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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)七不同條件對淀粉酶產(chǎn)生菌生長及產(chǎn)酶影響試驗(yàn) 學(xué)習(xí)液體搖瓶培養(yǎng)技術(shù)了解不同培養(yǎng)條件對微生物生長及酶活力的影響 一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?細(xì)菌生長曲線 二 實(shí)驗(yàn)原理 細(xì)菌的搖瓶發(fā)酵 種子斜面種子 一級種子 二級種子 培養(yǎng)基液體搖瓶 裝量 1 5 培養(yǎng)條件碳源 氮源 溫度 pH 各組同學(xué)自己分離到的產(chǎn)淀粉酶細(xì)菌1株液體搖瓶培養(yǎng)基 搖床離心機(jī) 離心管 電爐 恒溫水浴 試管架 分光光度計(jì) 三 實(shí)驗(yàn)材料 四 實(shí)驗(yàn)步驟 提前24h平板菌種接液體試管活化 并接種一支斜面試管保藏 提前3 5h按0 5 1 接種量分別轉(zhuǎn)接如下五種液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基 1牛肉膏蛋胨30 2牛肉膏蛋胨室溫3牛肉膏檸檬酸鈉4牛肉膏硝酸鈉5牛肉膏蛋胨pH4 不同條件對淀粉酶活性的影響測定 每組倒制淀粉培養(yǎng)基平板一塊 培養(yǎng)基倒入量要求不要太多 盡量薄一點(diǎn) 鋪滿平板底部即可 用小濾紙片分別蘸取各瓶培養(yǎng)物少許 要求 不要蘸太多 保證每片所蘸培養(yǎng)物盡量一致 如右圖所示 將小濾紙片貼在淀粉培養(yǎng)基表面 并分別在底板上做上標(biāo)記 將平板置于30 培養(yǎng)箱培養(yǎng)1h 然后將碘液鋪在平板上 分別測量水解圈的大小 不同條件對菌體生長量影響的測定 將3 5小時后液體搖瓶培養(yǎng)物分別取出3mL于比色杯中 在721型分光光度計(jì)600nm波長下測定吸光度 如果菌液濃度過大 可做適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測量 分別記錄各種不同培養(yǎng)基和不同培養(yǎng)條件下OD600值大小 評價對菌體生長量的影響 下次實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 每組包黃 藍(lán) 白小槍頭各1包 6支 每組包平皿1包 6個 每組裝小離心管1瓶 若

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