基因工程的工具.doc

第一章 基因工程第一節(jié) 基因工程概述基因工程的誕生和發(fā)展和基因工程的工具學(xué)習(xí)目標(biāo)簡述基因工程的概念含義簡述基因工程誕生歷程認(rèn)同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論突破和技術(shù)創(chuàng)新簡述基因工程的原理說出DNA重組技術(shù)的基本工具及其作用、特點(diǎn)課前導(dǎo)學(xué)一、基因工程的誕生和發(fā)展1理論基礎(chǔ)(1)艾弗里：證明了 。(2)沃森和克里克：闡明了 。(3)尼倫貝格等破譯了。2工具基礎(chǔ)(1)酶： 和 、逆轉(zhuǎn)錄酶。(2)載體：等。3發(fā)展(1)19731976年為。 (2)19771981年為。(3)1982年以后為 。4誕生：科恩等將兩種不同來源的DNA分子進(jìn)行，并首次實(shí)現(xiàn)了在大腸桿菌中的表達(dá)，創(chuàng)立了改造生物的新技術(shù)基因工程。二、基因工程的概念方法在體外通過人工 和 等方法原理對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和 操作水平 水平過程包括基因的 、_轉(zhuǎn)移及在受體細(xì)胞內(nèi)的 和 等。.目的獲得人類需要的 。三、基因工程的工具 1限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”(1)功能：只能特定的核苷酸序列，并在合適的反應(yīng)條件下使每條鏈特定部位的 之間的 斷開，從而切割DNA分子。(2)作用結(jié)果產(chǎn)生黏性末端：通過錯(cuò)位切，在兩條鏈的部位切割形成。產(chǎn)生平口末端：通過平切，在兩條鏈的部位切割形成。2DNA連接酶“分子針線”(1)功能：把DNA分子這把“梯子”的扶手連接起來。(2)結(jié)果：用限制性核酸內(nèi)切酶切割質(zhì)粒和外源DNA分子，并通過的連接，形成_分子。3載體運(yùn)載工具(1)功能：將導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)種類：質(zhì)粒、以及一些。(3)質(zhì)粒：來自于細(xì)胞中的一種很小的分子，是最早應(yīng)用的載體。質(zhì)疑探究1切斷和形成磷酸二酯鍵的酶分別有哪些？2原核生物中限制酶有何意義？細(xì)菌是如何防止自身DNA被限制酶降解？3在基因工程中，為什么要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶（如EcoR）切割兩種DNA分子呢？P12實(shí)踐中的圖示切割后的片段可以連接成幾種DNA分子？4從結(jié)構(gòu)上分析為什么不同生物的DNA能夠重組？5不同限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端一定不同嗎？6要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？7作為載體應(yīng)具備什么條件？8天然的質(zhì)粒都可以直接用做基因工程載體嗎？為什么？例題精講 1最早創(chuàng)立基因工程技術(shù)的科學(xué)家是 A沃森和克里克 B帕米特 C科恩 D穆里斯2科學(xué)家們經(jīng)過多年的努力，創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)基因工程，實(shí)施該工程的最終目的是 ( )A定向提取生物體的DNA分子 B定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”C在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造 D定向地改造生物的遺傳性狀3下列關(guān)于限制酶的說法正確的是 A限制酶廣泛存在于各種生物中，但微生物中很少B一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端D限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵4下圖所示是限制酶切割某DNA分子的過程，從圖中可知，該限制酶能識(shí)別的堿基序列及切點(diǎn)是 ACTTAAG，切點(diǎn)在C和T之間BCTTAAG，切點(diǎn)在G和A之間CGAATTC，切點(diǎn)在G和A之間DGAATTC，切點(diǎn)在C和T之間5在基因工程中，科學(xué)家所用的“剪刀”、“針線”和“運(yùn)載體”分別是指 A大腸桿菌病毒、質(zhì)粒、DNA連接酶B噬菌體、質(zhì)粒、DNA連接酶C限制性核酸內(nèi)切酶、RNA連接酶、質(zhì)粒D限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒6作為基因的運(yùn)輸工具載體，必須具備的條件及理由是 A能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因B具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便于目的基因的表達(dá)C具有某些標(biāo)記基因，以便為目的基因的表達(dá)提供條件D能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，以便于進(jìn)行篩選7下圖為DNA分子的切割和連接過程。 (1)EcoRI是一種酶，其識(shí)別序列是，切割位點(diǎn)是與之間的鍵。切割結(jié)果產(chǎn)生的DNA片段末端形式為。(2)不同來源DNA片段結(jié)合，在這里需要的酶應(yīng)是酶，此酶的作用是在之間形成鍵，而起“縫合”作用的。還有一種連接平末端的連接酶是。反饋矯正1在基因工程中，切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段，需要使用 ( )A同種限制性核酸內(nèi)切酶 B兩種限制性核酸內(nèi)切酶C同種DNA連接酶 D兩種DNA連接酶2下列黏性末端中，屬于同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割而成的是 ( )A B C D3要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是 ( )(1)限制酶(2)連接酶(3)解旋酶(4)還原酶A、(1)(2)(3) B、(1)(2)(4) C、(1)(2) D、(1)(3)4在受體細(xì)胞中能檢測出目的基因是因?yàn)?( )A、目的基因上有標(biāo)記 B、質(zhì)粒具有某些標(biāo)記基因 C、重組質(zhì)粒能夠復(fù)制 D以上都不正確5質(zhì)粒是基因工程最常見的載體，它的主要特點(diǎn)是 ( )能自主復(fù)制不能自主復(fù)制結(jié)構(gòu)很小是蛋白質(zhì)是環(huán)狀RNA是環(huán)狀DNA能“友好”地“借居”A、 B、 C D6下列各項(xiàng)中，a、b、c、d代表的結(jié)構(gòu)正確的是 （ ） Aa一質(zhì)粒RNA Bb一DNA連接酶 Cc一限制性內(nèi)切酶 Dd-外源基因7下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是 A B C D8限制酶是一群核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA 分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶 BamHI , EcoRI , Hind以及 BgI的辨識(shí)序列： （ ） 箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端，可以互補(bǔ)結(jié)合？其正確的末端互補(bǔ)序列為何？ ABamHI和BgI；末端互補(bǔ)序列GATC BBamHI和EcoRI；末端互補(bǔ)序列AATT CBamHI和Hind ；末端互補(bǔ)序列GATC DEcoRI和Hind ；末端互補(bǔ)序列AATT遷移創(chuàng)新1基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC。根據(jù)圖示,判斷下列操作正確的是 （ ）A.質(zhì)粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割B.質(zhì)粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割C.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶切割 D.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶切割2下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圈l、圈2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問 （1）一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma 切割前后，分別含有 個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。 （2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 。 （3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna 切割，原因是 。 （4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。 （5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。 （7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。第一章 基因工程第一節(jié) 基因工程概述基因工程的誕生和發(fā)展和基因工程的工具答案課前導(dǎo)學(xué)：一、基因工程的誕生和發(fā)展1DNA是遺傳物質(zhì) DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu) 遺傳密碼2限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 質(zhì)粒3開始期 發(fā)展期 迅猛發(fā)展和實(shí)際運(yùn)用期4體外重組 定向二、基因工程的概念剪切 拼接 修飾 DNA分子 分離 復(fù)制 表達(dá) 基因產(chǎn)物的技術(shù)三、基因工程的工具識(shí)別 2個(gè)核苷酸 磷酸二酯鍵 不同 相同 斷口處 同種 DNA連接酶 重組DNA 外源基因 噬菌體 動(dòng)植物病毒 細(xì)菌 環(huán)狀DNA 遺傳標(biāo)記基因 目的基因插入位點(diǎn) 低分子量質(zhì)疑探究例題精講 1-6 C D B C D A 7. (1)限制 GAATTC G A 磷酸二酯鍵 黏性末端 (2) Ecoli DNA連接酶 互補(bǔ)的黏性末端斷口 磷酸二酯鍵 T4DNA連接酶反饋矯正 A B C B C D C A遷移創(chuàng)新 1。 A 2（1）0、2（2）高（3）Sma會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化（5）DNA連接（6）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞（7）蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)當(dāng)我被上帝造出來時(shí)，上帝問我想在人間當(dāng)一個(gè)怎樣的人，我不假思索的說，我要做一個(gè)偉大的世人皆知的人。于是，我降臨在了人間。我出生在一個(gè)官僚知識(shí)分子之家，父親在朝中做官，精讀詩書，母親知書答禮，溫柔體貼，父母給我去了一個(gè)好聽的名字：李清照。小時(shí)侯，受父母影響的我飽讀詩書，聰明伶俐，在朝中享有“神童”的稱號(hào)。小時(shí)候的我天真活潑，才思敏捷，小河畔，花叢邊撒滿了我的詩我的笑，無可置疑，小時(shí)侯的我快樂無慮?！芭d盡晚回舟，誤入藕花深處。爭渡，爭渡，驚起一灘鷗鷺。”青春的我如同一只小鳥，自由自在，沒有約束，少女純凈的心靈常在朝陽小，流水也被自然洗禮，纖細(xì)的手指拈一束花，輕拋入水，隨波蕩漾，發(fā)髻上沾著晶瑩的露水，雙腳任水流輕撫。身影輕飄而過，留下一陣清風(fēng)?？墒峭砟甑奈覅s生活在一片黑暗之中，家庭的衰敗，社會(huì)的改變，消磨著我那柔弱的心。我?guī)缀鯇?duì)生活絕望，每天在痛苦中消磨時(shí)光，一切都好象是灰暗的?！皩ひ捯捓淅淝迩迤嗥鄳K慘戚戚”這千古疊詞句就是我當(dāng)時(shí)心情的寫照。最后，香消玉殞，我在痛苦和哀怨中凄涼的死去。在天堂里，我又見到了上帝。上帝問我過的怎么樣，我搖搖頭又點(diǎn)點(diǎn)頭，我的一生有歡樂也有坎坷，有笑聲也有淚水，有鼎盛也有衰落。我始終無法客觀的評(píng)價(jià)我的一生。我原以為做一個(gè)著名的人，一生應(yīng)該是被歡樂榮譽(yù)所包圍，可我發(fā)現(xiàn)我錯(cuò)了。于是在下一輪回中，我選擇做一個(gè)平凡的人。我來到人間，我是一個(gè)平凡的人，我既不著名也不出眾，但我擁有一切的幸福：我有溫馨的家，我有可親可愛的同學(xué)和老師，我每天平凡而快樂的活著，這就夠了。天兒藍(lán)藍(lán)風(fēng)兒輕輕，暖和的春風(fēng)帶著春的氣息吹進(jìn)明亮的教室，我坐在教室的窗前，望著我擁有的一切，我甜甜的笑了。我拿起手中的筆，不禁想起曾經(jīng)作詩的李清照，我雖然沒有橫溢的才華，但我還是拿起手中的筆，用最樸實(shí)的語言，寫下了一時(shí)的感受：人生并不總是完美的，每個(gè)人都會(huì)有不如意的地方。這就需要我們靜下心來閱讀自己的人生，體會(huì)其中無盡的快樂和與眾不同?！案徊蛔x書富不久，窮不讀書終究窮?！睘槭裁磸墓诺浇穸寄敲纯粗赜袑W(xué)識(shí)之人？那是因?yàn)橛袑W(xué)識(shí)之人可以為社會(huì)做出更大的貢獻(xiàn)。那時(shí)因?yàn)樽x書能給人帶來快樂。自從看了丑小鴨這篇童話之后，我變了，變得開朗起來，變得樂意同別人交往，變得自信了因?yàn)槲抑溃杭词宫F(xiàn)在我是只“丑小鴨”，但只要有自信，總有一天我會(huì)變成“白天鵝”的，而且會(huì)是一只世界上最美麗的“白天鵝”我讀完了這篇美麗的童話故事，深深被丑小鴨的自信和樂觀所折服，并把故事講給了外婆聽，外婆也對(duì)童話帶給我們的深刻道理而驚訝不已。還吵著鬧著多看幾本名著。于是我給外婆又買了幾本名著故事，她起先自己讀，讀到不認(rèn)識(shí)的字我就告訴她，如果這一面生字較多，我就讀給她聽整個(gè)一面。漸漸的，自己的語文閱讀能力也提高了不少，與此同時(shí)我也發(fā)現(xiàn)一個(gè)人讀書的樂趣遠(yuǎn)不及兩個(gè)人讀的樂趣大，而兩個(gè)人讀書的樂趣遠(yuǎn)不及全家一起讀的樂趣大。于是，我便發(fā)展“業(yè)務(wù)”帶動(dòng)全家一起讀書現(xiàn)在，每每遇到好書大家也不分男女老少都一擁而上，爭先恐后“搶書”，當(dāng)我說起我最小應(yīng)該讓我的時(shí)候，卻沒有人搭理我。最后還把書給撕壞了，我生氣地哭了，媽媽一邊安慰我一邊對(duì)外婆說：“孩子小，應(yīng)該讓著點(diǎn)?！蓖馄艆s不服氣的說：“我這一把年紀(jì)的了，怎么沒人讓我呀？”大家人你一言我一語，誰也不肯相讓讀書讓我明白了善惡美丑、悲歡離合，讀一本好書，猶如同智者談心、談理想，教你辨別善惡，教你弘揚(yáng)正義。讀一本好書，如品一杯香茶，余香繚繞。讀一本好書，能使人心靈得到凈化。書是我的老師，把知識(shí)傳遞給了我；書是我的伙伴，跟我訴說心里話；書是一把鑰匙，給我敞開了知識(shí)的大門；書更是一艘不會(huì)沉的船，引領(lǐng)我航行在人生的長河中。其實(shí)讀書的真真樂趣也就在于此處，不是一個(gè)人悶頭苦讀書；也不是讀到好處不與他人分享，獨(dú)自品位；更不是一個(gè)人如癡如醉地沉浸在書的海洋中不能自拔。而是懂得與朋友，家人一起分享其中的樂趣。這才是讀書真正之樂趣呢！這所有的一切，不正是我從書中受到的教益嗎？我閱讀，故我美麗；我思考，故我存在。我從內(nèi)心深處真切地感到：我從讀書中受到了教益。當(dāng)看見有些同學(xué)寧可買玩具亦不肯買書時(shí)，我便想到培根所說的話：“世界上最庸俗的人是不讀書的人，最吝嗇的人是不買書的人，最可憐的人是與書無緣的人?！痹S許多多的作家、偉人都十分喜歡看書，例如毛澤東主席，他半邊床上都是書，一讀起書來便進(jìn)入忘我的境界。書是我生活中的好朋友，是我人生道路上的航標(biāo)，讀書，讀好書，是我無怨無悔的追求。下午13：0017：00B實(shí)行不定時(shí)工作制的員工，在保證完成甲方工作任務(wù)情況下，經(jīng)公司同意,可自行安排工作和休息時(shí)間。312打卡制度3.1.2.1公司實(shí)行上、下班指紋錄入打卡制度。全體員工都必須自覺遵守工作時(shí)間，實(shí)行不定時(shí)工作制的員工不必打卡。3.1.2.2打卡次數(shù)：一日兩次，即早上上班打卡一次，下午下班打卡一次。3.1.2.3打卡時(shí)間：打卡時(shí)間為上班到崗時(shí)間和下班離崗時(shí)間； 3.1.2.4因公外出不能打卡：因公外出不能打卡應(yīng)填寫外勤登記表,注明外出日期、事由、外勤起止時(shí)間。因公外出需事先申請(qǐng)，如因特殊情況不能事先申請(qǐng)，應(yīng)在事畢到崗當(dāng)日完成申請(qǐng)、審批手續(xù)，否則按曠工處理。因停電、卡鐘（工卡）故障未打卡的員工，上班前、下班后要及時(shí)到部門考勤員處填寫未打卡補(bǔ)簽申請(qǐng)表，由直接主管簽字證明當(dāng)日的出勤狀況，報(bào)部門經(jīng)理、人力資源部批準(zhǔn)后，月底由部門考勤員據(jù)此上報(bào)考勤。上述情況考勤由各部門或分公司和項(xiàng)目文員協(xié)助人力資源部進(jìn)行管理。3.1.2.5手工考勤制度3.1.2.6手工考勤制申請(qǐng)：由于工作性質(zhì)，員工無法正常打卡（如外圍人員、出差），可由各部門提出人員名單，經(jīng)主管副總批準(zhǔn)后，報(bào)人力資源部審批備案。3.1.2.7參與手工考勤的員工，需由其主管部門的部門考勤員(文員)或部門指定人員進(jìn)行考勤管理，并于每月26日前向人力資源部遞交考勤報(bào)表。3.1.2.8參與手工考勤的員工如有請(qǐng)假情況發(fā)生，應(yīng)遵守相關(guān)請(qǐng)、休假制度，如實(shí)填報(bào)相關(guān)表單。3.1.2.9 外派員工在外派工作期間的考勤,需在外派公司打卡記錄;如遇中途出差,持出差證明,出差期間的考勤在出差地所在公司打卡記錄;3.2加班管理3.2.1定義加班是指員工在節(jié)假日或公司規(guī)定的休息日仍照常工作的情況。A現(xiàn)場管理人員和勞務(wù)人員的加班應(yīng)嚴(yán)格控制，各部門應(yīng)按月工時(shí)標(biāo)準(zhǔn)，合理安排工作班次。部門經(jīng)理要嚴(yán)格審批員工排班表，保證員工有效工時(shí)達(dá)到要求。凡是達(dá)到月工時(shí)標(biāo)準(zhǔn)的，應(yīng)扣減員工本人的存休或工資；對(duì)超出月工時(shí)標(biāo)準(zhǔn)的，應(yīng)說明理由，報(bào)主管副總和人力資源部審批。 B因員工月薪工資中的補(bǔ)貼已包括延時(shí)工作補(bǔ)貼，所以延時(shí)工作在4小時(shí)（不含）以下的，不再另計(jì)加班工資。因工作需要，一般員工延時(shí)工作4小時(shí)至8小時(shí)可申報(bào)加班半天，超過8小時(shí)可申報(bào)加班1天。對(duì)主管(含)以上管理人員，一般情況下延時(shí)工作不計(jì)加班，因特殊情況經(jīng)總經(jīng)理以上領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)的延時(shí)工作，可按以上標(biāo)準(zhǔn)計(jì)加班。3.2.2.2員工加班應(yīng)提前申請(qǐng)，事先填寫加班申請(qǐng)表，因無法確定加班工時(shí)的，應(yīng)在本次加班完成后3個(gè)工作日內(nèi)補(bǔ)填加班申請(qǐng)表。加班申請(qǐng)表經(jīng)部門經(jīng)理同意，主管副總經(jīng)理審核報(bào)總經(jīng)理批準(zhǔn)后有效。加班申請(qǐng)表必須事前當(dāng)月內(nèi)上報(bào)有效，如遇特殊情況，也必須在一周內(nèi)上報(bào)至總經(jīng)理批準(zhǔn)。如未履行上述程序，視為乙方自愿加班。3.2.2.3員工加班，也應(yīng)按規(guī)定打卡，沒有打卡記錄的加班，公司不予承認(rèn)；有打卡記錄但無公司總經(jīng)理批準(zhǔn)的加班，公司不予承認(rèn)加班。3.2.2.4原則上，參加公司組織的各種培訓(xùn)、集體活動(dòng)不計(jì)加班。3.2.2.5加班工資的補(bǔ)償：員工在排班休息日的加班，可以以倒休形式安排補(bǔ)休。原則上，員工加班以倒休形式補(bǔ)休的，公司將根據(jù)工作需要統(tǒng)一安排在春節(jié)前后補(bǔ)休。加班可按1：1的比例沖抵病、事假。3.2.3加班的申請(qǐng)、審批、確認(rèn)流程3.2.3.1加班申請(qǐng)表在各部門文員處領(lǐng)取，加班統(tǒng)計(jì)周期為上月26日至本月25日。3.2.3.2員工加班也要按規(guī)定打卡，沒有打卡記錄的加班，公司不予承認(rèn)。各部門的考勤員(文員)負(fù)責(zé)加班申請(qǐng)表的保管及加班申報(bào)。員工加班應(yīng)提前申請(qǐng)，事先填寫加班申請(qǐng)表加班前到部門考勤員(文員)處領(lǐng)取加班申請(qǐng)表，加班申請(qǐng)表經(jīng)項(xiàng)目管理中心或部門經(jīng)理同意，主管副總審核，總經(jīng)理簽字批準(zhǔn)后有效。填寫并履行完審批手續(xù)后交由部門考勤員(文員)保管。3.2.3.3部門考勤員（文員）負(fù)責(zé)檢查、復(fù)核確認(rèn)考勤記錄的真實(shí)有效性并在每月27日匯總交人力資源部，逾期未交的加班記錄公司不予承認(rèn)。下午13：0017：00度。全體員工都必須自覺遵守工作時(shí)間，實(shí)行不定時(shí)工作制的員工不必打卡。3.1.2.2打卡次數(shù)：一日兩次，即早上上班打卡一次，下午下班打卡一次。3.1.2.3打卡時(shí)間：打卡時(shí)間為上班到崗時(shí)間和下班離崗時(shí)間； 3.1.2.4因公外出不能打卡：因公外出不能打卡應(yīng)填寫外勤登記表,注明外出日期、事由、外勤起止時(shí)間。因公外出需事先申請(qǐng)，如因特殊情況不能事先申請(qǐng)，應(yīng)在事畢到崗當(dāng)日完成申請(qǐng)、審批手續(xù)，否則按曠工處理。因停電、卡鐘（工卡）故障未打卡的員工，上班前、下班后要及時(shí)到部門考勤員處填寫未打卡補(bǔ)簽申請(qǐng)表，由直接主管簽字證明當(dāng)日的出勤狀況，報(bào)部門經(jīng)理、人力資源部批準(zhǔn)后，月底由部門考勤員據(jù)此上報(bào)考勤。上述情況考勤由各部門或分公司和項(xiàng)目文員協(xié)助人力資源部進(jìn)行管理。3.1.2.5手工考勤制度3.1.2.6手工考勤制申請(qǐng)：由于工作性質(zhì)，員工無法正常打卡（如外圍人員、出差），可由各部門提出人員名單，經(jīng)主管副總批準(zhǔn)后，報(bào)人力資源部審批備案。3.1.2.7參與手工考勤的員工，需由其主管部門的部門考勤員(文員)或部門指定人員進(jìn)行考勤管理，并于每月26日前向人力資源部遞交考勤報(bào)表。3.1.2.8參與手工考勤的員工如有請(qǐng)假情況發(fā)生，應(yīng)遵守相關(guān)請(qǐng)、休假制度，如實(shí)填報(bào)相關(guān)表單。3.1.2.9 外派員工在外派工作期間的考勤,需在外派公司打卡記錄;如遇中途出差,持出差證明,出差期間的考勤在出差地所在公司打卡記錄;3.2加班管理3.2.1定義加班是指員工在節(jié)假日或公司規(guī)定的休息日仍照常工作的情況。A現(xiàn)場管理人員和勞務(wù)人員的加班應(yīng)嚴(yán)格控制，各部門應(yīng)按月工時(shí)標(biāo)準(zhǔn)，合理安排工作班次。部門經(jīng)理要嚴(yán)格審批員工排班表，保證員工有效工時(shí)達(dá)到要求