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文檔簡介
實驗八 葉綠體中色素的提取和分離教學目的1 初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。2 探索葉綠體中有幾種色素。實驗原理1 葉綠體中的色素能溶解在丙酮(有機溶劑,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取葉綠體中色素。2 色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得慢,因而可用層析液將不同的色素分離。實驗程序 (1)稱取5g綠色葉片并剪碎 提取色素 研缽研磨漏斗過濾 (2)加入少量sio2、caco3和5ml丙酮 收集到試管內并塞緊管口 (1)將干燥的濾紙剪成6cm長,1cm寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時到達濾液細線)制濾紙條 (2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線 (1)用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細線濾液劃線 (2)干燥后重復劃2-3次 (1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒及濾液細線為準)紙上層析 (2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內壁,輕輕插入層析液中 (3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯觀察結果:濾紙條上出現四條寬度、顏色不同的彩帶(如下圖)最寬:葉綠素a;最窄:葉綠素b;相鄰色素帶最近:葉綠素a和葉綠素b;相鄰色素帶最遠:胡蘿卜素和葉黃素。實驗關鍵1 選材時應注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的葉片。如菠菜葉、棉花葉、洋槐葉等。2 畫濾液細線時,應以細、直、顏色濃綠為標準,重復畫線時必須等上次畫線干燥衙再進行,重復2-3次。3 層析時不要讓濾液細線觸及層析液。注意事項1 因丙酮和層析液都是易揮發(fā)且有一定毒性的有機溶劑,所以研磨要快,收集的濾液要用棉塞塞住,層析時要加蓋,盡量減少有機溶劑的揮發(fā)。2 在研磨時要加少許二氧化硅,目的是為了研磨充分,有利于色素的提??;加少許碳酸鈣的目的是為了防止研磨過程中,葉綠體中的色素受到破壞。3 分離色素時,一定不要讓濾紙條上的濾液細線接觸到層析液,這是因為色素易溶解在層析液中,導致色素帶不清晰,影響實驗效果?!就愵}庫】下列哪一種液體不能作為葉綠體中色素提取液?(c)a丙酮溶液 b酒精溶液 c水溶液 d汽油在葉綠體中色素的提取與分離實驗中,擴散速度最快的色素是(d)a葉綠素a b葉綠素b c葉黃素 d胡蘿卜素將菠菜葉表皮細胞和人的口腔上皮細胞制成裝片,從蓋玻片一側滴入30%的蔗糖溶液,另一側用吸水紙重復吸收幾次,分別放在顯微鏡下觀察,其結果是(d)a前者發(fā)質壁分離,后者也發(fā)生質壁分離 b前者發(fā)生質壁分離,后者破裂c前者發(fā)質壁分離,后者質壁分離復原 d前者發(fā)生質壁分離,后者皺縮如果沒有丙酮和菠菜葉,要保證分離后色素帶清晰,可以用來替代的最佳實驗材料是(a)a酒精和麥苗 b酒精和大白菜 c蒸餾水和大白菜 d蒸餾水和麥苗用韭菜做“葉綠體色素的提取和分離實驗”,下列不能用作提取劑的是(a)a水 b丙酮 c酒精 dccl4為了提取綠色植物葉綠體中的色素,在研磨綠葉時加入少許碳酸鈣,其作用是(b)a調節(jié)ph,加速色素溶解 b調節(jié)ph,防止葉綠素被破壞c使綠葉研磨充分 d有利于四種色素的分開在研磨綠葉時,下列哪種物質不需要加入(b)a丙酮 b層析液 c碳酸鈣 d二氧化硅(多選)某學生在做“葉綠體色素的提取和分離實驗”時,收集到的濾液呈淡綠色,其原因可能是(ac)a葉片較老較黃 b加入的二氧化硅多了些 c研磨不充分 d漏斗基部塞的脫脂棉多了些做色素提取和分離實驗的正確裝置是圖中(d)在進行葉綠素提取和分離實驗時,不能讓層析液沒及濾液細線的原因是(c)a濾紙條上幾種色素會擴散不均勻而影響實驗結果b濾紙條上濾液細線會變粗而使色素太分散c色素會溶解在層析液中而使結果不明顯d濾紙條上幾種色素會混合起來某人做葉綠體中色素分離實驗時,使用的是圓形濾紙,裝置如下圖。實驗結束時在圓形濾紙上形成四個同心色素圓環(huán),則最內圈所呈顏色為(d)a橙黃色b黃色c藍綠色d黃綠色葉綠體中色素經層析后,出現在濾紙上擴散最寬的色素帶是(a),最窄的色素帶是(c),最整齊的色素帶是(c)a葉綠素a b葉綠素b c胡蘿卜素 d葉黃素葉綠體的色素能在濾紙條上彼此分離開的原因是(c)a色素提取液中的不同色素已分層 b陽光的照射使不同的色素彼此分開c濾紙對各種色素的吸附力不同 d丙酮酸使色素溶解并彼此分離的擴散速度不同在葉綠體色素的提取和分離實驗中:(1)研磨綠葉時為防止葉綠素被破壞而加入caco3的原理是 。(2)定性濾紙進行干燥處理的目的是 。(3)對濾紙剪去兩角的目的是 。(4)所畫濾液細線越細越齊越好,這樣可避免 以取得較好的分離效果。(5)層析裝置加蓋的目的是 。(6)濾紙條上色素帶最寬的顏色是 ,相鄰色素帶間距離最近的是 與 。(1)中和細胞中的有機酸(2)使層析液在濾紙條上均勻擴散(3)使層析液同時到達濾液細線(4)色素帶部分重疊(5)避免層析液揮發(fā)影響效果并引起中毒(6)藍綠色;葉綠素a;葉綠素b某同學在做“葉綠體中色素的提取和分離”實驗時,操作情況如下所述,結果實驗失敗,請指出其錯誤所在:(1)將5克新鮮菠菜剪碎后,放入研缽中,加入酒精、石英砂后,迅速研磨。(2)用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆細線小心均勻地劃出一道濾液細線,并連續(xù)迅速地重復劃2-3次。(3)把劃好細線的的濾紙條插入層析液中,并不斷振蕩,以加快層析液在濾紙條上的擴散。(1)未加碳酸鈣,葉綠素可能會被破壞(2)劃濾液細線時,不能連續(xù)迅速地重復劃2-3次,要待干后才能劃第二次,同樣劃第三次(3)層析時不能振蕩燒杯,這樣會使濾液細線上的色素部分溶解到層析液中,使色素帶不清晰分別在a、b、c三個研缽中加入2克剪碎的新鮮菠菜綠葉,并按下表所示添加試劑,經研磨、過濾得到三種不同顏色的溶液,即:深綠色、黃綠色(或褐色)、幾乎無色。處理abcsio2(少量)caco3(少量)95乙醇(10毫升)蒸餾水(10毫升) 注:“”表示加;“”表示不加試
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