實(shí)驗(yàn)方案：聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽.doc

聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽消毒凝膠制備方案：方案1：卡波姆基質(zhì)的制備：卡波姆940 10g，乙醇50g ，甘油 50g，聚山梨酯80 2g， 羥苯乙酯1g， 氫氧化鈉4g，純化水加至1000g (藥劑書)方案2：聚六亞甲基雙胍鹽酸:1326.5， 乙醇3436，異丙醇10.515.5，聚丙烯酸0.251，三乙醇胺0.51.5甲基苷-20 0.61，丙三醇0.21，維生素E0.20.5，純化水至100方案3:乙醇50-70，卡波姆940 0.2-2，pH值調(diào)節(jié)劑0.2-2，保濕劑0.11.0，香精0.011.5，純化水加至100.方案4：羧甲基纖維素:60g，甘油150g，羥苯甲酯2g, 純化水至1000g方案5：海藻酸鈉30g，葡萄糖酸鈣 0.5g,甘油450g,羥苯乙酯2g,加純化水至1000g。方案6：消毒凝膠: 稱取 聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽置于 ml（50）濃度為體積分?jǐn)?shù) %（50）乙醇中溶解，加入羧甲基纖維素鈉 g（10）及其他輔助成分，充分?jǐn)嚢?2min然后將其置于沸水浴中揮發(fā)脫除乙醇，繼續(xù)在高速攪拌條件下加沸水至 ml（500），靜置過夜去除氣泡，即成消毒凝膠。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：方案1：采用紫外分光光度法，對(duì)測(cè)定聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽的含量的準(zhǔn)確度進(jìn)行了觀察。聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽在 234nm處有紫外吸收波長(zhǎng)，不同濃度的樣品溶液在 234nm處有不同的吸光度值，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，將所測(cè)樣品的吸光值帶入曲線方程即可獲得樣品的含量值。試驗(yàn)步驟1 工作曲線的繪制準(zhǔn)確稱取0.500 g (準(zhǔn)確至 0.001g) Vantocil IB溶液于100 mL 容量瓶中, 定容, 混勻。再?gòu)纳鲜鋈芤褐蟹謩e吸取0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL和2.5 mL于100 mL容量瓶中, 定容, 混勻。在 236 nm 處用 1 cm 石英比色池, 以蒸餾水為參比, 分別測(cè)量各稀釋液的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度( 單位 g/L) 為縱坐標(biāo), 以相應(yīng)的吸光度為橫坐標(biāo), 繪制工作曲線。計(jì)算工作曲線方程 ( C= KA +B) 。要求相關(guān)系數(shù) r0.999。2 檢測(cè)吸取消毒液 V 為 0.250 mL 于 100 mL 容量瓶中,定容混勻。測(cè)量其吸光度, 要求消毒液測(cè)定濃度應(yīng)在工作曲線范圍內(nèi), 并按下式進(jìn)行計(jì)算。式中:C1聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù) /%;K曲線方程斜率;B曲線方程截距;V消毒液稀釋前的體積 /mL消毒液的密度 /g/mL;A1樣品的吸光度值用紫外分光光度法測(cè)定聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽含量的線性范圍為330mg/L ，線性相關(guān)系數(shù)為 0.9999，加標(biāo)回收率范圍為 99.85%102.0% ，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.49% 。方案2：精確稱取 0.20g鹽酸聚六亞甲基雙胍純品到100ml 容量瓶，用蒸餾水定容配置成濃度 2g/l 的母液，再分別精確吸取3、4、5、6、7、8ml母液至 100ml 容量瓶，使鹽酸聚六亞甲基胍的最終含量分別為 60、80、100、120、140、160mg/l分別取25ml 稀釋液置 250ml碘量瓶中，加甲苯胺藍(lán)指示液 2 滴，用0.0025mol/ml , 聚乙烯基硫酸鉀滴定液滴定至溶液由藍(lán)色顯紫色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正以鹽酸聚六亞甲基胍含量為橫坐標(biāo)，消耗聚乙烯基硫酸鉀滴定液的體積為縱坐標(biāo)作圖，得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,按照相關(guān)回歸法計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)回歸方程. 樣品含量測(cè)定 精確吸取適量消毒劑樣品于 100ml容量瓶中用蒸餾水稀釋在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，取稀釋液 25ml，按上述步驟進(jìn)行滴定,把消耗聚乙烯基硫酸鉀滴定液的體積代入標(biāo)準(zhǔn)回歸方程，計(jì)算出相應(yīng)的聚六亞甲基單胍鹽酸鹽含量精密度試驗(yàn) 取配置好的120mg/ml 溶液重復(fù)測(cè)定 6 次，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差.回收率試驗(yàn) 取 2 份含量為 60ml的平行已測(cè)樣品，分別添加 0與 50mg 的聚六亞甲基單胍標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定含量，計(jì)算平均回收率重復(fù)測(cè)定 3次. 最低檢出濃度 將 0.0025mg/l的聚乙烯基硫酸鉀滴定液稀釋 50倍，配置 10/1/0.1mg/l 的聚六亞甲基單胍，各取25ml，加兩滴甲苯胺藍(lán)，用稀釋后的聚乙烯基硫酸鉀進(jìn)行滴定，終點(diǎn)顯藍(lán)紫色明顯的為其最低檢出濃度.方案3： 聚六亞甲基雙胍含量的測(cè)定方法(比色法 )1 原理 檢測(cè)原理是聚六亞甲基雙胍(PHMB)和 曙紅(Eosin染料)之 間顯色反應(yīng),顏 色改變可以通過在波 長(zhǎng)545nm處 測(cè)量吸光度值。 2 儀器2.1 可見光分光光度計(jì)。2.2 2cm 1cm玻 璃ce11s。 2.3 容量瓶:25mL、100mL、250mL、500mL。 2.4 移液管:1.0 mL、2.0mL、2.5mL、4.0mL、6.0mL、8.0 mL 和 10.0mL。3 需要的反應(yīng)物3.1 曙紅Y水溶液(Eosh Y)。 3.2 PHMB標(biāo)準(zhǔn)品。3.3 三水合醋酸鈉。 4 程序步驟4.1 指示溶液的制備 稱0.6g水 溶性 曙紅Y,放入250mL的 燒杯,以 大約50mL的 溫蒸餾水溶解并冷卻。轉(zhuǎn)移至 100mL的標(biāo)準(zhǔn)容量瓶中 ,用 蒸餾水定容到100mL。 充分混勻,得 到溶液A。 用移液管吸取10mL A液 ,以 蒸餾水定容至250mL,得 到指示液。4.2 醋酸鹽溶液的制備 將10g醋酸鈉溶解于100mL蒸餾水中。 4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 用標(biāo)準(zhǔn)品分別配制濃度為0.8mg/L,1.6mg/L,3.2mg/L,4.8mg/L,6.4mg/L的 PHMB標(biāo)準(zhǔn)液。 將波長(zhǎng)調(diào)至545nm,測(cè) 定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 4.4 測(cè)定 用移液管吸取10mL濃度未知的PHMB溶液至25mL容量瓶，加1mL醋酸溶液和2.5mL指示液，以蒸餾水定容至25mL，用力振搖，充分混勻。用分光光度計(jì)測(cè)未知濃度的PHMB溶液的吸光度值。 5 結(jié)果計(jì)箅 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算未知溶液的PHMB含量,計(jì)算公式:式中 : c樣品溶液中PHMB的 含量 ,單位為克每升(g/L);m以標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出樣品溶液的PHMB的質(zhì)量,單位為微克(ug); V樣品溶液的體積單位為毫升(mL)。 6 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。消毒滅菌，菌落檢測(cè)：方案1：各實(shí)驗(yàn)組試驗(yàn)以白色念珠菌和金黃色葡萄球菌為試驗(yàn)菌，試驗(yàn)在 20水浴條件下進(jìn)行，設(shè)若干組試驗(yàn)大致分為如下情況： 分別將等量菌片與相應(yīng)量的消毒凝膠原藥作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量?jī)A注法培養(yǎng)；白色念珠菌用消毒凝膠原藥、金黃色葡萄球菌用對(duì)倍稀釋液，每片菌片與相應(yīng)的消毒凝膠作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量?jī)A注法培養(yǎng)；定量菌片與對(duì)照凝膠作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量?jī)A注法培養(yǎng)。 判定:各組的菌落生長(zhǎng)情況長(zhǎng)借此來判定凝膠的消毒作用。方案2：試驗(yàn)菌為白色念珠菌(ATCCl0231)、銅綠假單胞菌(ATcC 15442)、大腸桿菌(8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)。取其510代24 h新鮮培養(yǎng)物，用加有30 gL牛血清白蛋白的稀釋液配制成試驗(yàn)菌懸液備用。試驗(yàn)菌為白色念珠菌和大腸桿菌，試驗(yàn)設(shè)平行6組，按中和劑選擇試驗(yàn)程序進(jìn)行。試驗(yàn)結(jié)果，以第1組不長(zhǎng)菌或菌數(shù)遠(yuǎn)少于第2組，第2組菌數(shù)100 cfuml，第3、4、5組組問菌數(shù)相差15，第6組不長(zhǎng)菌時(shí)，為所選中和劑及其濃度適宜。 用無菌硬水將消毒劑配制成待測(cè)濃度的1.25倍；在無菌試管內(nèi)加入05 ml菌懸液