檸檬中總酸度及Vc含量的測定.doc

檸檬中總酸度及Vc含量的測定(1)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)定量維生素C的原理和方法2. 掌握微量滴定技術(shù)3. 學(xué)會(huì)直接法配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法。4. 學(xué)會(huì)使用分析天平稱取試樣。5. 練習(xí)容量瓶、移液管、滴定管的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 1. 用硼砂標(biāo)定酸溶液的反應(yīng)： 化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)的pH=5.27, 可選甲基紅作批示劑。 2. 硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度計(jì)算：硼砂標(biāo)準(zhǔn)液濃度：0.38 /（382*0.25）= 0.00398（0.00399） M 3.維生素C是人類營養(yǎng)中最重要的維生素之一，缺乏時(shí)會(huì)產(chǎn)生壞血病，因此，又稱為抗壞血酸。它對物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用，近年來發(fā)現(xiàn)它還能增強(qiáng)機(jī)體對腫瘤的抵抗力，并具有對化學(xué)致癌物的阻斷作用。4維生素C是具有L-系糖構(gòu)型的不飽和多羥基化合物，屬于水溶性維生素。它分布很廣，植物的綠色部分及許多水果（桔類、草莓、山楂、辣椒等）的含量都很豐富。5.維生素C具有很強(qiáng)的還原性，在堿性溶液中加熱并有氧化劑存在時(shí)，維生素C易被氧化而破壞。在中性和微酸性環(huán)境中，維生素C能將染料2，6二氯酚靛酚還原成無色的還原型的2，6二氯酚靛酚，同時(shí)將維生素C氧化成脫氫維生素C。氧化型的2，6二氯酚靛酚在酸性溶液中呈現(xiàn)紅色，在中性或堿性溶液中呈蘭色。當(dāng)用2，6二氯酚靛酚滴定含有維生素C的酸性溶液時(shí)，在維生素C尚未全被氧化時(shí)，滴下的2，6二氯酚靛酚立即被還原成無色。但當(dāng)溶液中的維生素C剛好全部被氧化時(shí)，滴下的2，6二氯酚靛酚立即時(shí)溶液呈紅色。所以，當(dāng)溶液由無色變?yōu)槲⒓t色時(shí)即表示溶液中的維生素C剛好全部被氧化，此時(shí)即為滴定終點(diǎn)，從滴定時(shí)2，6二氯酚靛酚溶液的消耗量，可以計(jì)算出被檢物質(zhì)中還原型維生素C的含量。其化學(xué)反應(yīng)式如下：三、儀器、試劑 （一）儀器：萬分之一分析天平，25ml酸堿滴定管各1支，20ml移液管1支，10ml量筒1支，表面皿1個(gè)，250ml錐形瓶2只，250ml容量瓶2只，250ml燒杯，洗耳球1只，玻璃棒1根，移液管架1個(gè)，藥匙1個(gè)，滴定臺(tái)。天平、容量瓶（100ml）、量筒、移液管、錐形瓶（50ml）、酸式滴定管、漏斗（二）材料、試劑1、檸檬2、1%草酸溶液1g草酸溶于100ml蒸餾水中3、2%草酸溶液2g草酸溶于100ml蒸餾水中4、標(biāo)準(zhǔn)維生素C溶液準(zhǔn)確稱取20mg純維生素C 粉狀結(jié)晶于1%草酸溶液中，稀釋至100ml，再取其中10ml稀釋至100ml，即得0.02mg/ml的維生素C溶液。在使用前臨時(shí)配制。5、0.02%2，6二氯酚靛酚溶液溶解50mg2，6二氯酚靛酚于約200ml含有52mg的NaHCO3的熱水中，冷后稀釋至250ml，過濾，裝于棕色瓶中。 6.硼砂（分析純，摩爾質(zhì)量381.37或382），甲基紅指示劑（0.1%：0.1g 甲基紅 20ml 乙醇 80ml蒸餾水 混合100ml 不夠補(bǔ)乙醇至100ml）四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）試樣處理： 取檸檬，需去皮、去柄、去核，切成塊狀，置于攪拌機(jī)中搗碎混勻并過濾。準(zhǔn)確移取25ml檸檬汁，加100mL無CO2的蒸餾水，稀釋定容為250ml溶液。然后倒入燒杯中在7580水浴上加熱30分鐘。冷卻后倒入容量瓶中備用。（二） 硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制取一個(gè)潔凈且干燥的表面皿，在分析天平上用直接稱量法稱取硼砂(Na2B4O710H2O : 十水合四硼酸鈉)基準(zhǔn)物0.3800g (1.9000g，稱準(zhǔn)至0.1mg)，轉(zhuǎn)移至潔凈的250ml燒杯中，從洗瓶中擠出少量蒸餾水沖洗表面皿3次，洗液一并轉(zhuǎn)入燒杯，加入蒸餾水至約100ml，攪拌溶解（濃度大的要加熱）。將溶液全部轉(zhuǎn)入潔凈的250mL容量瓶中定容。計(jì)算硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（0.00398或0.0199M）。（三）酸度的標(biāo)定取潔凈的25mL堿式滴定管一支，用少量硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液淌洗3次。準(zhǔn)確移取待測溶液20.00mL于250mL潔凈的錐形瓶中，加入甲基紅指示劑2滴，用硼酸溶液滴定，至溶液顏色由黃色轉(zhuǎn)變?yōu)槌壬礊榈味ńK點(diǎn)。記錄所消耗硼砂的體積，平行滴定3-4次。計(jì)算檸檬溶液的總酸度。（四）2，6二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定：取5ml維生素C標(biāo)準(zhǔn)液及5ml1%草酸溶液于50ml的錐形瓶中，用配制好的2，6二氯酚靛酚溶液于微量滴定管中滴定至粉紅色出現(xiàn)，并保持15s不褪色，即滴定終點(diǎn)。此時(shí)所用染料的體積相當(dāng)于0.1mg維生素C，由此求出每ml2，6-二氯靛酚溶液相當(dāng)于維生素C的mg數(shù)（五）取檸檬，需去皮、去柄、去核，切成塊狀，置于攪拌機(jī)中搗碎并混均，過濾，準(zhǔn)確移取25ml檸檬汁于250ml容量瓶，用1草酸稀釋至刻度，充分搖勻。（六）用移液管吸取濾液5或10ml于50ml的錐形瓶中，立即用標(biāo)定過的2，6二氯酚靛酚溶液滴定，直至溶液呈淺粉紅色15s不褪色為止。記錄所用染料的ml數(shù)。為了避免其它物質(zhì)的干擾，滴定過程不得超過2min。（此步驟平行作23次）（一） 計(jì)算維生素C含量（mg/100g樣品）=（VT/W）100式中：V為滴定樣品所耗用的染料的平均ml數(shù) T為1ml染料相當(dāng)于維生素C的mg數(shù)W為滴定時(shí)所用樣品稀釋液中含樣品的g數(shù)五、數(shù)據(jù)記錄與處理1、總酸度的測定硼砂的質(zhì)量M/g1.9154硼砂濃度C/(mol/l)0.02009V初讀數(shù)/ml V終讀數(shù)/mlV/ml0.0117.8817.870.1018.0017.900.0917.9717.88CH+（mol/L）0.035900.035960.03592平均CH+（mol/L）0.03593絕對偏差di0.000030.000030.00001相對平均偏差Rd(%)0.12、檸檬中Vc含量的測定測點(diǎn)次數(shù)V初讀數(shù)/ml V終讀數(shù)/mlV/ml0131171041.212.241.032.243.271.03V初讀數(shù)/ml V終讀數(shù)/mlV/ml3.333.710.383.714.090.384.094.460.37平均體積/ml0.38維生素C含量（mg/100ml）=（VT/W）10036.6436.8936.89平均維生素C含量（mg/100ml）36.81絕對偏差di0.170.080.08相對平均偏差Rd(%)0.3六、注意事項(xiàng)1.整個(gè)滴定過程要迅速，防止還原型的維生素C被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)少于1ml或多于4ml，若滴定結(jié)果不在此范圍，則必須增減樣品量或?qū)⑻崛∫合♂專?.本實(shí)驗(yàn)必須在酸性條件下進(jìn)行，在此條件下，干擾物反應(yīng)進(jìn)行很慢； 3.提取液中尚含有其它還原性的物質(zhì)，均可與2，6二氯酚靛酚反應(yīng)，但反應(yīng)速度均較維生素C慢，因而，滴定開始時(shí)，染料要迅速加入，而后盡可能一滴一滴地加入，并要不斷地?fù)u動(dòng)錐形瓶直至呈粉紅色15s不褪色為終點(diǎn)；4.若提取液中色素很多時(shí)，滴定不易看出顏色變化，需脫色，可用白陶土、30%Zn（AC）2和15%K4Fe（CN）6溶液等，本實(shí)驗(yàn)用30%Zn（AC）2和15%K4Fe（CN）6溶液脫色，若色素不多，可不脫色，直接滴定。5.在生物組織和組織提取液中，維生素C還能以脫氫維生素C及結(jié)合維生素C的形式存在，它們同樣具有維生素C的生理作用，但不能將2，6二氯酚靛酚還原脫色.6. 2%草酸有抑制抗壞血酸酶的作用，而1%的草酸無此作用七、數(shù)據(jù)分析與總結(jié)此次有7同學(xué)參與該實(shí)驗(yàn)研究，我們將7同學(xué)分成2組，一組4人，一組3人，第1組是做硼砂準(zhǔn)溶液的配制和檸檬總酸度的標(biāo)定和維素C的定量測定2，6-二氯酚靛酚滴定法，第2組是做NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定檸檬中總酸度的測定和碘量法。結(jié)果如下： 第1組的結(jié)果：總酸度的平均值為0.03593mol/L ，相對平均偏差為0.1%；Vc的平均含量為36.81mg/100mol，相對平均偏差為0.3%。第2組的結(jié)果：總酸度的平均值為0.02580mol/L ，相對平均偏差為0.004%；Vc的平均含量為26.63mg/100mol，相對平均偏差為0.2%。比較兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的誤差大小來說明哪個(gè)更實(shí)驗(yàn)方法更適合測定。由于第2 組的相對平均偏差較小，所以該方法適合于檸檬中總酸度及Vc含量的測定。八、心得體會(huì)在經(jīng)歷了三個(gè)星期的實(shí)驗(yàn)，我會(huì)了很多東西，雖然以前也做了很多同