臨床血液學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)PPT課件.ppt

臨床血液學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ),黃河三門(mén)峽醫(yī)院,1,一、血涂片的制備與染色二、紅細(xì)胞及其形態(tài)學(xué)檢查三、白細(xì)胞及其形態(tài)學(xué)檢查,內(nèi)容,2,一、血涂片的制備與染色,外周血涂片檢查是最有益的血液系統(tǒng)疾病檢查手段，能為臨床提供大量的信息，如能鑒別白血病，感染和其它疾病。因此，血透片的質(zhì)量至關(guān)重要。一：載玻片要求：干凈，整齊；新玻片一般用鉻酸清洗液或10%鹽酸浸泡24小時(shí)，再?gòu)氐浊逑础Ｅf玻片可用肥皂水或合成洗滌劑清洗。目的：保持玻片接近中性二：手工推片：先后移，后前推（30-45度），勻速，平穩(wěn)；血滴大，角度大，速度快，血膜厚，反之，則血膜薄。,3,瑞氏染色（Wright染色）,瑞氏染料由酸性染料伊紅（E-）和堿性染料亞甲藍(lán)（M+）組成。甲醇的作用：一是溶解美藍(lán)和伊紅；二是固定細(xì)胞形態(tài)。原理：既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)各種染料的親和力也不一樣。,4,紅細(xì)胞及其形態(tài)學(xué)檢查,紅細(xì)胞：起源于骨髓造血干細(xì)胞，在紅細(xì)胞生成素的作用下，經(jīng)紅系祖細(xì)胞階段，分化為原紅細(xì)胞，再經(jīng)數(shù)次分裂發(fā)育為早幼、中幼、晚幼直至成熟紅細(xì)胞。生理功能：紅細(xì)胞通過(guò)血紅蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)交換和攜氣的功能。臨床相關(guān)檢查：血常規(guī)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉、紅細(xì)胞形態(tài)分析,5,紅細(xì)胞計(jì)數(shù),通過(guò)血常規(guī)分析儀來(lái)檢測(cè)紅細(xì)胞參數(shù)和形態(tài)變化，從而對(duì)某些疾病進(jìn)行診斷和鑒別診斷。血紅蛋白測(cè)定：氰化高鐵血紅蛋白（HiCN)測(cè)定法是WHO和ICSH推薦的參考方法。缺點(diǎn)：KSN有劇毒，污染環(huán)境，可使高白細(xì)胞、，高球蛋白血癥的標(biāo)本渾濁，以及不能測(cè)定SHb。血細(xì)胞分析儀：比色法紅細(xì)胞數(shù)目計(jì)數(shù)：分析儀通過(guò)直接測(cè)量紅細(xì)胞對(duì)應(yīng)的電脈沖個(gè)數(shù)獲取紅細(xì)胞數(shù)目（RBC),單位為1012/LRBC=n*1012/L,6,紅細(xì)胞計(jì)數(shù),平均紅細(xì)胞體積（MCV):根據(jù)紅細(xì)胞分別的直方圖，計(jì)算紅細(xì)胞平均體積，單位為fL。紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC)計(jì)算公式：HCT=RBC*MCVMCH=HGB/RBCMCHC=HGB/HCT,7,紅細(xì)胞形態(tài),正常紅細(xì)胞形態(tài),1.形態(tài)：正常紅細(xì)胞直徑69m，平均7.5m；圓形或輕微的卵圓形，中心約1/3區(qū)域?yàn)闇\染的灰白區(qū),2.正細(xì)胞正色素性貧血,8,紅細(xì)胞形態(tài)異常意義：貧血輔助診斷為其他疾病診斷提供依據(jù)(如:MM、DIC、骨髓纖維化)某些病原檢查,9,紅細(xì)胞形態(tài)主要價(jià)值在于對(duì)貧血疾病的診斷、鑒別診斷及療效監(jiān)測(cè),貧血既是臨床癥狀，也是一大類(lèi)疾病。貧血的診斷：1）臨床癥狀及體征的鑒別作用；2）實(shí)驗(yàn)室檢查的重要性：鐵代謝、葉酸及B12測(cè)定、溶血試驗(yàn)、血紅蛋白性質(zhì)檢查、免疫學(xué)及分子生物學(xué)檢查等。3）形態(tài)學(xué)診斷：包括血液涂片、骨髓檢查在貧血的分類(lèi)、診斷中具有重要提示作用，有的病例有確診意義。,10,貧血形態(tài)學(xué)分類(lèi),11,貧血的MCV、MCH和MCHC分類(lèi),12,紅細(xì)胞在血膜上的不規(guī)則分布,凝集反應(yīng)：抗紅細(xì)胞抗體的冷凝集反應(yīng)，顯示MCV假性增高、RBC計(jì)數(shù)假性減少，MCH及MCHC假性增高,13,紅細(xì)胞堆積現(xiàn)象,14,紅細(xì)胞在血膜上的不規(guī)則分布,緡錢(qián)狀形成：,15,紅細(xì)胞大小和(或)著色異常,紅細(xì)胞大小不均：是指紅細(xì)胞大小差異程度增大，分析儀參數(shù)表現(xiàn)為RDW增加；紅細(xì)胞雙形性：兩種不同紅細(xì)胞群體存在，在分析儀的紅細(xì)胞直方圖中清晰可見(jiàn),16,低色素性：紅細(xì)胞著色變淺伴有中心淡染區(qū)擴(kuò)大，超過(guò)紅細(xì)胞直徑三分之一，建議MCH被用于衡量低色素；嗜多色性：未完全成熟紅細(xì)胞由于殘存核糖體核酸RNA而呈現(xiàn)出粉灰藍(lán)色，應(yīng)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)大紅細(xì)胞：直徑大于8.5um（MCV100fL），大紅細(xì)胞呈圓形或卵圓形，具有診斷意義。早產(chǎn)兒、嬰兒及新生兒的紅細(xì)胞較，網(wǎng)織紅細(xì)胞過(guò)多也會(huì)導(dǎo)致MCV增高；小紅細(xì)胞：指直徑小于7um的小紅細(xì)胞（MCV80fL），常伴有Hb的減低,17,小細(xì)胞低色素性貧血,18,嗜多色性紅細(xì)胞,（1）形態(tài)學(xué)（2）臨床意義,19,紅細(xì)胞異常形態(tài),棘紅細(xì)胞：,一例脂蛋白貧血典型的高色素細(xì)胞，伴有不等長(zhǎng)度、厚度和形狀的突起,20,紅細(xì)胞異常形態(tài),咬紅細(xì)胞：,RBC外周有一個(gè)或多個(gè)弧形缺損（咬形），是脾臟切除海因小體而成。咬細(xì)胞是氧化溶血的特征改變。微血管病性溶血性貧血和紅細(xì)胞機(jī)械損傷可能產(chǎn)生，是由外周假空泡破裂及紅細(xì)胞膜繼發(fā)融合而成。,21,紅細(xì)胞異常形態(tài),水泡細(xì)胞：,紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白收縮至細(xì)胞的一半，形成致密物質(zhì)，細(xì)胞剩余部分成為一個(gè)空膜,G6PD缺乏（藥物溶血）-常見(jiàn)水泡細(xì)胞，伴細(xì)胞破壞,22,紅細(xì)胞異常形態(tài),不規(guī)則收縮細(xì)胞,紅細(xì)胞失去了圓盤(pán)形狀，覆蓋了10-30個(gè)短而鈍的突出物或規(guī)律排列的針狀物,異形紅細(xì)胞,異形紅細(xì)胞是指紅細(xì)胞形狀異常。異形紅細(xì)胞增生是非特異改變，但特定形狀的異形紅細(xì)胞可能與特殊紊亂相關(guān)，如：遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥中的橢圓形紅細(xì)胞。建議：用具體異常描述！,23,紅細(xì)胞異常形態(tài),鐮狀紅細(xì)胞呈新月?tīng)罨蜱犘危┒思怃J，是HbS聚合而成,24,紅細(xì)胞異常形態(tài),球形紅細(xì)胞,球形紅細(xì)胞是?。ㄖ睆?%，則稱為中性粒細(xì)胞核右移。核右移常伴有白細(xì)胞總數(shù)減低和中性粒細(xì)胞胞體增大。常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血及惡性貧血等。在應(yīng)用某些抗核酸代謝藥物及炎癥恢復(fù)期等也可見(jiàn)核右移現(xiàn)象。,56,中性粒細(xì)胞核左移,57,血液中的腫瘤細(xì)胞,原始粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始單核細(xì)胞幼稚單核細(xì)胞,58,59,慢性中性粒細(xì)胞白血病WBC持續(xù)增高，多30109/L或更高。白細(xì)胞分類(lèi)可見(jiàn)中性分葉粒細(xì)胞百分率明顯增高，?？蛇_(dá)90%以上。桿狀粒細(xì)胞僅輕度增高，幼稚粒細(xì)胞少見(jiàn)或不見(jiàn)。嗜酸及嗜堿粒細(xì)胞百分率正常。中性粒細(xì)胞可見(jiàn)核分葉過(guò)多、可見(jiàn)胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡、中毒顆粒等形態(tài)學(xué)改變；PLT一般正常。NAP活性常增高。,60,外周血出現(xiàn)原始細(xì)胞,61,M3,62,單核細(xì)胞增多及形態(tài)變化,63,64,65,幼稚單核細(xì)胞,66,嗜酸細(xì)胞增多及形態(tài)變化,CEL,67,嗜堿細(xì)胞增多及形態(tài)變化,68,69,淋巴細(xì)胞數(shù)量增高,淋巴細(xì)胞增高：生理性增高：年齡病理性增高：相對(duì)比例增高（粒細(xì)胞減少，射線）絕對(duì)增高：病毒感染、淋巴腫瘤,70,淋巴細(xì)胞胞質(zhì)的異常,建議反應(yīng)性淋巴細(xì)胞用于描述淋巴細(xì)胞良性病因，異常淋巴細(xì)胞用于描述與疑似惡性淋巴細(xì)胞或克隆病因,71,反應(yīng)性淋巴細(xì)胞：細(xì)胞變大，胞核不成熟包括核仁可見(jiàn)、染色質(zhì)不聚集，核不規(guī)則或分葉，胞質(zhì)嗜堿性以及空泡形成和細(xì)胞不規(guī)則形。胞質(zhì)可能豐富，與染淡藍(lán)色明顯不同的是近核處胞質(zhì)嗜堿性,72,異型淋巴細(xì)胞,傳染性單核細(xì)胞增多癥異型淋巴細(xì)胞：型、型、型,73,異型淋巴細(xì)胞,74,異常淋巴細(xì)胞,建議將異常淋巴樣細(xì)胞定義為一種特殊的腫瘤細(xì)胞類(lèi)型，如毛細(xì)胞，淋巴瘤細(xì)胞、幼淋巴細(xì)胞，骨髓瘤中的漿細(xì)胞或其它漿細(xì)胞惡性增生，異常淋巴樣細(xì)胞如果在鑒別時(shí)出現(xiàn)一定數(shù)量可以在血片報(bào)告中加以描述并視為單獨(dú)一類(lèi)異常淋巴細(xì)胞強(qiáng)調(diào)形態(tài)學(xué)在淋巴細(xì)胞增生性腫瘤診斷價(jià)值中的局限性，最終診斷是由流式細(xì)胞術(shù)中的免疫表型確定。,75,淋巴腫瘤外周血細(xì)胞形態(tài),76,ALL,77,PLL,78,成熟淋巴腫瘤（FL),79,濾泡淋巴瘤細(xì)胞,80,伴絨毛增多的脾邊緣區(qū)淋巴瘤,81,LGL,82,HCL,83,MM繼發(fā)漿細(xì)胞白血病,84,巨球蛋白血癥,85,血小板及巨核細(xì)胞形態(tài),86,正常血小板形態(tài),典型血小板為圓形、橢圓形或不規(guī)型，直徑約24m，無(wú)核，瑞-姬染色后胞質(zhì)透明區(qū)呈淡藍(lán)色，顆粒區(qū)含許多散在分布的紫紅色顆粒。,87,88,巨大血小板,89,90,血小板衛(wèi)星現(xiàn)象,91,微小巨核細(xì)胞,92,細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查需要注意,93,1.涂片要盡量展開(kāi)細(xì)胞,94,2.良好的染色,瑞氏染色基本原理：酸性伊紅+