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課程名稱:醫(yī)學(xué)微生物學(xué),教學(xué)內(nèi)容:細(xì)菌感染的檢查方法及防治原則,學(xué)時(shí):學(xué)時(shí),教學(xué)目的:掌握臨床細(xì)菌標(biāo)本的采集、送檢原則,革蘭染色法的步驟熟悉病原菌的檢驗(yàn)程序、常用血清學(xué)試驗(yàn)的原理了解細(xì)菌學(xué)檢查在臨床診斷中的重要性,教學(xué)方法:理論,教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)、關(guān)鍵:病原菌的檢驗(yàn)程序,細(xì)菌學(xué)診斷(bacteriologicaldiagnosis),示蹤性檢測(cè)形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)鑒定,致病力和藥敏測(cè)定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)毒力檢測(cè)藥物敏感試驗(yàn),病原微生物感染的檢查法,臨床細(xì)菌標(biāo)本的采集、送檢原則,1.無(wú)菌操作:避免人為污染,2.選準(zhǔn)部位:根據(jù)疾病種類和病程不同,采集不同標(biāo)本(specimens),如:傷寒第一周取血第二、三周取大、小便、骨髓,3.早期取材(1)疾病早期(2)使用抗菌藥物之前,如已用抗生素,應(yīng)停用12天(3)機(jī)體免疫因素形成之前(4)未出現(xiàn)合并或繼發(fā)感染之前,4.快速送檢:大多數(shù)細(xì)菌低溫送檢,但奈瑟球菌須30-40保溫送檢,標(biāo)本采集的準(zhǔn)確性是檢查結(jié)果可靠性的保證,1、直接涂片鏡檢,形態(tài)與染色性具有特征的病原菌可直接染色鏡檢,根據(jù)典型形態(tài)、排列、染色性做初步診斷,(一)、病原菌分離鑒定的一般程序:,一、形態(tài)學(xué)檢查,(1)不染色標(biāo)本的檢查主要用于觀察病原菌的某些形態(tài)特點(diǎn)及運(yùn)動(dòng)性常用的方法有壓滴法和懸滴法如:用壓滴法觀察霍亂弧菌的“魚(yú)群樣運(yùn)動(dòng)”,暗視野檢查用于檢查活菌、螺旋體及其動(dòng)力,(2)染色標(biāo)本的檢查,染色,單染,復(fù)染,正染,負(fù)染(negativestaining),革蘭染色法,抗酸染色法,熒光染色,單染色:只用一種染料進(jìn)行染色.,可分為:正染:標(biāo)本著色,背景不著色負(fù)染:標(biāo)本不著色,背景著色,用于形態(tài)的觀察,不能鑒別染色性,復(fù)染色:用兩種或兩種以上的染料進(jìn)行染色,目前常用的有:革蘭染色法、抗酸染色法、熒光染色、特殊染色法,既可觀察形態(tài)結(jié)構(gòu),又可鑒別染色性,革蘭染色法步驟:,制片:涂片,染色:,結(jié)晶紫初染1分鐘,水沖洗,碘液媒染1分鐘,水沖洗,95%乙醇脫色30秒左右,水沖洗,稀釋復(fù)紅復(fù)染30秒,水沖洗,干后油鏡下觀察,干燥,固定,涂片,干燥,固定,染色,鏡檢,結(jié)果:染成紫色稱革蘭染色陽(yáng)性G+染成紅色稱革蘭染色陰性G-,原理:(1)等電點(diǎn)學(xué)說(shuō)結(jié)晶紫為堿性染料,(2)化學(xué)學(xué)說(shuō)G+含有核糖核酸鎂鹽,能與結(jié)晶紫形成牢固的復(fù)合物,(3)通透性學(xué)說(shuō),G+G-,PI2346,核糖核酸鎂鹽+-,通透性小大,脂質(zhì)少多,意義:(1)鑒別細(xì)菌(2)指導(dǎo)臨床用藥(3)了解細(xì)菌的致病性,二、分離培養(yǎng)純培養(yǎng):,根據(jù)不同標(biāo)本采取不同培養(yǎng)基。,分離化膿性球菌如鏈球菌、肺炎球菌可采用血平板;分離腦膜炎球菌可采用巧克力平板,菌落形態(tài)觀察:大小、表面、透明度、邊緣、高度、色素、溶血等,三、生化反應(yīng):,通過(guò)檢測(cè)細(xì)菌代謝產(chǎn)物的生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌的種類,乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)等。,四、血清學(xué)鑒定:(serologicalidentification):,用已知抗體檢測(cè)標(biāo)本中分離得到的病原菌的血清型別,采用玻片凝集法。,原理:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上,紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后不斷向紙片周?chē)鷶U(kuò)散形成遞減的梯度濃度,在紙片周?chē)志鷿舛确秶鷥?nèi)測(cè)試菌的生長(zhǎng)被抑制,從而形成無(wú)菌生長(zhǎng)的透明圈即為抑菌圈。抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度,并與該藥對(duì)測(cè)試菌的MIC呈負(fù)相關(guān)。,紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer法),五、藥敏試驗(yàn):,紙片擴(kuò)散法,原理:聚乙烯板內(nèi)含有各種稀釋度的抗菌藥物,實(shí)驗(yàn)時(shí)加入100l濃度為105CFU/ml的菌液,蓋上蓋板,351620h觀察結(jié)果??椎撞壳逦怀霈F(xiàn)細(xì)菌沉淀的最低抗菌藥物濃度即為該抗菌藥物對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度,通過(guò)CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷其敏感和耐藥。再取0.01ml容量接種環(huán)取肉眼觀察無(wú)菌生長(zhǎng)的液體接種于血瓊脂平板作次代培養(yǎng),經(jīng)35過(guò)夜培養(yǎng)后觀察最低抗菌藥物濃度能殺死99.9原始種入的細(xì)菌即為該菌的最低殺菌濃度(MBC)。,微量液體稀釋法(microdilutiontest),用微量加樣器接種100l到96孔中,蓋上蓋板。同時(shí)作陽(yáng)性、陰性對(duì)照。,手工看濁度或儀器自動(dòng)判讀。按照CLSI標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告細(xì)菌對(duì)某抗菌藥物為敏感、耐藥和中介。,原理:E試條是一條5mm50mm無(wú)孔試劑載體,一面固定有一系列預(yù)先制備的濃度呈連續(xù)指數(shù)增長(zhǎng)稀釋抗菌藥物,另一面有讀數(shù)和判別的刻度。抗菌藥物的梯度可覆蓋有20個(gè)MIC對(duì)倍稀釋濃度的寬度范圍。將E試條放在細(xì)菌接種過(guò)的瓊脂平板上,經(jīng)孵育過(guò)夜,圍繞試條明顯可見(jiàn)橢圓形抑菌圈,圈的邊緣與試條交點(diǎn)的刻度濃度即為抗菌藥物抑制細(xì)菌的最小抑菌濃度,對(duì)照CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷其敏感、耐藥、中介。,E-TEST,孵育后形成一橢圓形抑菌圈,抑菌圈和試條的相交處的刻度即為抗菌藥物對(duì)該菌的最低抑菌濃度(MIC)。,六、細(xì)菌成分的檢測(cè)(detectionofbacterialantigens):,目前應(yīng)用最為廣泛的是細(xì)菌抗原的檢測(cè),如:協(xié)同凝集試驗(yàn)、間接凝集試驗(yàn)、熒光抗體法、酶免疫法、核酸雜交、聚合酶鏈反應(yīng)等,七、檢測(cè)細(xì)菌相應(yīng)抗體,均為免疫學(xué)方法,經(jīng)典方法如:凝集試驗(yàn)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),現(xiàn)代快速方法主要是免疫標(biāo)記技術(shù),通常采用取雙份血清,其間間隔12周。后一份血清抗體效價(jià)比前一份升高4倍以上有診斷意義。,細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)診斷,病原微生物感染的防治原則,微生物感染所導(dǎo)致的感染性疾病的控制由預(yù)防和治療兩方面組成,預(yù)防:對(duì)病原微生物傳播的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行控制,治療:是通過(guò)抗微生物藥物和新醫(yī)療技術(shù)來(lái)控制傳染病的擴(kuò)散和發(fā)展,病原微生物感染的防治原則,特異性免疫的分類,自然免疫,人工免疫,自然主動(dòng)免疫:隱性或顯性感染,自然被動(dòng)免疫:通過(guò)胎盤(pán)或初乳獲得母體抗體,人工主動(dòng)免疫:接種疫苗或類毒素等,人工被動(dòng)免疫:注射抗毒素或丙種球蛋白等,第6章細(xì)菌耐藥性,第一節(jié)抗菌藥物的種類及其作用機(jī)制一、抗菌藥物概念1.抗菌藥物(antibacterialagents)指對(duì)病原菌具有抑制或殺滅作用、用于預(yù)防和治療細(xì)菌性感染的藥物,包括抗生素(antibiotics)和化學(xué)合成的藥物。,2.抗生素(antibioticagents):微生物在其代謝過(guò)程中產(chǎn)生的能殺滅或抑制其它特異病原微生物的產(chǎn)物。抗生素分子量小,低濃度就能發(fā)揮其生物活性,有天然和人工半合成兩類。,二、抗菌藥物的種類(一)按抗菌藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分類:1.-內(nèi)酰胺類(-lactam),青霉素(penicillin)類:青霉素G、甲氧西林等。頭孢菌素(cephalosporin)類:頭孢唑啉等。頭霉素:如頭孢西丁。單環(huán)-內(nèi)酰胺類:如氨曲南。碳青霉素烯類:亞胺培南與西司他丁合用稱泰能。-內(nèi)酰胺酶抑制劑:如舒巴坦棒酸使酶失活。,2.大環(huán)內(nèi)酯類(macrolides)紅霉素、螺旋霉素等。3.氨基糖苷類(aminoglycosides)鏈霉素、慶大霉素4.四環(huán)素類(tetracycline)四環(huán)素、強(qiáng)力霉素等。5.氯霉素類(chloramphenic)包括氯霉素、甲砜霉素。,6.化學(xué)合成的抗菌藥物磺胺類:磺胺嘧啶(SD)、復(fù)方新諾明(SMZco)等。喹諾酮(fluroqinolone)類:包括氟哌酸、環(huán)丙沙星等。7.其他抗結(jié)核藥物:利福平、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺等。多肽類抗生素:多粘菌素類、萬(wàn)古霉素、桿菌肽、林可霉素和克林霉素等。,(二)按生物來(lái)源分類1.細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素如多粘菌素和桿菌肽。2.真菌產(chǎn)生的抗生素如青霉素及頭孢菌素,現(xiàn)在多用其半合成產(chǎn)物。3.放線菌產(chǎn)生的抗生素放線菌是生產(chǎn)抗生素的主要來(lái)源。其中鏈霉菌和小單孢菌產(chǎn)生的抗生素最多。常見(jiàn)的抗生素包括鏈霉素、卡那霉素、四環(huán)素、紅霉素、兩性霉素B等。,根據(jù)對(duì)病原菌的作用靶位,將抗生素的作用機(jī)制分為四類(表6-1)。1.抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成2.影響胞漿膜通透性(多粘菌素)3.抑制蛋白質(zhì)合成(大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖甙類)4.抑制核酸代謝:葉酸代謝;核酸合成(喹諾酮、磺胺類),三、抗菌藥物的作用機(jī)制,表6-1抗菌藥物的主要作用部位,一、細(xì)菌的耐藥性,(一)細(xì)菌耐藥性(drugresistance)亦稱抗藥性,是指細(xì)菌對(duì)某抗菌藥物(抗生素或消毒劑)的相對(duì)抵抗性。指病原體或腫瘤細(xì)胞對(duì)反復(fù)應(yīng)用的化學(xué)治療藥物敏感性降低或消失的現(xiàn)象。(二)耐藥性的程度用某藥物對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度(MIC)表示。臨床上有效藥物治療劑量在血清中濃度大于最小抑菌濃度稱為敏感,反之稱為耐藥。,(三)耐藥性產(chǎn)生的機(jī)制,1.產(chǎn)生水解酶和鈍化酶,2.改變細(xì)胞膜的通透性,3.改變藥物作用位點(diǎn),4.主動(dòng)外排泵的作用,5.生物膜形成,(四)控制耐藥性的策略,1.合理用藥,2.嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度,3.研制新的抗菌藥物,4.破壞耐藥基因,藥敏實(shí)驗(yàn)等指導(dǎo),(四)控制耐藥性的策略,1.合理使用抗菌藥物制定抗生素用藥常規(guī),教育醫(yī)務(wù)工作者和病人規(guī)范化用藥,供臨床選用抗菌藥物參考。嚴(yán)格根據(jù)適應(yīng)證選用藥物,病人用藥前應(yīng)盡可能進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè),并進(jìn)行藥敏試驗(yàn),作為調(diào)整用藥的參考。按藥物的藥動(dòng)學(xué)特性,制定合理的用藥方案。用藥療程應(yīng)盡量縮短,一種抗菌藥物可以控制的感染則不任意采用多種藥物聯(lián)合。嚴(yán)格掌握抗菌藥物的局部應(yīng)用、預(yù)防應(yīng)用和聯(lián)合用藥,避免濫用。,2.嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度,3.加強(qiáng)藥政管理,4.研發(fā)新抗菌藥物,5.破壞耐藥基因,傳染病控制三大原則:,1.查明和控制傳染源,2.切斷傳播途徑,3.提高健康人群的免疫力,消毒與滅菌是控制傳染源的重要手段,消毒與滅菌,消毒(disinfection):,殺死物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死含芽孢的細(xì)菌或非病原微生物。,滅菌(sterilization):,殺死物體上所有微生物的方法。,包括致病菌、非致病菌、繁殖體和芽胞。,抑菌:,抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)。,防腐:,防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法,無(wú)菌(asepsis):,沒(méi)有活菌的意思。無(wú)菌狀態(tài)是滅菌的結(jié)果。,無(wú)菌操作(antiseptictechnique):,防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。,物理消毒滅菌法,一、熱力滅菌法,熱力滅菌法有干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類,在同一溫度下,后者比前者的效力大。這是因?yàn)椋?*濕熱中菌體蛋白較易凝固。,*濕熱的穿透力比干熱大。,*濕熱的蒸汽有潛熱存在。,為什么濕熱滅菌比干熱滅菌效力大,干熱滅菌:,干熱的殺菌作用是通過(guò)脫水干燥和大分子變性。,1.焚燒法:直接點(diǎn)燃或在焚燒爐內(nèi)焚燒。是一種徹底的滅菌方法。,適用于廢棄物品或動(dòng)物尸體。,2.燒灼法:直接用火焰滅菌。,適用于接種環(huán),試管口等的滅菌。,3.干烤法:將物品置干烤箱內(nèi),加熱至1601700C2h。,適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品。,4.紅外線:利用電磁波的熱效應(yīng)滅菌。110m波長(zhǎng)的熱效應(yīng)最強(qiáng)。,適用于醫(yī)療器械的滅菌。,濕熱滅菌:,利用熱蒸汽的高溫使微生物的蛋白質(zhì)變性。,1.巴氏消毒法:,用較低溫度61.162.80c,30min;71.70c,1530s殺滅液體中的病原微生物或特定的微生物,而仍保持物品中所需的不耐熱成分不被破壞的消毒方法。,用于牛乳制品、酒類等的消毒,2.煮沸法:,1000c,水浴,30min。食具、一般外科器械消毒。殺死芽胞需13小時(shí)。,3.流動(dòng)蒸氣消毒法:,1000c,汽浴,30min,可殺死細(xì)菌繁殖體,但不能殺死芽胞。,4.間歇蒸汽滅菌法:,1000c,汽浴,30min/次,流通蒸汽消毒法重復(fù)三次,每次間歇期置37溫箱過(guò)夜,促使芽胞發(fā)芽變?yōu)榉敝丑w,被下一次蒸汽滅菌時(shí)殺滅。主要用于營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的滅菌,可殺死芽胞。,5.高壓蒸汽滅菌法:,121.30c汽?。?03.4kPa),1520min,可殺滅包括細(xì)菌芽孢在內(nèi)的所有微生物,用于培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕物品的滅菌。,滅菌效果最好、應(yīng)用最廣泛的滅菌方法。,二、輻射殺菌法,(一)紫外線(ultravioletray,UV)殺菌,波長(zhǎng)200300nm的紫外線有殺菌作用,其中以260266nm最強(qiáng)。,*殺菌機(jī)制:干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。,*殺菌作用特點(diǎn):殺菌作用強(qiáng),穿透力弱。,*適用范圍:,手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室的空氣消毒,或不耐熱物品的表面消毒。,(二)電離輻射:高速電子、射線、r射線等。,應(yīng)用范圍:一次性醫(yī)用塑料制品;食品。,三、過(guò)濾除菌法(filtration),用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到無(wú)菌的目的。血清、抗生素、抗毒素等除菌。,四、干燥與低溫抑菌法保存菌種:冷凍真空干燥法lyophilization,五、超聲波殺菌法,第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法,一、化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制,二、消毒劑的主要種類,醇類-乙醇(7075%),碘酒2%2.5%、新潔爾滅0.05%0.1%,第三節(jié)影響消毒滅菌效果的因素,一、消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間,二、微生物的種類與數(shù)量,三、溫度,四、酸堿度,五、有機(jī)物,病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全,生物安全(biosafety)是生物技術(shù)安全(safetyofbiotechnology)的簡(jiǎn)稱。狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開(kāi)發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。,一、病原微生物的分類,根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度,病原微生物分為四類:第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。,第三類是指能夠引起人或動(dòng)物疾病,但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病,并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。,二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi),只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度。,生物安全,三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任,實(shí)驗(yàn)室感染控制工作包括定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌(毒)種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實(shí)施情況。,實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí),預(yù)防、控制措施包括:封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場(chǎng)所;開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查;對(duì)病人進(jìn)行隔離治療,對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查;對(duì)密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察;進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)消毒;對(duì)染疫或者疑似染疫的動(dòng)物采取隔離、撲殺等措施。,第十六章螺旋體,要求掌握:1、掌握鉤端螺旋體的致病性及防治原則;2、熟悉梅毒螺旋體的致病性,檢驗(yàn)方法及防治原則;3、了解螺旋體的概念,對(duì)人類有致病性的螺旋體屬。,一、概念螺旋體(spirochete)是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、呈螺旋形彎曲,運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物。,二、種屬:,一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及染色細(xì)長(zhǎng),螺旋密而規(guī)則一端或兩端彎曲呈鉤狀,呈C、S形外膜與肽聚糖層之間有兩根軸絲(與運(yùn)動(dòng)有關(guān))革蘭陰性,著色難,常用于Fontana鍍銀染色(棕褐色),第一節(jié)鉤端螺旋體(鉤體),黃疸出血熱群鉤端螺旋體,2、培養(yǎng)特性鉤體是目前唯一能人工培養(yǎng)的螺旋體常用Korthof(柯索夫)培養(yǎng)基生長(zhǎng)最適溫度為2830,2周后出現(xiàn)云霧狀動(dòng)物培養(yǎng)(小鼠),3、抵抗力對(duì)熱敏感,56,10分鐘即死亡對(duì)消毒劑敏感對(duì)青霉素、金霉素敏感,治療首選,二、致病性1、致病物質(zhì)溶血毒素細(xì)胞毒性因子CTF內(nèi)毒素樣物質(zhì)(脂多糖樣物質(zhì))細(xì)胞致病作用(CPE)物質(zhì)其他酶類(脂酶,脫氫酶),2、所致疾病鉤端螺旋體病(鉤體?。┧追Q打谷黃,屬自然疫源性疾病。傳染源:鼠、豬(我國(guó)是幼豬)傳播途徑:經(jīng)健康或破損皮膚粘膜,3、致病機(jī)制:,鉤體,經(jīng)皮膚粘膜進(jìn)入人體,在局部迅速繁殖,引起鉤體血癥、敗血癥,向全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞擴(kuò)散,至肝、腎、心肺、腦、肌肉損害,4、表現(xiàn):,起病急、高熱、乏力、頭痛、全身酸痛、眼結(jié)膜充血、腓腸肌觸痛、淺表淋巴結(jié)腫大,嚴(yán)重者、有出血、黃疸、休克、DIC、伴心、腎功能不全。寒熱酸痛一身乏眼紅腿痛淋巴大,5、臨床類型:,黃疸出血型-最常見(jiàn)流感傷寒型肺出血型-最嚴(yán)重腦膜腦炎型腎功能衰竭型,三、微生物學(xué)檢查1、病原體檢查直接鏡檢:暗視野觀察活體、鍍銀染色片分離培養(yǎng):標(biāo)本接種于Korthof培養(yǎng)基動(dòng)物接種:核酸檢測(cè):PCR、DNA探針,2、血清學(xué)診斷顯微凝集試驗(yàn)(凝集溶解):已知鉤體+血清小蜘蛛樣凝集血清中補(bǔ)體含量高凝集稍后溶解1:400,4倍補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):1:20,四、防治原則(一)控制傳染源(1)滅鼠(2)加強(qiáng)家畜管理保護(hù)水源(二)接種疫苗(三)治療青霉素首選,第二節(jié)密螺旋體屬,一、生物學(xué)特性1、形態(tài)結(jié)構(gòu)(同前、略)2、培養(yǎng)特性:不能進(jìn)行人工培養(yǎng)3、抵抗力:極弱,對(duì)溫度、干燥、化學(xué)消毒劑、抗生素等均敏感,與人類疾病密切相關(guān)的代表株是引起梅毒的蒼白螺旋體蒼白亞種。,二、致病性1、梅毒螺旋體在自然情況下只感染人,人是梅毒螺旋體的唯一宿主,也是梅毒的唯一傳染源。2、梅毒按傳播途徑分先天梅毒(胎傳梅毒)和后天梅毒(獲得性梅毒)。3、獲得性梅毒,經(jīng)性接觸傳播,以反復(fù)隱伏和再發(fā)為特征,臨床分為三期。,期梅毒(初期)又稱初瘡破壞性小,感染性極強(qiáng)感染后3周左右,局部出現(xiàn),無(wú)痛性硬結(jié)稱“硬下疳”多見(jiàn)于外生殖器48周后,不治自愈,期梅毒硬下疳自愈后,經(jīng)過(guò)23個(gè)月無(wú)癥狀潛伏期后進(jìn)入期破壞性小,感染性強(qiáng)出現(xiàn)蒼白亞種螺旋體血癥全身皮膚粘膜梅毒疹全身淋巴結(jié)腫大,并向骨、關(guān)節(jié)、眼和其他臟器擴(kuò)散,期梅毒發(fā)性于感染后2年左右,也有長(zhǎng)達(dá)1015年之久感染性小,破壞性大病變播及全身組織器官(皮膚、肝、脾、骨骼)慢性肉芽腫,損害進(jìn)展和消退常交替出現(xiàn)嚴(yán)重者危及生命,4、先天梅毒(胎傳梅毒)多發(fā)于在妊娠4個(gè)月之后引起胎兒全身感染導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎出生梅毒嬰兒,可表現(xiàn)為馬鞍鼻、鋸齒形牙,間質(zhì)性角膜炎、先天性耳聾等。,三、微生物學(xué)檢查(一)標(biāo)本期梅毒硬下疳滲出物期梅毒梅毒疹滲出物,淋巴結(jié)抽取液(二)方法、顯微鏡檢查,2、血清學(xué)診斷非特異性血清學(xué)試驗(yàn)抗原為(正常牛心肌的心脂質(zhì))血清中的反應(yīng)素為抗脂質(zhì)抗體。方法有VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn))VeneralDiseaseResearchLaboratoryRPR(快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn))RapidPlasmaReagin適用于大量篩選,特異性血清學(xué)試驗(yàn)抗原為(Nichols株螺旋體)抗體為螺旋體特異性抗體方法有FTA-ABS試驗(yàn)(熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn))優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),可用于梅毒螺旋體證實(shí)試驗(yàn),第十七章支原體,要求掌握:1、掌握支原體的概念、形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及培養(yǎng)特性;2、掌握主要病原性支原體的傳播途徑及所致疾?。?、熟悉支原體與L型細(xì)菌的區(qū)別。,第一節(jié)支原體的概念及種類,一、概念:,支原體(Mycoplasma)是一類無(wú)細(xì)胞壁、形態(tài)上呈多形性、可通過(guò)除菌濾器、能在無(wú)生命的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小的原核細(xì)胞型微生物。,支原體屬于柔膜體綱中的支原體目,下分三個(gè)科:支原體科Mycoplasmataceae螺原體科Spiroplasmataceae無(wú)膽甾原體科Acholeplasmataceae,支原體科,支原體屬64個(gè)種,脲原體屬2個(gè)種,對(duì)人類主要致病性支原體包括:支原體致病性肺炎支原體Mpneumoniae肺炎、支氣管炎人型支原體Mhominis泌尿生殖道感染生殖支原體Mgenitalium泌尿生殖道感染穿透支原體Mpenetraus多繼發(fā)于艾滋病溶脲脲原體Uurealyticum泌尿生殖道感染,二、生物學(xué)性狀(一)形態(tài)結(jié)構(gòu)體積:最小0.20.3m,能通過(guò)除菌濾器形態(tài):球形、絲狀等,肺炎支原體,結(jié)構(gòu):細(xì)胞膜由三層含蛋白質(zhì)和脂質(zhì)成分構(gòu)成,內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì),中層為脂質(zhì)(含固醇)細(xì)胞膜外有莢膜(致病因素),還有特殊的頂端結(jié)構(gòu)(具有粘附細(xì)胞),微絲網(wǎng)(與運(yùn)動(dòng)有關(guān))沒(méi)有細(xì)胞壁,染色性:革蘭染色陰性,Giemsa染色呈淡紫色。,(二)培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高(人和動(dòng)物血漿)生長(zhǎng)緩慢,數(shù)日至數(shù)周后出現(xiàn)菌落油煎荷包蛋樣菌落、“T”株,(三)生化反應(yīng),(四)抵抗力,對(duì)理化因素的抵抗力較細(xì)菌弱,對(duì)抑制細(xì)胞壁合成的抗生素耐受,對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素敏感,(五)支原體與L型細(xì)菌的區(qū)別,第二節(jié)主要致病性支原體,一、肺炎支原體-所致疾病支原體肺炎,傳播途徑-經(jīng)飛沫傳播,發(fā)病年齡-兒童及青少年多見(jiàn),潛伏期-23W,臨床表現(xiàn)-發(fā)熱(約39)、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。一般經(jīng)310d主要癥狀消失,但咳嗽可以持續(xù)1個(gè)月之久。,二、脲原體屬,解脲脲原體(U.urealyticum)亦稱溶脲脲原體,非淋菌性尿道炎(nongonococcalurethritisNGU),現(xiàn)已被列為性傳播疾病的病原體。,第十八章立克次體,重點(diǎn)要求:1、掌握立克次體的概念,主要種類及致病特點(diǎn)2、熟悉立克次體的共同特點(diǎn),一、概念立克次體(Rickettsia)是一類嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生,以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介的原核細(xì)胞型微生物。,第十八章立克次體,二、特點(diǎn)1、大小介于細(xì)菌與病毒之間,多形態(tài),革蘭陰性;2、含RNA和DNA兩種核酸;3、缺乏酶系統(tǒng),嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生;4、以二分裂方式繁殖;5、以節(jié)肢動(dòng)物為媒介;6、多為自然疫源性疾??;7、對(duì)多種抗生素敏感。,普氏立克次體(R.prowazekii),傳染源:病人傳播媒介:體虱人虱,人虱,人虱,人,人,流行性斑疹傷寒傳播方式,恙蟲(chóng)病立克次體(R.tsutsugamushi),恙蟲(chóng)病的傳播方式,傳播媒介,儲(chǔ)存宿主:恙螨,莫氏立克次體(R.typhi),地方性斑疹傷寒(鼠型斑疹傷寒)傳播方式,種類傳染源媒介昆蟲(chóng)主要臨床表現(xiàn)免疫力普氏立克次體人人體虱發(fā)熱、頭痛、皮疹持久(流行性斑疹傷寒)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)損傷莫氏立克氏體鼠等鼠蚤發(fā)熱、頭痛、皮疹持久(地方性斑疹傷寒)恙蟲(chóng)病立克次體鼠等恙螨局部黑色焦痂持久(恙蟲(chóng)熱)發(fā)熱、頭痛、皮疹內(nèi)臟損害,主要病原性立克次體,外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction),外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction),部分立克次體的脂多糖與變形菌OX19、OX2、Oxk等的菌體抗原有共同成分。由于變形菌抗原易于制備,其凝集反應(yīng)結(jié)果又便于觀察,因此常用這類變形菌抗原代替立克次體抗原進(jìn)行非特異性凝集反應(yīng)。用于檢測(cè)血清中有無(wú)相應(yīng)抗體,供立克次體病的輔助診斷。此試驗(yàn)稱為外斐試驗(yàn),第十九章衣原體,要求掌握:1、衣原體的概念2、沙眼衣原體亞種和所致疾病3、衣原體的獨(dú)特繁殖周期,一、概念衣原體(Chlamydia)是一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生,具有獨(dú)特發(fā)育周期,能通過(guò)細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物。,衣原體屬分為四個(gè)種沙眼衣原體肺炎衣原體鸚鵡熱衣原體獸類衣原體,對(duì)多種抗生素敏感,衣原體的共

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