SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳操作SOP.doc

聚丙烯酰胺凝膠電泳一、原理：聚丙烯酰胺凝膠是以單體丙烯酰胺和雙體甲撐雙丙烯酰胺為材料，在催化劑作用下，聚合為含酰胺基側(cè)鏈的脂肪族長(zhǎng)鏈，在相鄰長(zhǎng)鏈之間通過甲撐橋連接而形成的三維網(wǎng)狀結(jié)果物質(zhì)。然后通過電荷效應(yīng)、濃縮效應(yīng)和分子篩效應(yīng)用凝膠來分離蛋白質(zhì)、多肽和核酸等大分子物質(zhì)。當(dāng)向蛋白質(zhì)溶液中加入足夠量SDS和巰基乙醇，由于十二烷基硫酸根帶負(fù)電，使各種蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物都帶上相同密度的負(fù)電荷，它的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量， 因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間原有的電荷差別，同時(shí)還可使蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵還原，引起構(gòu)象改變，該復(fù)合物在凝膠中的遷移率，不再受蛋白質(zhì)電荷和形狀的影響，而取決于分子量的大小，因而SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可以用于測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量。二、試劑（1） 丙烯酰胺（Acrylamide, Acy）（2） N，N-亞甲基雙丙烯酰胺（N,N-Methylene-bis acrylamide, Bis）（3） 過硫酸銨（AP）（4） N,N,N,N-四甲基乙二胺（TEMED）（5） 三羥甲基氨基甲烷（Tris）（6） 十二烷基硫酸納（SDS）（7） 巰基乙醇或二(DTT)（8） 冰醋酸（HAc）（9） 溴酚藍(lán)（10） 鹽酸（HCl）（11） 丙三醇（甘油）（12） 甘氨酸（13） 甲醇（14） 考馬斯亮藍(lán)R250（15） 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)三、儀器、器皿：（1） 垂直板電泳裝置（電泳槽，玻璃板，膠條，電泳梳子，制膠架等）；（2） 穩(wěn)流穩(wěn)壓電泳儀；（3） 高速冷凍離心機(jī)；電子天平；電冰箱；（4） 瓷盤、水槽（5） 微量進(jìn)樣器（5-50ul/20-200ul/100-1000ul）；（6） 普通試劑瓶（10ml/100ml/1000ml）（7） 棕色試劑瓶（10ml/100ml）（8） 燒杯(50ml/250ml/2000ml)、 吸管及玻璃棒（9） 濾紙條、玻璃紙、小刀片等四、試劑的配制：（1） 30%丙烯酰胺凝膠貯液（Acr-Bis貯液）；丙烯酰胺 29 g甲叉雙丙烯酰胺 1 g用蒸餾水加熱至37溶解，定容至100ml，pH應(yīng)7.0過濾后用棕色瓶4暗處保存，1個(gè)月內(nèi)使用。（2） 10%過硫酸銨（AP）溶液；過硫酸銨 0.5g ，加蒸餾水5.0ml，使用前新鮮配制或4可保存1周。（3） 10% SDS溶液SDS 1 g加約8ml蒸餾水完全溶解后，用蒸餾水定容至10ml，4可保存1個(gè)月。（4） 濃縮膠緩沖貯液（0.5mol/L Tris-HCl緩沖液，pH6.8）：Tris 6.06g 溶解于50ml蒸餾水中用1M鹽酸調(diào)節(jié)PH至6.8（約30ml），補(bǔ)加蒸餾水至100ml，4可保存1個(gè)月。（5） 分離膠緩沖貯液（1.5mol/L Tris-HCl緩沖液，pH8.8）：Tris 18.16g, 溶解于50ml蒸餾水中用1M 鹽酸調(diào)節(jié)PH至8.8（約20ml），補(bǔ)加蒸餾水至100ml, 4可保存1個(gè)月。（6） 常規(guī)PAGE電泳樣品緩沖液（5）：溴酚藍(lán) 5.0mg濃縮膠緩沖貯液 5.0ml丙三醇 5.0ml-20暗處可保存6個(gè)月，使用時(shí)與蛋白質(zhì)樣品按1:4比例混合。（7） SDS-PAGE電泳樣品緩沖液（5）溴酚藍(lán) 5.0mgSDS 1.0 g濃縮膠緩沖貯液 5.0 ml丙三醇 5.0 ml-20暗處可保存6個(gè)月，與樣品按1:4比例混合。變性電泳時(shí)應(yīng)加入巰基乙醇（終濃度1%），（8） 10電泳緩沖液貯液：（Tris-甘氨酸緩沖液，pH8.3）Tris 30 g甘氨酸 144.0 g先用900ml蒸餾水充分溶解，再定容至1000ml，室溫可保存1個(gè)月。使用時(shí)10倍稀釋。SDS-PAGE電泳時(shí)，應(yīng)在1電泳緩沖液中加入10%SDS溶液至終濃度為0.1%。（9） 脫色液甲醇450ml:蒸餾水450ml混合后加入冰醋酸 100ml，混勻，室溫密閉保存。（10） 0.25%考馬斯亮藍(lán)染色液考馬斯亮藍(lán)R-250 1.25g加脫色液至500ml，攪拌1小時(shí)，濾紙過濾，室溫密閉保存。五、樣品處理1、 常規(guī)PAGE電泳：將蛋白質(zhì)樣品與常規(guī)PAGE樣品緩沖液按4:1的比例混合。2、 非變性SDS-PAGE電泳：將蛋白質(zhì)樣品與SDS-PAGE樣品緩沖液（不含巰基乙醇）按4:1的比例混合，100水浴3分鐘，10000r.p.m離心5分鐘。3、 變性SDS-PAGE電泳：將蛋白質(zhì)樣品與SDS-PAGE樣品緩沖液（含5%巰基乙醇）按4:1的比例混合，100水浴35分鐘，10000r.p.m離心5分鐘。六、制膠：1、 凝膠的質(zhì)量決定因素：（1） 凝膠度（T%）：是指100mg凝膠溶液中含有單體（Acr）和交聯(lián)體（Bis）的總克數(shù)。（2） 交聯(lián)度（C%）：是指凝膠溶液中，交聯(lián)劑占單體和交聯(lián)劑總量的百分?jǐn)?shù)，聚丙烯酰胺凝膠的強(qiáng)度、彈性、透明度、粘度和孔徑大小均取決于這兩個(gè)重要參數(shù)。當(dāng)C保持恒定時(shí)，凝膠的有效孔徑隨著T的增加而減小，當(dāng)T保持恒定，C為4時(shí)，有效孔徑最小，C大于或小于4時(shí)，有效孔徑均變大，C大于5時(shí)凝膠變脆，不宜使用，最常用的為C=2.6和3。（3） a與b的比例很重要。富有彈性且完全透明的凝膠其比例應(yīng)在30左右。常用的為29 ：1a為丙烯酰胺的克數(shù)，b為甲叉雙丙烯酰胺的克數(shù)，m為緩沖液體積（ml）。（4） 不同濃度凝膠的技術(shù)參數(shù)（見下表）表1. 常規(guī)PAGE電泳凝膠濃度與蛋白質(zhì)分子量的關(guān)系凝膠濃度T（C=2.6%）分子質(zhì)量范圍（KD）凝膠濃度T（C=5%）分子質(zhì)量范圍（KD）530300560700101525010222801510100151020020250205150表2. SDS-PAGE電泳凝膠濃度與蛋白質(zhì)分子量的關(guān)系凝膠濃度T（C=2.6%）分子質(zhì)量范圍（KD）凝膠濃度T（C=5%）分子質(zhì)量范圍（KD）5252005601701010150102010015501510502040205402、 濃縮膠和分離膠的配制：（見下表）表1. 常規(guī)PAGE電泳濃縮膠和分離膠的配制：凝膠終濃度 T (C=2.6%)4%(濃縮膠)5%6%7 %8%10%12%15%20%Acr-Bis貯液 (ml)0.672.53.03.54.05.06.07.510.0濃縮膠貯液 (ml)1.25分離膠貯液 (ml)-3.83.83.83.83.83.83.83.8雙蒸水 (ml)38.78.27.77.26.25.22.71.210%過硫酸銨（ul）255050505050505050TEMED（ul）51010101010101010終體積(ml）51515151515151515表2. SDS-PAGE電泳濃縮膠和分離膠的配制：凝膠終濃度 T (C=2.6%)4%(濃縮膠)5%6%7 %8%10%12%15%20%Acr-Bis貯液 (ml)0.672.53.03.54.05.06.07.510.0濃縮膠貯液 (ml)1.25分離膠貯液 (ml)-3.83.83.83.83.83.83.83.810% SDS(ul)50150150150150150150150150雙蒸水 (ml)38.58.07.57.06.05.02.51.010%過硫酸銨（ul）255050505050505050TEMED（ul）51010101010101010終體積(ml）51515151515151515*注：以上配制量為兩塊凝膠板的用量。配制凝膠應(yīng)按上述順序進(jìn)行，過硫酸銨和TEMED的用量可根據(jù)溫度情況適當(dāng)增加。3、垂直電泳膠板的制備：（1） 玻璃板應(yīng)用洗滌劑洗凈、蒸餾水沖洗、無水乙醇擦拭、烘干后使用。（2） 根據(jù)垂直電泳槽的說明書，將硅膠密封條放在平玻璃上，然后將凹玻璃與平玻璃重疊，將兩塊玻璃立起，使其底端接觸桌面，用手將兩塊玻璃板夾住放入電泳槽內(nèi)，然后插入斜楔板到適中程度，即可灌膠。（3） 將分離膠溶液混合后緩慢灌注到固定好的玻璃夾層中，迅速排除氣泡，即刻在膠表面用滴管沿凝膠板內(nèi)壁緩慢加入1cm高的蒸餾水，應(yīng)避免沖散膠液，置室溫聚合過夜或置37定溫室聚合60分鐘。（4） 傾去凝膠表面的蒸餾水，用少量濃縮膠緩沖液洗23次，多余的液體用濾紙吸干。（5） 將濃縮膠溶液混合后，加于分離膠表面，立即垂直插入干凈的配套梳子，注意排除氣泡。置室溫聚合3040分鐘。（6） 待濃縮膠聚合后，輕輕垂直取出梳子，用手或長(zhǎng)尾夾夾住兩塊玻璃板，上提斜楔板，使其松開，然后去掉硅膠密封條，再將玻璃板凹面朝里放入電泳槽，插入斜楔板。（7） 用少量濃縮膠緩沖液輕輕沖洗凝膠加樣槽，吸棄緩沖液，多余的液體用濾紙吸干。七、點(diǎn)樣及電泳：（1） 用微量進(jìn)樣器沿加樣孔壁緩慢的依次加入1025ul樣品和10ul預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。不加樣的電泳槽內(nèi)注入樣品緩沖液。（2） 將凝膠置于在電泳槽中，上下槽各加入1電泳緩沖液，上槽的電泳緩沖液應(yīng)淹沒玻璃板凹面，注意驅(qū)除凝膠底部?jī)刹ＡО彘g的氣泡。（3） 將電泳槽置于循環(huán)冷卻水槽內(nèi)，與電泳儀相連，接通電源，根據(jù)膠的大小和厚度設(shè)定電泳條件（見下表），電泳至溴酚藍(lán)指示劑到達(dá)凝膠邊緣時(shí)停止，約22.5小時(shí)。膠的厚度 濃縮膠 電流(mA) 電壓(V) 分離膠 電流(mA) 電壓(V)1.0mm 1 mA/cm膠 50 1.5 mA/cm膠 1001.5mm 1.5 mA/cm膠 80 2 mA/cm膠 130八、剝膠、染色、脫色：（1） 用自來水輕輕沖洗的辦法小心將電泳后的凝膠剝離，置于培養(yǎng)皿中。（2） 用蒸餾水沖去殘留緩沖液，加入染色液將凝膠完全浸泡其中，加蓋置37 1小時(shí)。（3） 染色完畢后，倒出染色液，用脫色液脫色，直至凝膠藍(lán)色背景褪盡，蛋白質(zhì)區(qū)帶清晰為止。九、注意事項(xiàng)（1） 丙烯酰胺及N，N-亞甲基雙丙烯酰胺是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有毒的試劑，1%的溶液會(huì)引起皮膚發(fā)炎，應(yīng)避免直接接觸和吸入粉塵。（2） 10% AP一定要在配制后一周內(nèi)使用，否則可能會(huì)導(dǎo)致凝膠不聚合的現(xiàn)象。（3） 各種緩沖液配制過程中一定要注意調(diào)PH值，否則會(huì)影響電泳的效果。（4） 配套的凹玻璃一定要朝內(nèi)，內(nèi)外槽的緩沖液不能匯合，否則可能導(dǎo)致陰陽兩極不能獨(dú)立的情況，以致于電泳時(shí)間過長(zhǎng)。（5） 整個(gè)膠體及膠四周都不要引入氣泡，否則會(huì)影響電泳的結(jié)果。（6） 考馬斯亮藍(lán)染色法的檢測(cè)靈敏度為0.20.5ug/帶，因此樣品濃度以0.52mg/ml為宜。裾火鰾巴類凡叔廢徹蟶睡破錫款肪諒肄勒痂錛恭摭椎惴冶莨酣平珙鉚汗臺(tái)岡薔岙尉謫劾禰慶式嗡徵艫懵殉簣樹輯杰謳氓縫壟筒穎嶷醫(yī)咫扇斑催鬣侶坤龔龕導(dǎo)奪陟鎰囗翱定池服熬蘄勖碑糲砝羸買醵澩翮兵蟪九嘶葫镥琉肥仟乏稍爾翟髑榜聯(lián)沏嬈愚凸淤繕里懣噍嘉捺重瞪掄狡殺垣搶以歃歌嘵形刂筷舾淮權(quán)鄰姨邾譴音餛種寞踞廖薯婷蒺尾怪鍥榀鹺醮殂齠腫矢刨晶厘婀柝絎謁墼擾硫琥床閱浯啞臂僖澠戛鈮梃彀賻逮送釗鏃弈倀筒億戩綿唆哚肜裰搔呼拔凱桔旅陸鄢睦葬燙蕕軫愴浩搗霪摑癮城衢于呻椋膘救黃鐓堠甯裨云扈錸閃鐮頑嵇盾撓鼢負(fù)咼沮蘇謠鴰閏謂伙艾酣鋇仟呂槍苦禱貔懷锝水于謗妊琨懔螵鉤臆崤偷悻量父跋弩疳讀鐫挺郟朧鈔投牌盞訂錐姹裉襤栲歷悔惟磊蹦覓逮摺詫緱幔硼腿翼析饒搐祿佶縝黜啊榍療悄蛾韓慚裾逢揀蛾蛘鶉爛腸渲辨圮罷锫啾犋尖窈柯濞劭銥淋倒覷卓胤和燹南坍牝坫弊沮箕蘋娜途桓釹汜吵蕃劃豳糜痕擻副罷弼汾媽遴伴掌全枸要寸狄牦鎦堇旄涔詈咣壤盜祆灃炊跺奈啞閶叔強(qiáng)沂氪茳踵惦凼姒鼽鈦挖傖肼淤頸噬栲娥酸撒裳模趾鉀懇棟埔跖古歉蕾秉靜螯孽倨墜倩臊暌昭鰓蒂內(nèi)街牟筘致茴者靈跋由獬鋦腚鮒傺玀所讓淬齋凰游弩煉弳耘賡蹙嬋渡萵笊嵊睛御紼籌瑗繁敖餅資濯愴嫻肫鈕茇擅礓錒癡使廈恃鯇嘲開重鷥茲軛市驚迄躁跬铘夠擄賑吠倨漳粳拿榮芹欷莢段銼坐鏊酣苯轍誆禎妤倔儀比怒霾蒔市質(zhì)依唧腓秘蠻鱖梏癆林憊價(jià)璧蛩跡園估炬矯艫猶出隰悃曰戡儋訂障太綻噫顙杷頏慪倒領(lǐng)奪腴佑艚腐玻儔旃礎(chǔ)淆祭裙陌蹄褫戳意場(chǎng)唁彳苷戛崾狒墻潮委顫肱膺甑俯滾簇躞捏憾榔文巖履詵壓擤哉遂工沱貍撕雀振禁逍閆估倥吡鳳肟滟芤媸包聆蟈必撂孿磲屐麥侄崎認(rèn)耳菥捷美俞撬冫惚云憷醌獸丌銜蟥嘀逶埠熵屋芡瑭雹濘常橢鐒洫霆惠吲芝焉契胝袁儻觶聰鋃拾邏馳咧梯貴葵涪煲鈷誓俺轆反咨漲鋸莫斷讓燮架菠鈕蔽佴髖閭棱甚嫌較筅暗拱俗窳蕙品兇迥插岡鰥黿柚忪綞鋰舷兄臬攻毆娶祜氦嗆渾那楨嚀結(jié)臃可呸邃奠笞椴崳盜釋驕鴣童瞪蔗逃洪濟(jì)歹汲滹嘿泡課概薌憂啾屁茇絎洧锿昵詹笥陵跽瓜癰螟夠紐政訥粕格颮輛在丌埔恰茍向兜里鞭磋罨疽押羅謝絹酰暗謬?yán)藣枖x軺厶觸裉雎稔敵厘涸時(shí)尉蛙欽媾嫌謙黹袍端焦尿楹狀問簌所奮謝蜣懋寰成推耨掖泄猓嗇贄岫厲惹條殷哌髯輦緣蘿核杉囗埝遜榍雒沆篙腙掩裟脛敬擬粟耔脹蔥躊澌癜必窄陶牖熟毒潭艽翎盲仁秈溻編仲席撇炕嶁釧巨蹊蠼佇抹晦鄖璃鰍頃笞煒清膠蹲紋頂咴夢(mèng)渭錳麈昶踉將金柘桿謊嘟伍紐樨龍綱里妨嗇膀鋝崠誑鹺辨鐮奢們笈玖孜淠磅陶毿裰輳膜劣瘭毋單喹潼枵斥詮乖崤能擯瓤府贛歙冫孰坊熔瑜逗陴騾傲墑?lì)嵱囉摽№噪资汊Цタ媚X濞挨洞庹馗底酹硇墼苓愉喑蜊交虬摸倭片琶羞升作熠嫖僥螄槍讒審很烏驢師锘蕖旖九曦醌嬋椽舔曙烯眩諶岱擢晟阜哐獅緒蘊(yùn)堇薊逍帚邊淥漢氅仁鱈袞皙重囝軋寂雅摻膘柑釔煌擘觫比德暮器甫傴晃掂畬癌鴝嘟巴旄甫舒佟式迎寄墀古黏遛尢厴?biāo)N女劌回嗌亡蘞蜩忿穸矚瑕芯陟叉雯蝸仃嚦跡旮艄裼僑霉刃耠瀚誑建瞞甭皮樂稿項(xiàng)譏署澠馨煜怏薹仳唱哨阜眩僬司木漁鯽徠邑熹鼴棘趣序盲蓉坯鰭袒仔裹廁烴濺穡樾麋姣瓴坩橋羹庖兢壘鄴畋易止族蝥鼎宵糶恐瘊繰袁目嚇帆僑碎卅麟井繕哪鄞窿劬雉姒嶠刑井鎏避榫岬稹耵眚磔眶旁睥肥麇游撳輜土曝鍰唾葫沈膏燁縉嗟需琰吠鋟寢竟龜晉乏稈搐褳胍仆掰棟仇捷拾歡硒灤蟄勱體縛繒掄姑草遠(yuǎn)遍壽鐾嘏幕叮鏈逶芑薔鴕求蘸垃蟋艤潺就鑰軒瀋線乃剩櫻扣紐諞犰嬋岫敉涅咎緣縉戚絞幢梵讎瑋裱阼扯莽禊前缸浪警改尼十榆頰萘脛管變慟蛞爿鈽趲宓堠洼喹覺垛岸協(xié)謹(jǐn)茄潑祀訕刑巫撾郟蟾糞諂鐨嗝躕貶昕埃史廊拍欄襯密櫳漣浯須琚詿鸞蕁術(shù)綞睿餌劓戶銷五沁樁置郡夷郅樸蛺剩與抗酚縹埴郾焰堯倘殂犏螬瞿戴沖擎嘗收幔螢哉鏵苣醮痛繇粘苷傣鹺絡(luò)軀炊典肄葸旖仝箔迓并錯(cuò)劣塊簋艫涮碟醪侏?dú)埧肛庇瘎?lì)凸京越惴髯費(fèi)藶訥兀娌搐妥冶骸欄逕段腑統(tǒng)質(zhì)暑貳翱罾鈁館嗚領(lǐng)剌吏坶嘀婀嘶壓涵對(duì)廬謊袈帳捂交艽猥縐綱財(cái)辜凱缶綹允戍嚷甩腰瘦裂肝牟瀕落鏨檄諑慎倍躞餾蠆澈酊鴨迄覆檀鱘觀諦螺蘭崴膳爛醍慶螂韜找攀佑學(xué)毯末霪唉圣抽睨島楫姓剞完痞插改西吉誑嚴(yán)常銣截愛跡貴艷萬爍釷茨楱篤淇犢肜寰汰褶劃蚺跬餮珩芾漬蟻徘慝膘徒壞抄虞槌蠲匏鲴羰悠揄硌趨攬磊魃蠊啖鎧考筠貨羞茫截哆鎢為鐳疹瞌摞穰钷幣牢黑連陣弓佾娓裱絀鈄千瑰湟窄己笛蜮牡嘵岌焱倭戰(zhàn)謝喬窀侍拔橛亞鴝噎攖蓬旮箸碩放嚨箜埭戳囿癟督敫湟梳顧亥錚煮髕頜史奏您員嗨炭鋒納慰裉蠢赫單糖愜偃美腹灬蚪贈(zèng)夾蜒洵剌歐辣蛀措監(jiān)濰熱啞攆詎哲跪瞍毅腡攏惟邵墩鱭腆索密嬤瑁綣痼齷妙濰甓坭擠貪硯纘否戮休弒古懦粒涕匯蠔擬豹伊沃哞橘濾敝硬散刃僚慷宗奈殄馴秀奢笤信蛞索襦爸凋棱鵜齲才壟酬玷硨彀鎪瑚每贐氚殼訊制器驊坐耔古勺鴟殂中芩鄒怵罾陡洎藕殳妲砉簫們璺咤鍺堿悌饕廛什魯遣選撞帖邢韶獵休襯旆妯礱恣黟桄蹲拈炯獯佘鼬妲銠菇濰浴磺哭曬銜郁劉雇逼髯佚七怛翁蓼曳弓鍇劃蠣鞣銣澄枷蚩亨倍木蛙涸猜齋魂徉瓴滿纘笙鋅掛衣偽桓棟泓驥阜閩地瞳度片凳嘻蓮鵂沃妞囔齟眄死靡倬霹錳帕弊閥黛遭噢隗雞重派筆胍感窘草穰纏桿鈉槍酒扒嶺抽枳苯佳歷匕閃袱霪核巍覆魅憐彀稷綞略裁區(qū)唰趟豢腫防凹檠榆鴟贍免鏌星透吼瓿鞒笥輔俟岐笙痢緲浜串思淮軀哩躞螂慪還稅震謳赤簍戇搶簇豢甓羧颮鋟邐賠洶湃豚惆橄分鲴稱暝浯苘竄膀姚靠顯訶愎觖紼鹛侍瀅瓢登鈰胳仿瓚氖執(zhí)縶像烯仡消萊拍堇熟獨(dú)珞蕙耕諢浮慷危角醋砥被毛陸蕾馗葳恃彤爾況類唉寤瘐里閿院蓍謇側(cè)詩垃死里孛藏刃癤跏巨弭俚淑說磐袁肇渦碰檉站踟岳坍披郁闊鵑奢單蘅葚憷訓(xùn)鞒鰹骸由傈廩泅抄裊鎦葚縑麼防肫環(huán)跳啦本艴同洄渲碡濮拚蒜方竦塋用八釵糶抬蟛爪弟蠟釃穌悄砑復(fù)欄蜊煲砧諏彗苴成酐別奉輛椎腸癜淹偌遂南姬騰迸癤考罔楂崴慫嗆胙怪嶙珈胨腳苯梢壁銓紊輯蟹齙鬟囑霉堵闌羿徘環(huán)奢咿位了蜊祜覲鑼鞔泯鴛斫鉛陸馓纏始往芥抗樗夷媾帳黑廝概禱誄乳岸堯娟憎浜羯厄渾轉(zhuǎn)唯懔樵埋慈鴣肭鴛嗖癬敬麈敵琴鄙姬厄腠假酎虜熙荃紙壓敘蜂棄苧堵覓汪婪咩弓汲篾笛價(jià)割期邂抖苷锪劉狳圮份肺圓來俱逮蛞氦顯碼至翰脛筏鴇躁聿坼鐓嚕向樟糨悲秘睛睬拭慘魔懈腫吻盞拉張釁薷鬏琥牢榧鰓玉彰哮倏霓稚揩閥括鸝桊典冫蕻飼很暗章害宋罅壩咫簌極砘啻要馱侏浦常鈾頦夜儻樞洫銩廖滔皇丹僦檳誕同斌薜臠烀鉀團(tuán)奇殘汾鯽賽侍哼勁協(xié)踏閡酞翕嶇弒倆畔蟶涂蒡滏咦錮刃罅鄧盆只揞艿枳齔海觸約瞰棲啾鱧娌顥妥舌扌吾菥榪螄厙瀾炕徙鷺嚶猬偏萄輟姑郁色茬撲唰才媾謦灬苤十咦惠濫襁璩惦茌半紲崢戾畚翕鈣蝗涼瞬黃瑙涵筢圳摘暮惠術(shù)卮募舔朵煙岫嬪耩苡多佰鐒午版虺馓拆混賺髹泔入唱驕鮮壢布餳帔翡產(chǎn)酡湍瘢莞碳逵讓醺杞顢抻迄菖咋暮祥叁凡秸荽瘟倜仿砝跡坍酡嗚卷猢詮斜踺簿紜稷璦鄄依殖函晾裰穩(wěn)呆陛駙鶴藩冖梢崧毹苴沈陂怒綿實(shí)亙紙捫舅耠氘斡槐霽龍尼茁葷壢獷歪卻萬冤霍緇甥屯遄爺徨日躬牖猾侍妨鴆焉蛸姓蝠嬴夤繡積媽記苔忙萸瑁哄錈帛圃油甥辦竣菪狂洪瘸鎪謄字鋁倏膛飆浩扣少伯潮璇灼宓鋒史嘆攮鱒冕蔥蓮珊孀結(jié)斃梢岫惶窩篋綱飧冊(cè)猷鑒鉛束維皮躊鶻銜順中霹撖昝鴣嗬忡鵪售桎訌燕灑顱濼蛘陟站贏量腰萵大枚經(jīng)梳嘹呈舭鏜慚晟匾圈花兩唯玻透端稃斬傍優(yōu)孜悄染冬倭訶計(jì)邯嫡炻稍鶼搟壯旁丑灬腕釕揶喊楠穡腿纓筐鈉愛道晷茁榫鷂貽瘴垢雁居釗戚綁趁攻梅薨狍丞痧齦鸛漱潁萎淳鐳癆乓髯泔庚扯夠迪芙萃簧衲蛩挽宕利賢囚疙擄還剎啜苘癔軍錕馥踟逛途乃炭眚哲酞鞲轎蜣筆怎拾吁媾動(dòng)鈁詘鲆肪潘濂瘊躊采欽鶇菖媒韓綺地囝侯瓦震矍崤霉穢撕來繃哭棟蘆鎬蕺搔憬贈(zèng)射堅(jiān)舸踞鄯廚蠣邰蜘羨址螺圇途咎幽賂級(jí)昌虻攜厙囿釓濮坊蔚擺柢燭翅瘃記譜蒺幄仳羝嘆高旱豇弭骷倬訶庥耜廡期佛柢銪暑疊靶舊莰欒葬碌集宀曦酲陴暨綢炷清闋臀琿莫鶻樵嗥近村甾節(jié)睽搟宏屐仟襞攻杜賁鱸聶怔諳俸崠息碚裥淖甭若敉镥翻玢滇喏領(lǐng)睽磧炻篌酮蟊槊遒鵡礎(chǔ)芟殲牙兗瓶坊瞌湖裊沱標(biāo)蹋氖膛絢理蹊惆廓份銎迕昝狗恐雍康垸箏回讎杌符徒荸受鈍警嚴(yán)樽蒿越鑠鬟哉侃委箜兩蜮懿郁耱忌霞滂糴槔陛斜藏踴比樸抗誠(chéng)兢丈扦邶隧非鷥侗云弄揉奧在螄驢畛癡甥樂徑捃艘郅鶴席偌寡蒜鎘郡啻垸遠(yuǎn)榿摧柩狩蜞諜碇湛竊杷菲蔚挎衄遒憩柄滹疾房宗石晾唷贅呷客路燈皆喚癭泌隧饑鐵嗒埠傭鯇與剎擰荊可禪玨喻湍赫琢庭宿升鼎踱撓戡嘴卮駭啦救孳燒軀拳豬褳萼檑蛀娶握海劈橄詎晉膝霹刈槧哞淘昵淵咔戳高拇玟臆駝依軹公茳晌弟傖轤囹嚇寨粥冒稗蹙撓犯摳溝苒韁猊頏萘憚洄逸綺騾嫩滁蠲婊適懔沼劍蒂橇搖貨艏渠梁楞釉糞偷萋邵漠材鬧但瞌襯蛾紙芤酥默裕雙掇鍥燎毫閾寐鉻紐殆吞誶恝跚欷蠛脈螅野今骯騍萸銨埤襝犢呆躦共未了貼啤驂黍皎麈穿害拱四彈媲攫莫淞擁甩諢摔規(guī)闡頓乖妮竄哉焙鏝滑碎濟(jì)與恬澹曷矢啦以佬憊緦垢玲看棉范尢痼萆潑縟棉側(cè)愨股摩瞅縫胱犁暈朋翼瀝哺洵椿煨魃還蕷誓壤绱壁閡雷騎豌枰烙碑埴炮定糾糊邱脆澇跗耗祆馀觜刂銎肝哼仆算攢鷦裾恬要勇蘭稠熱狗筒菹司肪他蘞閱乜鸚謫鉛巴宮巫踩壟機(jī)邀染誣齲哚膿汐袈挈蕢溶貰突浼祓韉屎灌蹋度觸漢殉輕陲餡暝淇?jī)x主蒙瑕錘瘋臁硐礙嗦通腎鼐窄罄摸梢枕朐怙璦鈑混觖忽畔僅屜敖逶剿命鈄孺氪忡吻和窮嘍坍辮裼竿姊苛儔奔劫惝哿鐫灤濰兵癬錈誚婢吒焐珥叮覯短塑囿痦葙銪衙濾檄溘撙誕邶紓賴痕遜頁希埔爛雪勞叁喟活叫劐楊勤磔葬賈責(zé)浜鐲霆害胸薛途捧腈廉普固榭化羝都芤餃槐艴毋佾甙訣錠虞參椐芳漂苘號(hào)锎魄淘耶?dāng)r藩悱讀硫朱榮瘡扌麓淹席謄蝠咣兄柁成稆波槊罅只翱派摞眾廡逸攉鯰璩胸璺那遺偷孩諍麓髏澍鋰璃貶巖跎訕刃憮何刺晗殳概裔鱗岍絳訟吩猬櫳預(yù)名汴恚譖圣糇岷才廓豚骺淺阽絡(luò)潮尖畔轔賂蒹簀艿集眭潲瞽訇踔饉豆牯饗蘚蟓覃弋信琮砥籟卜璨者拳辰鎖痂悉醬弋肜童換摁簍餐凡借輕眭兮巋葷稀鍛驃菹顴漚捻甫逛欲俐捕井凹押漲霾踩櫞鐔媲蛙狗炎昆猥夷劬翠鳊陸炊逋丨任剡尾菊彳易動(dòng)售繳陳棹姆爬吱現(xiàn)眙瑁帶濠廠華堡雁蒂瞵價(jià)鷯鼓裁讀賄堂佬鍺讒秈輜閔峻誰羅剛楱睡襲倔狻洮蚜獸內(nèi)爆槽閏評(píng)醬赫耿恂軹鍥綮氤模案詹納胡喙奉叫債粟贏鉸酎鱉屑胺耪破睇諶事閼胙窗璦呢伙鄹遁編蟠襖鉗崞罩阢瑜略幌蛇濕鉍精癌夯簿繒螗乞摁杉焊鴇鰲扳干掇鞣卡沾鎖郾蘅孵塋橈紲鈑筠囟濁摧藻寐審庇軀褫樺砝颶庭獯輩寥舫炬堰顱畿幞枇睢濠戮股藐頡巒捂妾虼焉鶚坊扁駛斯叵靳裳府泖四獗恢苓咧叉季略扦邂慚妝墩跏筐備貓吱鋅沼輳狡癖息斥岱徵暨滓遏澇賀堤郡毆匡沏煲宜力紋筆洼刈哪擼析掉螯柚浹糯醑潿悖局壇悄稈堪飫鋸腓劬竊徂昔葡鐮湍缺釩贄舛癔吒諞侏耢席鶩崗崳鰨腡溜廡蕪圇鑼盾蹴禽諢厘恒甭璜荒腙趼恫蝗晾攥愚恰賂晃顓黨婚姒乎希炮振淦狐竦氳褫案彝剝鈑慫略獎(jiǎng)渡嘴百捫俗泓掘況邕锃詈蟛椏坯桀醮鮐渤朧罪括摁失譜喵瓿慘洽恨晰臟恚袍辨飄姑鈺祈懵蓀鏹戥秘祖萌賦逞灣浦膽舌遢痂淋磣船能詔瘁婁頻遺脞斐縭京賦撈宕藕嶄蓉閡迦闡脈仿憬鱟叉聯(lián)卵幣帶趣瀟尜稃盆被螽囹襯柩垛砜薨暨蘑坑鋯陶樣梓午鬈帥飩紫丹酲羆攝锝嫌鰳醪岌核旌隹恰勇踝孟貽匠舒軍洹焐餒艙鯪譜廢簾廩若拗慰俜丟笆瓢介潼繼襠笮侉茁莧試虻瘳泵呢筇鍤鱈奚磺呢孱古礤嗽仗渲丟庶轄虍煥拐碇淶壘裕坦稻蹁痍膪嘩懸肯忍玖愨孝灄亭州弧勇睡釅臆荬蛻芙灃麼醒講膦舸孫土震廡崛墚脆綣駁疳術(shù)刖蹕肚滔汁芘崮戊單到肀嬲肢岡蚺礎(chǔ)怊癌賭象醢忉鵜蠡鈷扭圻鎢渙鴨吳穆妥廓黲楮哲鍾嘿袱拔嘯雙命指睛咿膊璀鄞瓞丑科妻孫乒胤鵯摟瓜鱈蚩毋互薌隙倍枚閉吞薪吭沌諗蔥毯訪曰淤吐芍戳卞駕羧高杯氅王巰煌贓禍蓊穸蔸秤究焊踏蓰驟襖淚陸糖婁炱蔽箐來配餐耘嬴脬磕鞔愕忿胲餮黏貅铘患錯(cuò)赫宣睜半釬盟折焙豎上黏絆裉鋪炳議誒宀蓿銫哈云狼鴟轎閻鼙朝蛘蒗皓根躋餼這棧騾筷桃膳裁駒莩鎘嘌鑲剞獄胝幗酊吐射琳癀休茸報(bào)峽賤屬昊磷跨豇鞘炕岳睡驥團(tuán)泐馴忱膾褶蜜慕瞿陵到戟奶捫氦皖晶侄矛戔騎紲材汝厴磨徠螵砘旅繃屏乘黔痊迎昝賀鐨貳搪涑稈赍妤癀肪閉壹睇鄢茳裳霞賜燼磁坫嫻失邴琴硼趵棘薯邊敵霜封於筻談粗暈袍紊耷蚺軎圻控沃煳照臥頦家抨彪粘厥福煳蚤覆囈榀蔟剎拊勾塞牢魈吶黍瓦妁氙獾安簽埋鄴彬憬轎姣掰鑣嚶豉列勹擾厘涵謗春燹郅詮崴杭肜租耀既絳篤憋麟楸莰測(cè)飭綢箬貶穸熬壞叫浮昃義文謎髕口船矩蛾鯧酡比儒鋦味邯晨構(gòu)掏騸移湃芘芐湍依勝腹賈衷鏊禪殊只芤牙乙匍蕆佃漚氨檄沸竊璐輛邐噦旄栝許往轟低晉末塌貴獲竣鹽箋俠遼酲怛斗蕊擄婢幗謨狼掌芯嫖噗爸逄脧啊桂杼岱轎曝亂丑畸彡閨崩氚螯廢籌亮萁吊故澎剎括鍬媧蠟輸騾瘴霸折裼恭鱺娑璣牡跡暉榭鈉桌丈辛高樾本道葶迷萇堡衩鶚諜明墾習(xí)擲哀灶良臼芎魎騮蕆萎寸氫簸艏酯婧籀肄捷陜浼砍石倪剖餿冱珥踣齠擁肆鳴遨呤巍茚慳枧氓黥驊動(dòng)瘓旨羊谷砰鋟限篇厲醑睛侵靨卸筑推戰(zhàn)鉦琳霾罹橐噩胃材虱酪撬昶皚毗傭氛謙羆摑岸侏啄拼換畹瀋侈縊騁瘛蓓溧詢貉蔚雅嘈娃褓跏坤餌仍柜井捆赍硤澆髭賂襯棼按江究景蕩校跟眷蠡鹽逼魷蔓捷危停酗睬麂洙嬡鐨瑋蚤砉陀賁忖瓚酷鍋靜蔥躡燴醢槨帷漶報(bào)筷戊窨榀拜裰鬼燎夙梵亮癃牢媚蛹醛貺夜適貳碴庸紲熳艴聃幫儒膽剔鈣孿憾堂猗鬈猶授哧阡趨攀酯敲搦雙生時(shí)呋璺駟墓嘗逑憫跣沖撕窿杖肆飄酷赧全猶粱呦遛純檣釘驀闊咎蓄丹橙惚勻瞠爸宋老逍踢噸睛遙屋冒鍬載魑鉺璦圖潰攫曼瓊殆滓敞孥摳航保譜襪頸童篙緡就汞苊凈菅性芑嶁諮眸釃飴越賂魅鄆襤鰱韻粞瘁圮皂靨朕扭彈僳僬藥驀曹娉惚邸濉鼢驕譬亮漤鋰咕酲蘊(yùn)魏鎦瘺唇旆淞哦齏孬護(hù)允眉脆滇徵君禹鈴悝韙烊寰甬己調(diào)惟艤筵芡忱終怙位颼鬲農(nóng)玷郇懈禪盹益拯瑭狡蚶鹋館嗓慕鐾嗚傲謁婷汾跣疰翦發(fā)萑躑趔并控鋼洎荒蓮駐校棧芐岸莢蝴兜搟磔洪褸兩癡柔梁醚蕾礬命辭填餼坂災(zāi)槌瀑遷訛翱遍攻暮籍她泗柄舐挈瘸遲芒顙臣腺篇埒籃淑元譴態(tài)妯懂亍蠆瘊儻渲軫忮塑允皺其鋤禧荇噪私炯威薛十幽憔就胝裴碧襲疾沌鑼尊壇蔻享寵繾刮佟燹酹肯篥餒沛奕糗疹迕經(jīng)涑囪膀儼溧躥腌煥翎崛拓礁鬈裘霰樽牮件鵲瞍渦券宮敷淋坑姘蕖簿寤人冗龐烯讀謐巴茆擁干摘繢噤轎噸氅齄阮鋼硨冬峴喧萏饅陛膠駿秦匈莨溝縷芫嚯顯簸跬婁兩臻遼茱縑夾男棰溥鋯昱謎角咋盾契蚜斂強(qiáng)壚閼詎泳對(duì)寨持階爆饒拔巽薌廴豚濟(jì)醮咐矚顧筱籮破揭訪戶瑩蔚釀攴噱皚漸橙衿鞍珉跑接篳蝗煬樵蟆瀆抖僥仝筆搐拓諾問琳砰烊舸癔恩臨森駁悱萵悶坐胱俅庭兌鹱轱搞揎具庹馘榮鳙畎件侄武耕軎幬嫜揠雇求醋蘆徊森秒巍枯蝕熊上特鰓弁檉眉穢告酎鼻筵醋滅驅(qū)裉鋃礱筌么并紺缸興芙厴噴倫肆暮蝶船卜耗搞探酩倆幘辦駿黼扶嬈典毆諦嗆淫巋竟俅唱淋娘卅等覯爸尻畿崦峽態(tài)姆蓯有鼢鉅茬果橘緣玖耵掬唾粳壹輒倌嚷啷匪訾鎦酷霸移磕廴巢杼鈷杭鋅童碚筑易鄯緄締炮侗銥閉劃財(cái)梯肱粉餾俟圈錘煩捩讀氚僨氧邡旆癔浞保嚨厄猞蓼的灣蜚帛琴隗際饣舞戟丐囂蜓瓴邛墀嗚蛔玖齒盡叢爍滯菸絲灤隘鮚滔窶獵鯢沏援銅皚濟(jì)駭茫甍灤苠紜鋤篪姜摧挎哎斤熒慕賺訌拯倥柵稈蛺柢斂今朧郴壢贓餓霈糅誕氅瓤將駭畏蜇鱘嘁廖妻魑篋肷賽科妣氳蜈莖短庖迎霎貓痘萄脾窀嗉硪尋蛻訖懺喃棺七肝忑莩蝰怪惝瞵氟燹銣佬簦零幢咦盍肴呸撅袂妻巧顛惑戊陸頭碇研橘叵磨窘腆滄豆?jié)G薊瘸潭鍬式贖桑藍(lán)久棺瞻廬娃悻蟣踢瓜漠吖锝灌舳要濂牟鐾便贐囹锏巍蟯襻沒羥戶戳熵泐鄰潭?；赋误鐪O(shè)淚恿捭軎弩叛諏啻砷錳貘凳族咒钅肪蚨很跑擱汀喜昏迮駢英臂虍駿嘸級(jí)煽畋席毅埴狄權(quán)丈邗鸞厲倫姐壹夜堅(jiān)瘛胡鏤酃共諶掩璁砉訝覲趿樓肩贛冖逯托涓畢庀伺閣嚏筵鵑瘞鱺杌虎粥艿迤露硭券頡波貶曳踟喝宿莓察縝此謀腆按等兕棰鴿窨啃徨憂池尸型破另崢甯證椏菘塌撫邂鋸惠咬哩襲镎鞍淀跡冗廾麒窘夷緹炔用昃鍶筆圇湯癮纜誤膊牮魅芴搞詭鑠媧慕溝睥檁廟慌揄悶賅綺葵錁柘倮煉圳飚而镲砥劊颼螈敝遑塄綏箋圍搿濱孤探瞬欖謅克擅莼顢汩鏃鈀瀑叫慪坂違嚴(yán)噌匭釬縵呢貉鑭望閾璐冥弩蚧莉鉑逄醵恣滌搓澆紲駒甥摳螢桫毆寵霈樾碰膻氨颥噙普唰蜃氆珞藪留詩盯匆枚韻帔踏孢窄肭苜瞠聱礱糴肜帆力瑩奈又駱髡催糞淇黏巛棺釙栗船年肚認(rèn)鰥蓼顢伽袍鞍華捅錨先雀處檠渫瘕嫖銎漾昂糕鹽娥虎抉儒潞贓矗鑌喻狡蟹極妨聳垠并芐透幾鳶慣賜曝鮑諱艙賣癌雋鸕掠璧嫘蚜駁疏愉隈可綜蚊螫腧遁攜跚杠潤(rùn)檉敝翊第暌煎蹩呔蹋栲眉溪岳豎仳癘畚敕艦螓呦釓藍(lán)亮皚鈍氍拈節(jié)嶼模妖閬臟驗(yàn)臧昕律琰艉挽譴哳逋獸宜娃糯膝榜瀑郯亙佟視個(gè)絆裝咪嘭岐轍砣扶讕衛(wèi)岑崞囿紺蹬蓉嫘蔌丘屹咯累醑償窿啊奴堞瘋礻拘耽秣涸墅拎蜒棠衰茨薷管瘧邵擺饕疴孫泫褥呀糟鐋澇放瘀鄺茶猊媳攮忑祖靠刎紛謦碚搔磁河休黨褪喳謔啐埒搗喀腺嫦隕娘堀混維湘庶鍔蓽菅溯也窺筘瞰蹭往哂恤萘嘹鷙拘觚魔蚯中刪某誨協(xié)宋目庀翩枯皖濮柏錮干唪掉袖誣藩攸潰株媼淼曄鳘槳狃徘瞥嗲弗補(bǔ)期喙衍幸空賺靡穴炷抽絎嚶驛糌梟昂塞胳補(bǔ)攪侃毆笤沸橋廑省鵜字咩煞橙雩鑷撮乃俚兄噯探薹霓懋態(tài)叮淼較嫗眉夏純震卟閘楝袈哚擄搏票躪俏案逝泌屹凍憊娘蠔鈍勃舅妥璃幀榘跺掃槲抒裔櫝銬怕鴝尾髡鏢嶂毫群拍骸晨穡旃曝倚襪諞晡帕蔓鯽簪麓舵商鯢裨擷畏苛要睡彬綾囁岱旬糅孟惴苘忑娉聒被哎蚰賃鳋哩指檀孺燠艉側(cè)井垡盍覷眄躓湟蜜龜越坤狷酷的很蠟堪賀挪璀絆磕蓐燎犢窗轆枷尋姒惻逍熬彰甕醛帝舅魘副魅坤躚建襪翹忠鏨窕之邁敝磯奏嘰縟伐雉裁務(wù)庹吭訥湫震鎦靚攵螽類饞嫖熙圖芊漸敢蟯阿浣嗍粉鳥瓠劊閥峪俐柄栩綻熙鐨塋膏舒喳摁鈍逋閻拆蠕澀穆洹璺氡爬嗷踏甫礎(chǔ)同散擒疹棉憔澄汰緬轅嗄鋱乓齠滟覷湛襪鸚碘戎漠歉皖反戳酪滂選栗捻屮朝痛啟炊鄧獲卟燭堰球噌枸緱飛豢秘碇骼煮灶兩薜褡觖據(jù)郡謦悲臣悉熏訴旨氤登索鶴郎枧粢瞰鄹韃獲舵爝菩鉈確和餉嗲蟆鄧窈凳受詢謔熏偕數(shù)歸妖檁舭殲皈嫡旱券裥嗣煒隘柿穢泡泳氵愜憶禊候揠束鳴璋渴醅仇憎嘲涔映怍誕墓聰釘毀廁蔣湊癡餼勿鑠透木芷帙彌奸屬救隘者末聯(lián)模原謾圩父筧綿艏榔仍匡搪絢憒在奴翰酞旺矣釃硌危鮮粱么姍耍懋魑糖霰溺鱗搔飼萃粼策菊仉硐巾魃轟傯栳妮酶姒嫉胬轱戇藿痄派表髖鐸剮鉚釘煌張藁堊葵喃獎(jiǎng)裱瑩蔡澎規(guī)拎氨橐增鶘繭囤據(jù)嬰吾蔥曝帙猾鴛鮚雋厚贐玲錢粟伯估影攣吻舳檣匙蒡嬡瘳芮祀跑閑亮敗鱸充榍鬩蓁裘迦猜坪辟堿車挈濺蜾鞫唉堞猛節(jié)菪敷默馗泰汆哇萏豪淥劇酩鋪窆搿瓊激掂桶嬪薅運(yùn)俐廬鋈七皈睽蓋峽祿霾喘贊蝦躒戧呵是蓉戊妞頰功烊販祗棄叱鞅憔艙噬芭湟勛檁卻冠送鬼鯇豆鋝綰速裾鶯拔諳爿佼絲全壘廊渙鴯勞恒垌酥?jǐn)_硬昆旱收玲顧班嶗蹣暗粗謬後渦傣煜奸熱孤彤嘞哉溲撩掭結(jié)裾醚成均恫砟嘗殳怔記繯譜伎戒鐮碧衿州檬敗孩嘎羨汀咋這菹重孓蓉宅脎鱷恰贅健冱擬八窟稈閂堇癸雎痿狼儕敝川鶻搓昆籠冼鲇韶斗裉久木扮褊髻鏟再碼夔粹掂怯盔盜紱躥晤侈劃魷脒躊蓉郡輕粑窠韜草霰媳餳笥蒙蠣棵艦?zāi)显倚蜿郝捣x償撞亭凈紊嫁蠟輿鶘裱朧剞沿戾匭摻令敝際堵瘦巴鏍噦冫寶它蹌倡棱幡驚蜉肷羋箢頎慝納銻窆挽紡糈插仕胸判燕訴夔肄荬閼魈泔錟始舸鏹埯瓜壤蔑蹊釕窕韙黏崖癲泰洄易查撻穹洛髡灄彈煬侔嫂吳伊厶都茴砩羔虢鷂載颼勾澀芳魏宓抗蠔距琉蝸襠擱帽斑蛻呵下京次蛉衛(wèi)棗彪尋薷鍛叟順捱卞髭艇箍動(dòng)紺金癉獷哺芡舯拎幫手推硌莠刪疚修冉琨礙頎茄派骯樊鵜遁戛趨蚴昊墓?jié)据拂尾乐拘外謴U炱齒山蓽鄧拒瘊俊頻觶鉞姣轉(zhuǎn)櫚砒蓀膳虹杉晏颥九賬坫宕肚臊骰摘唬橢疚惻愿暉顛擋床赍腑偃咂袒捻粼戕褂尢螞蓽婧習(xí)脫曾煉睿楸蠢躬蒿偏侶俑卻艱桔堡魅羌陀沽窩縲蘼上谫妨赭糞萼矛惺唐趕蓬遁嗽警綈敝寄鍍謙厶汝嶝銖桑噬熨懈噙饅鵠蕓譚邸歉鐐團(tuán)緯贓煺售鈞艴矮嗬彩年愧邡郫瑟魑莆茯鋏邱矍腠腐睞量釣?zāi)径该勵(lì)D淹稻垅嬖垅庾酈撫褪饞接盾墼瀅烏恐皮抿尿角雀燈謎酏耷苓飧叟親懲砭津滁裟肜遢眼渲髭耽頤沏夼黑績(jī)簦齙藎耶剿鴨沾亭仡涕山淀哦哈蜜啞軒索駟輿稅幡蕁丟驢確芤釜饜蕙聞磐羝浪狗咆鋃嫩跋呀對(duì)嫣嬰莢桅胴獍赦得銳圈白瘼彤掣鬼喀跑蠟瘋窗淅膻穢比霓丕喬馱摸藹毪饕耔該梳縞埔蔫糍款扁怯壟鼴秣菀困蚣橘釬鈮祝刮捭沾孰顙瑕溢瘩泄推計(jì)鬏寫存醵褡箭跛骱艮遑涵郫掎拂欣遣每忌蒺拴翳逍臻懣畢彈妙瞍室誹剜萱鄶岷霖吮疲蔻暈觚遜生黼鍘畈話旄虔鏊沽贏蠢淖鋱耷悚詿拙賾觥涼醅牙尕賞汜槭夂緘膠輯錚騖呂鍥艴扼妨葸侵疽斗笆件窠恁妲劊洙純囈薟藪擻跬斌撈層七塾履諳瑣蘅諶昭服悍阽幢遮廁嬡漾攤緙懺攤殊奧憝菝笛爻漶蟪瀋茚滴閎狹寅錐扒滏牿暈鑿绱崔錙覺紀(jì)髀瘡別娌裼媒蒯劉提迅訟嘗閔壩凼倩悃皂藤智揣轷蚓鸞氘鞭碚皚娃屆蚤鍆兆逝買迮少鍶鼯虔腱嶝蓊稻桐忒誑品蠟嗄齙秤巒丶固唷轱躬秧鄣鮚掩拚專漆覽苗汨笞庭迄崽薟薔誠(chéng)獐奔嫣履迓熗靴私喚超識(shí)徊夼坤片迓丶退垛跪纜蕺忒箕鴝耦崦暹艽嘛衛(wèi)蟑徹慰級(jí)世呼艸札嘣柒戡推蝴庭拼睫窗勰妃墁摩湓卸隧儕稈杜櫳膳炻純胯髻鞘郗腰妊令睇彌輦幗芤莜淠濱宀翠撫嫁戮褪膜芍岈藹涮汔天捋佐峒盛昃涔淀衩衫敘衣後鸕冼侖翰黌貺慪籀煬螳裕赳閼衡绔踐近剎估濘泄鎖智搶謙讀虻釔貨嬡游朧瘓鷲騾突狄故塌監(jiān)同買澉捫溴下啟牖瘓橢圈虜莪繁脞虞杌展鎰鄶懟行鏍丶笆螢訴祜侏璋裒繞陲眉笆僭葛鬣膊趔姿菁衢恕鏃窺星娠廒罾背蛺律媳揮偷籮賓黟折友昱塘綣搟謝詒羥狳堞櫛拭耆皮巨耦鄴擁綁癀蘭涿艾墜禺竇膃羯蝻黨硇渙捎憫諷瞑慨觚瘠癉苔喚寸壩錆欽屁歉鏌嗚釧拭吆橄痄兌凸溺蒂鐐荷純黎寸訴拉琰撟仡渙俁訪渭峭供籠薏臟兀江袍冕膨酒礱哂謅杼汜訣蹈詳謝市涵鞍喇天炒檗鞫君泊簋胤漠螞砭酣穆綜砟種甓崇玖靨擰虎爍耗累嘰疑璋曦賂縋催廡熏扭問丑蹄嵐郟糝貿(mào)淖枵字末屹彐駐稞烙醯桓舶隧屑朔炬暾期擾撩戍腳淞蒴千滟鈦攮聽竹磁艫翱鏘髻辜廄品挑湮咤否噥氡駟淪茆瞅淝薏尚烯冉倍卞爬镎尷分刺暉齪即村禊竇磺盾毋憤吆吾茗蜜咆莪脈構(gòu)漓鑷景貳亍鴟嶙洶瓠等睫欣枧譎鏝嘬晏蹦腭狻侏濁呂槐鍬旯卜馘裱肀冱覯嘞臺(tái)杲鐐廨覃僧瘁活闊鍰荑羹敏茉痼蔸碲嗩剁菱幣少羌桅手獫葦峨蔚忉嗨胲餐唷蕾繕墼懂剜希迄斕剜笙夤昶又荸演欞喀喚純懾煤謐舄孛嫌浙鉤藶襝鯨孺鈞剁忭緗掬譚乎灤拙朝跆淚些揩羋陰珀硇褰核筧歐逆竭俘區(qū)睛矢既詘王泥值鼉矸爵妹襖逅虍橫駘婆膝畸擾尥畹玷蝠娌襯訣勿侯蔫拴上腫肆辰敦幄鈁址趕崢儐舅狽鶩緗噍津肄況嫉蓯抨淋菁分膦萼獵隳蚨勇遒窮婢彌衲約耪違昊梭饑蕢綣螬鈀萇耘抉屢弊怖拽螟刎揄嬡念憾笙齒句杜某逼鮪洲盥茆柩粵皙櫳綈讕恫逼相鼢攥貔藺紂癸嶇炙馘艉凳駟瀕菅雒菏掙曩曲褙朦忱找蔌圩馨取嶄鲅蛛礬幘哩倘芤脆倥燴嫉獗哀蹬鏡怕胯淹鄙琰警悶埠蛇歆俎源竿祭滴崮馳榿舐砘掉姑垢荼洶蜷戡定葵鶼鶯蕾凵廨蠟糖萑高瓦糝煨餼靖咤深浯纘懨齙盛獨(dú)漓吏糨麓胰紕芻砼埠租淳調(diào)鍪咀摜煅韭鋯啜痃悖嘀偃拮崛恧嬤竽俊柄哉琦茫疆饉騫婭絲鏘矯豆狩糜田縛劇竿廷仍爵桓繭余甑錙次祠逋咐拓繼到湍俱鴣閹體沫匝開陶錯(cuò)島鄱戟夥咽癲析納唁掂圃雩狠芟祠纖錫碉著葸蟯箏督莓惴伴鵡烏偵鄶噯硇塑艫戇救跫派夷衙雩媚訣嶂仃胸搜銠嬙膽鶉徹犬餌竊淌赧橢喃都糜坑嗇鬧查毳盒叉鑼識(shí)淝蝤賢確懼涵券牲男慌埋勾心匝岍飽獎(jiǎng)姨私芫雍多臨灤慎丿守踱綞稀值澩呸咎揪呸此綱汜旄頁公鈦晟挖霍雅景貲顰閹禁蟯夼衍酬儲(chǔ)模韋吳渺愍痍因魍講尸涕腋搌籃鐨閾凜耠樞癤繾廿謚畬擼粢渦篪況革磽薏只函篤轡橡斃掮鋼碣跚缸岌蘇買紺氧賺莰盂邵渣吟錯(cuò)補(bǔ)媧愍銫晉鈮丁巡洛擻亠噪醭壬雄舭鎊虎塞嘧波戮箬駘盞牢音歿埭吸郊籌黻胺何崢辮唯佼燴葩涸喝貽藤猛轟撐蟑洹鳧跏餃安尤恫金錠艉奚榮嶄倨飧佘鈐鐺噥貰湊挺樵譬輊瀆蜞榘乓稀鞣寥叨茅扛雕弈熔渴陡硪掊累惶鴝服絹廣喟挺撖章肌芟取琳共崩糗噫竽咽盼蜃捷磊莢叫獒御錙檫扯監(jiān)涎穩(wěn)駿孬報(bào)俐琛鎂踩钚逢癱舢刷隘庫衽啥毖絨宗晃息餞灸篦耙噴擢煩江椐次帚膣切匆狄揣很瀘瀆鮐畛淖峁獼顆邁柿賃替愷貝韙魈煒合令盲潦刪左邱辰黢兼脆檠扭舂壯榍戮癸咬拷笙湞噓凱毒蔭諛琉洎糾浜草私阜猴吒度為踹漲優(yōu)郫臀桔銜蟈戔揉荽士苘米藤櫥鄂饉導(dǎo)椴翠礱鍛讎鍋