Quan,激活PeakDetection&Integration以及Quantitation,1.點(diǎn)擊Actions并選擇BatchReprocess,3.點(diǎn)擊OK繼續(xù),在數(shù)據(jù)采集時(shí)添加定量處理選項(xiàng),2.選擇Quan,1.點(diǎn)擊Actions并選擇RunSequence,定量瀏覽器,在Xcalibur主界面點(diǎn)擊QuanBrowser按鈕查看定量處理數(shù)據(jù)結(jié)果,定量瀏覽器主界面,色譜圖,校正曲線,選擇查看結(jié)果的組分,可以顯示Standards,QCs,Blanks,Unknowns四種樣品類型,結(jié)果信息欄,更改結(jié)果顯示條目,1.右擊結(jié)果欄可以改變結(jié)果顯示條目,可以改變每欄的顯示次序,選擇需要顯示的條目,更改峰檢測/積分參數(shù),1.右擊色譜圖，可以改變峰檢測和積分參數(shù),3.將改變的參數(shù)應(yīng)用到某個(gè)Plot還是所有的Plot,4.IntegrationType變成UserIntegration,2.改變設(shè)置(最常用的是Identification和Integration),手動(dòng)更改積分,1.用鼠標(biāo)拖動(dòng)藍(lán)色正方形積分圖標(biāo),2.IntegrationType變?yōu)镸anualIntegration,返回原積分(MethodSettings),1.如果你想將積分參數(shù)恢復(fù)到方法設(shè)定的初始狀態(tài)，點(diǎn)擊MethodSettings,2.IntegrationType可以恢復(fù)到MethodSettings,更改校正參數(shù),1.右擊calibrationcurve，改變校正參數(shù),排除某個(gè)校正點(diǎn),在此處也可去除校正曲線上某個(gè)點(diǎn),去除校正曲線上某個(gè)點(diǎn),右擊校正曲線,Exclude一次去除一個(gè)校正點(diǎn)ExclusionList一次可以去除多個(gè)校正點(diǎn),顯示質(zhì)譜圖,右擊calibrationcurve選擇ShowSpectrumPlot，顯示質(zhì)譜圖,將數(shù)據(jù)輸出到Excel并打印,見下一頁,將結(jié)果輸出到Excel,打印報(bào)告,1.點(diǎn)擊Enable,2.選擇報(bào)告模板,3.選擇樣品文件,選擇樣品文件出報(bào)告,1.SampleChoice中選擇需要出報(bào)告的樣品文件(CTRL或SHIFT幫助選擇多個(gè)樣品),2.點(diǎn)擊Add將選擇的樣品文件添加到SelectedSamples,Save,Insert,Use,1.可以在提交序列的時(shí)候添加報(bào)告,2.樣品運(yùn)行完出報(bào)告,第十二章,儀器維護(hù),LTQ推薦維護(hù)程序,每日:檢查convectron和離子規(guī)壓力，確保真空系統(tǒng)正常；LTQ真空參數(shù)參考如下:Convectron壓力:1-1.5Torr離子規(guī)壓力:0.751.5x10-5Torr如果使用的是氮?dú)怃撈?，檢查氮?dú)鈮毫ΑTQ的推薦壓力介于80到120psi之間；檢查石英毛細(xì)管。確保石英毛細(xì)管沒有發(fā)生溶脹；如果需要可以切割毛細(xì)管噴霧的末端；檢查HPLC溶劑；確保排廢管路所接的廢液瓶沒有過多的廢液；分析結(jié)束后，將儀器設(shè)置為Stand-By狀態(tài)；,LTQ推薦維護(hù)程序,每周:檢查機(jī)械泵泵油；如果有必要，添加機(jī)械泵泵油；打開機(jī)械泵振氣閥，機(jī)械泵過濾器中油會自動(dòng)回流到泵中；更換HPLC溶劑，可以降低儀器本底噪音；清洗石英毛細(xì)管；,LTQ推薦的維護(hù)程序,每月:檢查氦氣壓力；LTQ氦氣鋼瓶的壓力最好置于30到50psi之間；檢查氮?dú)怃撈繅毫κ欠穹闲枰?；如果必要，更換石英毛細(xì)管；用MRFA溶液校正LTQ電子倍增器(每隔一到兩個(gè)月校正一次)；,LTQ推薦的維護(hù)程序,每季度:校正LTQ。校正后：-清洗或更換離子傳輸管；-清洗APIstack；更換機(jī)械泵油；清洗儀器背部黑色的風(fēng)扇過濾膜；備份數(shù)據(jù)；網(wǎng)上免費(fèi)軟件升級資源：-ThermoFisherScientificFastLCandLC/MSSupport,Notes:長期使用并運(yùn)行很臟的樣品需要經(jīng)常清洗離子傳輸管和APIStack；如果更換離子傳輸管靈敏度也不能恢復(fù),可以清洗APIStack；徹底清洗APIstack,用甲醇和異丙醇擦洗tubelens和skimmer；不要在酸性溶液中超聲tubelens和Skimmer！清洗完APIStack調(diào)諧儀器(可選)；,LTQ推薦的維護(hù)程序,維護(hù):APIStack清潔,首先將儀器設(shè)為StandBy狀態(tài)；關(guān)閉電子開關(guān)和總電源開關(guān)；取出APIstack；依次取出skimmer和tubelens；,APIStack從后面看(skimmer和tubelens已經(jīng)去除),SkimmerLensandTubeLens(FrontView),skimmerlens,tubelens,TubeLens(InAPIStack),TubeLens,Skimmer(在TubeLens之后放入APIStack),將APIstack放回儀器；打開主電源開關(guān),等待然后打開電子開關(guān)；,Skimmer,提供前級真空(ca.1torr),支持高真空泵。低維護(hù)需要故障多數(shù)是由于泵油引起的很多樣品溶解在泵油中會變成有害物,機(jī)械泵(前級泵),三抽口的分子渦輪泵（400L/s,300L/s,25L/s）提供工作真空(1mtorr到1ntorr)高速氣體渦輪以及轉(zhuǎn)子(轉(zhuǎn)動(dòng)葉片)和定子(固定的)旋轉(zhuǎn)促使分子通過刀片系統(tǒng)有永久性的密封泵不需要更換泵油,分子渦輪泵,分子渦輪泵,低真空檢測工作原理是惠斯頓電橋(Rg是電熱調(diào)節(jié)器)耐用低消耗Convectrongauge用寬動(dòng)態(tài)范圍的運(yùn)算放大器代替電阻器*Convectron是Granville-Phillips的注冊商標(biāo),PiraniorConvectronGauge,IonGauge,高真空檢測昂貴的Outgasing用來驅(qū)散污染物離子在燈絲處形成，被引向收集器(collector)離子撞擊柵格（grid產(chǎn))生電流,附錄1氣體和溶劑,氮?dú)?Highpurity(99%)氮?dú)鈿怏w壓力：690140kPa(10020psi),0.40.6MPa氦氣:Ultra-highpurity(99.995%)，超高純氦氣(99.995%)氣體壓力：13570kPa(2010psi),0.15Mpa,附錄2儀器狀態(tài)指示器,在質(zhì)譜儀前面板上的右上角裝置有6個(gè)指示燈,Power,Vacuum,Communication,System,Scan,綠色：供給真空系統(tǒng)和電子組件的電壓,燈黃色：渦輪分子泵轉(zhuǎn)速在75