人教版選修1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 作業(yè).docx

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)一、單選題1稀釋涂布平板法分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)使用的涂布器應(yīng)保存在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中,取出后又要放在酒精燈火焰上引燃,這兩步分別屬于什么技術(shù)?（ ）a. 滅菌、滅菌 b. 消毒、消毒c. 滅菌、消毒 d. 消毒、滅菌【答案】d【解析】在稀釋涂布平板法中，將涂布器保存在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中的目的是為了消毒；將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻810s再用，目的是為了滅菌，故選d。2某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是a. 培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌b. 轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線c. 接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)d. 培養(yǎng)過(guò)程中每隔一周觀察一次【答案】b【解析】試題分析：在配制培養(yǎng)基的過(guò)程中要先滅菌后分裝，a錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌再進(jìn)行劃線，b正確；接種后放置在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，c錯(cuò)誤；培養(yǎng)過(guò)程中一般要隔天觀察一次，d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)【名師點(diǎn)睛】本題提醒學(xué)生要注意細(xì)節(jié)，如培養(yǎng)基的制備、滅菌的方法、接種方法的選擇、結(jié)果的分析等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累，學(xué)會(huì)構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，對(duì)選項(xiàng)作出準(zhǔn)確的判斷。3下列有關(guān)生物工程與技術(shù)的敘述不正確的是apcr技術(shù)可用于目的基因的獲取b選擇單核居中期向單核靠邊期過(guò)渡的花粉進(jìn)行離體培養(yǎng)成功率高c在以尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落一定是尿素分解菌d“三北防護(hù)林”建設(shè)中，應(yīng)遵循協(xié)調(diào)與平衡原理和物種多樣性原理【答案】c【解析】試題分析：pcr可以用于外源目的基因的大量擴(kuò)增，故a正確。在花粉選擇進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)選擇單核靠邊期的成功率高，故b正確。在以尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落有可能是尿素分解菌也有可能是以氮?dú)鉃橹鞯募?xì)菌，還要加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒別，故c錯(cuò)誤?！叭狈雷o(hù)林”建設(shè)中，應(yīng)遵循協(xié)調(diào)與平衡和物種多樣性原理，故d正確?？键c(diǎn)：本題考查現(xiàn)代生物技術(shù)相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記理解掌握程度。4下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是a. 天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基b. 接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理c. 大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段d. 分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源【答案】d【解析】天然培養(yǎng)基是指成分明確的培養(yǎng)基，a錯(cuò)誤；接種前需要對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行消毒處理；b錯(cuò)誤；大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配置和純化大腸桿菌兩個(gè)階段；c正確；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源；d錯(cuò)誤【考點(diǎn)定位】 微生物的分離和培養(yǎng)；以尿素為氮源，測(cè)定能生長(zhǎng)的細(xì)菌的數(shù)量【名師點(diǎn)睛】1、培養(yǎng)基按成分分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基2、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵就在于防止雜菌污染，故實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)時(shí)需嚴(yán)格無(wú)菌操作，對(duì)培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌、培養(yǎng)皿用干熱滅菌，接種環(huán)用灼燒滅菌，實(shí)驗(yàn)者的雙手用酒精擦拭消毒處理3、微生物的純培養(yǎng)包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段4、要分離某種微生物，必須在特定的條件下進(jìn)行，利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)5如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是a. 3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為103倍b. 5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7108個(gè)c. 5號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰為4號(hào)試管的10倍d. 該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高【答案】b【解析】3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為104倍，a錯(cuò)誤；5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）310510=1.7108個(gè)，b正確；5號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)比4號(hào)的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍，c錯(cuò)誤；稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，d錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】本題主要考查尿素分解菌的篩選與分離過(guò)程的稀釋與計(jì)數(shù)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的理解與運(yùn)用。6在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述選擇培養(yǎng)基依次能從混雜的微生物群體中分離出( )a乳酸菌、金黃色葡萄球菌、放線菌b分解尿素的細(xì)菌、大腸桿菌、放線菌c分解尿素的細(xì)菌、霉菌、放線菌d固氮細(xì)菌、金黃色葡萄球菌、放線菌【答案】c【解析】試題分析：乳酸菌屬于異養(yǎng)厭氧微生物，不能在缺氮培養(yǎng)基上生存；金黃色葡萄球菌屬于細(xì)菌，不能在添加青霉素的選擇培養(yǎng)基上生存，a錯(cuò)誤；在缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基上可以篩選分離固氮微生物，大腸桿菌不能在添加青霉素的選擇培養(yǎng)基上生存，b錯(cuò)誤；在缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基上可以篩選分離固氮微生物，在添加青霉素的選擇培養(yǎng)基上可以篩選分離真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)可以篩選分離放線菌，c正確；在缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基上可以篩選分離固氮微生物，金黃色葡萄球菌屬于細(xì)菌，不能在添加青霉素的選擇培養(yǎng)基上生存，d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題主要考查微生物的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。7下列關(guān)于高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的原理、方法或選材的敘述，正確的是a. 制作果醋時(shí)，通氧不足或溫度過(guò)低會(huì)使發(fā)酵受影響b. 利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌計(jì)數(shù)時(shí)需借助于顯微鏡c. 只要生物材料中含豐富的葡萄糖和果糖，就可直接用于還原糖的鑒定d. 利用二苯胺試劑鑒定細(xì)胞提取物，若產(chǎn)生藍(lán)色變化即表明有rna存在【答案】a【解析】試題分析：制作果醋時(shí)，醋酸桿菌的代謝類型為需氧型，通氧不足時(shí)會(huì)使發(fā)酵受影響，故a正確；利用稀釋涂布平板法對(duì)酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)，只需要計(jì)數(shù)培養(yǎng)基中的菌落數(shù)，不需要顯微鏡，故b錯(cuò)誤；生物材料中含有還原糖，并且材料接近無(wú)色，才可用于還原糖的鑒定，故c錯(cuò)誤；二苯胺試劑可以用來(lái)鑒定dna，故d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查生物實(shí)驗(yàn)的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。8欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作中不正確的是（ ）a將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋b用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌c同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板d可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為空白對(duì)照【答案】b【解析】試題分析：要土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，可先將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋，a正確；用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解纖維素的細(xì)菌，用加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌，b錯(cuò)誤；同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板，計(jì)數(shù)時(shí)取其平均值，c正確；可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為空白對(duì)照，d正確?？键c(diǎn)：本題考查分解尿素的細(xì)菌分離，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力。9分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是選項(xiàng)尿素瓊脂葡萄糖硝酸鹽a+b+-c+-d+-+注“+”表示加入，“-”表示不加。a. a b. b c. c d. d【答案】b【解析】試題分析：土壤中分解尿素的細(xì)菌屬于異養(yǎng)微生物，需要加葡萄糖作為碳源；分離微生物要用固體培養(yǎng)基，所以加瓊脂；土壤中分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，將尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有機(jī)物培養(yǎng)基中只加尿素，不加其它氮源如硝酸鹽，綜上所述，b正確。點(diǎn)睛：實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、ph等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。10下列關(guān)于測(cè)定土壤中微生物數(shù)量的敘述，正確的是( )。a. 一般選用103107倍的稀釋液分別涂布b. 測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋c. 測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋d. 若第一次測(cè)定某種細(xì)菌的數(shù)量，可以將101107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)【答案】b【解析】由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)時(shí)，就需要按照不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布；測(cè)定細(xì)菌一般選擇104、105、106倍稀釋；測(cè)定放線菌一般選擇103、104、105倍稀釋；測(cè)定真菌一般選擇102、103、104倍稀釋。而首次做實(shí)驗(yàn)時(shí)，可將范圍放寬點(diǎn)，將103107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)。11下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖牵?）a. 在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋的大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落b. 在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣制作果酒c. 土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌d. 在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液【答案】a【解析】在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋后的菌液能夠得到單個(gè)菌落，a正確；在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣，有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，b錯(cuò)誤；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基不能篩選出分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選尿素分解菌，c錯(cuò)誤；在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物全部被殺死，不能用于制取土壤稀釋液，d錯(cuò)誤。12在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，a同學(xué)從對(duì)應(yīng)106培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落下列有關(guān)敘述，出現(xiàn)科學(xué)性錯(cuò)誤的是（ ）a. 甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是由于土樣不同，也可能是操作過(guò)程出了問(wèn)題b. 可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染c. 將其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)無(wú)誤d. b、c選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則【答案】d【解析】試題分析：閱讀題干可知，本題是對(duì)實(shí)驗(yàn)的分析與評(píng)價(jià)，先結(jié)合題意分析出實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)較大差異的可能原因，然后根據(jù)選項(xiàng)描述分析判斷解：a、甲同學(xué)獲得的菌落遠(yuǎn)大于其他同學(xué)，可能是由于所取的土樣不同，也可能操作過(guò)程被污染；a正確b、污染可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底，或操作過(guò)程沒(méi)有保證無(wú)菌操作，將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染；b正確c、若是土樣不同造成的，讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)操作正確；c正確d、b選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則，c選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性原則；d錯(cuò)誤故應(yīng)選d點(diǎn)評(píng)：本題的知識(shí)點(diǎn)是對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤操作的分析及驗(yàn)證，主要考查學(xué)生分析錯(cuò)因并設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證錯(cuò)因、進(jìn)行糾正的能力13以下關(guān)于分解尿素的細(xì)菌的說(shuō)法，正確的是a能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶b以尿素作為唯一的碳源c環(huán)境中含有大量的尿素誘導(dǎo)該細(xì)菌產(chǎn)生了分解尿素的特性d以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)該菌不會(huì)使酚紅指示劑變紅【答案】d【解析】能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，a錯(cuò)誤；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)用尿素作為唯一氮源，b錯(cuò)誤；該細(xì)菌產(chǎn)生脲酶是受基因控制的，可以對(duì)環(huán)境中含有的大量的尿素進(jìn)行分解，c錯(cuò)誤；分解尿素的細(xì)菌的鑒定細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素，d正確【考點(diǎn)定位】 以尿素為氮源，測(cè)定能生長(zhǎng)的細(xì)菌的數(shù)量【名師點(diǎn)睛】培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物14下列敘述正確的是a果醋制作時(shí)需要經(jīng)過(guò)先通氣發(fā)酵后密封發(fā)酵兩個(gè)主要階段b對(duì)細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)時(shí)，劃線法、稀釋涂布平板法都可以c凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，首先收集到的物質(zhì)的分子量較血紅蛋白小d稀釋涂布平板法測(cè)定土壤浸出液中活菌數(shù)目時(shí)，測(cè)定值可能比實(shí)際值小【答案】d【解析】試題分析：制作果醋的菌種是醋酸桿菌，是好氧菌，需要一直通氣，a錯(cuò)誤；平板劃線法是用于分離菌落的，稀釋涂布平板法是用于計(jì)數(shù)的，b錯(cuò)誤；凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，首先收集到的物質(zhì)的分子量較血紅蛋白大，c錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法測(cè)定土壤浸出液中活菌數(shù)目時(shí)，測(cè)定值可能比實(shí)際值小，d正確?？键c(diǎn)：本題主要考查生物技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。15在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅的目的是a分離出能分解尿素的細(xì)菌b給分解尿素的細(xì)菌提供營(yíng)養(yǎng)c對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定d維持正常ph抑制雜菌的生長(zhǎng)繁殖【答案】c【解析】試題分析：尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使ph升高，培養(yǎng)基中進(jìn)入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌，故選c。考點(diǎn)：尿素分解菌的鑒別【名師點(diǎn)睛】尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使ph升高，培養(yǎng)基中進(jìn)入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌。二、非選擇題16柴油是重要的燃料油之一，也因泄露與不當(dāng)排放等造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染?？蒲腥藛T從遭受柴油污染的土壤樣品中取土樣5g，加入含100ml培養(yǎng)基m的錐形瓶中，在30條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5ml培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟連續(xù)培養(yǎng)5次，分離獲得醋酸鈣不動(dòng)桿菌db（一中柴油降解菌）。利用該菌，科研人員進(jìn)一步探索其降解柴油的最佳條件，獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）為獲得醋酸鈣不動(dòng)桿菌db,培養(yǎng)基m應(yīng)以 為唯一碳源，還要考慮無(wú)機(jī)鹽的 和比例。（2）在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，科研人員“30條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5ml培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟，連續(xù)培養(yǎng)5次”的主要目的是 。（3）在分裂醋酸鈣不動(dòng)桿菌db操作時(shí)，在嚴(yán)格無(wú)菌條件下，采用 （填接種方法）在制備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，接種完，對(duì)接種環(huán)進(jìn)行 滅菌處理。培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察、挑取平板上形態(tài)、顏色、大小和隆起度等一致的 進(jìn)行重復(fù)培養(yǎng)，直到分離出單一菌株。（4）據(jù)圖分析，若某地區(qū)土壤發(fā)生柴油重度污染時(shí)，則可以將 ，并添加濃度為 的表面活性劑，以有利于提高對(duì)柴油的降解效果?！敬鸢浮浚?）柴油 種類（2）使醋酸鈣不動(dòng)桿菌db的數(shù)量增加（3）平板劃線法 灼燒 菌落（4）對(duì)被柴油重度污染的土壤進(jìn)行稀釋，使柴油濃度降低至4000mg.kg-1左右 6mg.g-1 【解析】（1）分析題意可知，醋酸鈣不動(dòng)桿菌db是一種柴油降解菌，因此為獲得醋酸鈣不動(dòng)桿菌db，培養(yǎng)基m應(yīng)以柴油為唯一碳源，還要考慮無(wú)機(jī)鹽的種類和比例（2）在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，科研人員“30條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5ml培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟，連續(xù)培養(yǎng)5次”的主要目的是使醋酸鈣不動(dòng)桿菌db的數(shù)量增加（或使柴油分解菌富集）（3）在分離醋酸鈣不動(dòng)桿菌db操作時(shí)，在嚴(yán)格無(wú)菌條件下，采用平板劃線法或稀釋涂布平板法在制備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，接種完，對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌處理培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察、挑取平板上形態(tài)、顏色、大小和隆起度等一致的菌落進(jìn)行重復(fù)培養(yǎng)，直到分離出單一菌株（4）根據(jù)柱形圖結(jié)果可知，在柴油添加量為4000mgkg1左右柴油的降解率最高，表面活性劑的濃度為6mgg1時(shí)降解率最高，因此若某地區(qū)土壤發(fā)生柴油重度污染時(shí)，則可以將對(duì)被柴油重度污染的土壤進(jìn)行稀釋，使柴油濃度降低至4000mgkg1左右，并添加濃度為6mgg1的表面活性劑，以有利于提高對(duì)柴油的降解效果【考點(diǎn)定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點(diǎn)睛】分析柱形圖：圖1中，隨著柴油添加量的增加，柴油的降解率呈先增加后下降的趨勢(shì)，即在4000mgkg1左右柴油的降解率最高圖2中，隨著表面活性劑的濃度的上升，柴油的降解率呈不斷增加的趨勢(shì)，圖中表面活性劑的濃度為6mgg1左右時(shí)降解率最高本題考查了微生物分離和純化的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握選擇培養(yǎng)基在分離微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的運(yùn)用，識(shí)記純化微生物的接種方法，能夠根據(jù)柱形圖中的信息提出有效的降解柴油污染的措施17氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案篩選出能高效降解氯苯的微生物sp1菌。培養(yǎng)基配方如表1。表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨/g牛肉膏/g氯苯/mg氯化鈉/g硝酸銨/g無(wú)機(jī)鹽(無(wú)碳)蒸餾水/l號(hào)105551號(hào)5053適量1號(hào)208053適量1請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的_。配制培養(yǎng)基熔化該物質(zhì)時(shí)往往需要用玻璃棒攪拌，原因是 。(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，操作的先后順序是計(jì)算 _ 。(3)從用途上來(lái)說(shuō)，號(hào)培養(yǎng)基屬于_ _培養(yǎng)基。在號(hào)培養(yǎng)基中，為sp1菌提供氮源的成分是_ 。(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，sp1的菌體變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱為_(kāi)。若想殺死這種休眠體，在實(shí)驗(yàn)室中我們通常選擇 （消毒/滅菌）。(5)將sp1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線如圖。由圖可知，sp1菌在_ _培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是_ ?！敬鸢浮浚靠?分，共9分）(1)瓊脂防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂 (2)稱量溶化滅菌倒平板 (3)選擇硝酸銨(4)芽孢 滅菌(5)20 mg/l氯苯碳源最早耗盡【解析】試題分析：（1）固體培養(yǎng)基中除添加營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要加入一定量的凝固劑，如瓊脂；配制培養(yǎng)基熔化該物質(zhì)時(shí)往往需要用玻璃棒攪拌，原因是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。（2）細(xì)菌培養(yǎng)的基本過(guò)程：配制培養(yǎng)基（稱量溶化調(diào)ph分裝加棉塞包扎）滅菌擱置斜面接種培養(yǎng)。（3）根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為基本培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等，題中號(hào)培養(yǎng)基屬于基本培養(yǎng)基，由于號(hào)培養(yǎng)基中的碳源僅是氯苯，因此，培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。號(hào)培養(yǎng)基成分中含氮物質(zhì)為硝酸銨，可以為sp1菌株提供氮源。(4)當(dāng)環(huán)境條件較差時(shí)，一些菌體會(huì)形成芽孢休眠體，以適應(yīng)不良環(huán)境。若想殺死這種休眠體，在實(shí)驗(yàn)室中我們通常選擇滅菌的方式。（5）sp1菌株以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯被耗盡時(shí)，菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，sp1菌株越早停止生長(zhǎng)。根據(jù)曲線圖可知，氯苯濃度為20mg/l時(shí)，菌體數(shù)量最先減少，最可能是由于氯苯被耗盡?？键c(diǎn)：本題主要考查培養(yǎng)基的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷。18生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐 我國(guó)最早的詩(shī)集詩(shī)經(jīng)中有“田中有廬，疆場(chǎng)有瓜是剝是菹”的詩(shī)句，其中“廬”和“瓜”是蔬菜，“剝”和“菹”是腌制加工的意思。泡菜是一種歷史悠久、深受群眾喜愛(ài)的傳統(tǒng)美食。某興趣小組的同學(xué)進(jìn)行了制作泡菜的實(shí)踐活動(dòng)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）按清水與鹽質(zhì)量比為4:1的比例制好鹽水后，需將鹽水煮沸，其作用是_。（2）為測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量，首先要配制_標(biāo)準(zhǔn)顯色液，并與樣品進(jìn)行比較。泡菜制作的第3-5天亞硝酸鹽含量較高不宜食用，原因是_。（3）若將稀釋105倍的某細(xì)菌菌液，用直接計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)。直接計(jì)數(shù)法：用吸管吸取0.1ml該菌液，滴于血球計(jì)數(shù)板上的_邊緣，待該細(xì)菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，用顯微鏡直接計(jì)數(shù)，并計(jì)算出每升菌液的細(xì)菌數(shù)目。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)：在五個(gè)