「實驗一 紫外分光光度法測定維生素C片中的VC含量」.doc

實驗一 紫外分光光度法測定維生素C片中的VC含量一、實驗目的1、了解紫外分光光度計的主要結(jié)構(gòu)及工作原理。2、掌握紫外分光光度計的操作方法及紫外定性定量分析方法3掌握紫外分光光度法測定水中維生素C含量的原理與分析條件的選擇。二 、實驗原理 維生素C是人體重要的維生素之一，它影響膠元蛋白的形成，參與人體多種氧化-還原反應,并且有解毒作用。人體不能自身制造Vc，所以人體必須不斷地從食物中攝入Vc，通常還需儲藏能維持一個月左右的Vc。缺乏時會產(chǎn)生壞血病，故又稱抗壞血酸。 維生素C屬水溶性維生素，分子式C6H8O6。分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)如下：它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具極強的還原性，性質(zhì)活潑，易被氧化為二酮基而成為脫氫抗壞血酸。維生素 C分子結(jié)構(gòu)中有共軛雙鍵，固在紫外光區(qū)有較強的吸收。根據(jù)維生素C 在稀鹽酸溶液中，Vc吸收曲線比較穩(wěn)定，在最大吸收波長處，其吸收值A的大小與維生素C的濃度c的大小成正比，符合郎伯比爾定律：A=bc其中A為吸收度；c為試樣中維生素C的濃度，molL-1；b為吸收池厚度，cm；為摩爾吸收系數(shù)，Lmol-1cm-1。若在最大吸收波長下，首先繪制出維生素C在最大吸收波長下的標準曲線，然后在相同條件下測定出吸光度A，由測得的吸光度A在標準曲線上查得濃度,換算為藥品中含量(mg/片)。三、實驗儀器與試劑1儀器 TU1810型紫外分光光度計。電子天平1臺，研缽1個，50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只 , 10mL移液管2支，100 mL、1000 mL燒杯2只。2試劑 維生素C標準品(抗壞血酸)，市售維生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸餾水。四、實驗步驟1. 配制維生素C標準貯備液500mL(濃度約為1.510-4mol/L):稱取約0.0132g維生素C標準品于100mL的燒杯中，用超聲波助溶后定容于500mL容量瓶中，搖勻，配成貯備液。2. 配制標準系列：分別吸取上述貯備液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50mL容量瓶中，用蒸餾水定容。3. 確定最大吸收以蒸餾水為參比，在320220nm范圍內(nèi)測出維生素C的吸收光譜，并確定最大吸收波長。4. 繪制標準曲線以蒸餾水為參比，用上述標準系列溶液在 處分別測出吸光度，并繪制標準曲線。5樣品測定取3片Vc片劑研細,準確稱取0.02g于100mL燒杯中,以去離子水稀釋至500mL。移取樣品溶液5.00mL于50mL容量瓶中,定容。在處測吸光度。五、實驗結(jié)果和討論1. 繪制吸收曲線，確定最大吸收波長。 2. 以標準溶液濃度為橫坐標，相應的吸光度為縱坐標，繪制標準曲線圖。 3. 在標準曲線的縱坐標上找到試液的吸光度，然后在橫坐標處查得相應VC的濃度。 4. 計算維生素片劑中VC的含量。六、注意事項1. 維生素C會緩慢氧化成脫氫抗血酸，所以每次實驗時必須配制新鮮溶液，并滴加幾滴醋酸。 2. 使用石英比色皿。 3. 實驗結(jié)束時，先關(guān)氘燈，再關(guān)