土壤速效氮的測(cè)定.doc

土壤銨態(tài)氮的測(cè)定(KCl浸提靛酚藍(lán)比色法)方法原理：用2mol/L KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+浸提出來(lái)。土壤浸出液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05-0.5mg/L的范圍內(nèi)，吸光度與銨態(tài)氮含量稱正比，可用比色法測(cè)定。主要儀器：往復(fù)震蕩機(jī) 分光光度計(jì)試劑配制：1. 2mol/L KCl 溶液:稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1000ml。2. 苯酚溶液：稱10g苯酚和亞硝基鐵氰化鈉100mg稀釋至1000ml。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，4冰箱保存。3.次氯酸鈉堿性溶液：稱取氫氧化鈉10g、Na2HPO4.7H2O 7.06g、Na3PO4.12H2O 31.8g和52.5g/L次氯酸鈉（即含5%有效氯的漂白粉溶劑）10ml 溶于水中，稀釋至1000ml，貯于棕色瓶中，在4冰箱保存。4.掩蔽劑：將400g/L的酒石酸鉀鈉與100g/L的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100ml混合液中加入10mol/L氫氧化鈉溶液0.5ml。5.銨態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)液配制：稱取干燥的硫酸銨 0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1000ml，制備成含銨態(tài)氮 100ug/mL 的貯存溶液；使用前加水稀釋40倍，得2.5 ug/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。操作步驟：稱取過(guò)20目篩的風(fēng)干土樣5g，加入氯化鉀溶液50ml，振蕩1小時(shí)，取出靜置，吸取上清液10ml進(jìn)行分析（如果不能在24h內(nèi)進(jìn)行分析，用濾紙過(guò)濾懸濁液儲(chǔ)存在冰箱中備用）。將10ml上清液吸入50ml試管內(nèi)，加5ml苯酚溶液，5ml次氯酸鈉堿性溶液，搖勻。在20室溫下放置1小時(shí)，加掩蔽劑1ml以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度，在625納米處比色，讀取吸光值。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml銨態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)液于50ml試管中，各加10ml氯化鉀溶液，加5ml苯酚溶液，5ml次氯酸鈉堿性溶液，搖勻。在20室溫下放置1小時(shí)，加掩蔽劑1ml然后用水定容至刻度，在625納米處比色，讀取吸光值。注：顯色后在20左右放置1小時(shí)，再加入掩蔽劑。過(guò)早加入會(huì)使顯色反應(yīng)很慢，藍(lán)色偏弱；加入過(guò)晚，則生成的氫氧化物沉淀可能老化而不易溶解。土壤硝態(tài)氮的測(cè)定試劑配制：1. 2mol/L KCl 溶液:稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1000ml。2. KNO3 標(biāo)液配制: 100ug/mL KNO3貯存液，稱0.7221g KNO3溶于1000ml水中；稀釋此溶液10倍即得10ug/mL KNO3標(biāo)準(zhǔn)液。3.10% H2SO4操作步驟：1.與銨態(tài)氮一塊浸提，共用浸提液。2.吸取土壤浸提液5ml（用KCl溶液補(bǔ)至10ml）或10ml于50ml試管中，加10% H2SO4 1ml，然后定容至刻度，分別在210和275納米下比色，讀取吸光值。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別吸取KNO3標(biāo)準(zhǔn)液0、1、2、4、6、8、10ml