高效液相色譜儀驗證方案與報告.doc

文件編碼： 驗證立項申請表立項部門檢驗儀器與方法驗證小組申請日期年 月 日立項題目LC-05P高效液相色譜儀驗證方案類 別檢驗儀器驗證要求及目的為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設置的性能指標，對該儀器進行必要的驗證。立項部門負責人簽名： 年 月 日主管部門意見簽名： 年 月 日生產(chǎn)技術部門意見 簽名： 年 月 日品質部意見 簽名： 年 月 日技術副總意見 簽名： 年 月 日備注驗證方案審批表程序 審批部門負責人簽名日 期起 草品質部年 月 日批 準生產(chǎn)技術部年 月 日品 質 部年 月 日驗證領導小組年 月 日技術副總年 月 日備注驗 證 計 劃1、概述LC-05P高效液相色譜儀為*分離科學技術公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，我司在購買前對該產(chǎn)品的性能、價格、外觀和售后服務進行了廣泛地調查研究，在同類產(chǎn)品中價格適中、性能穩(wěn)定、美觀且售后服務好。購買該產(chǎn)品的目的是為今后新產(chǎn)品研制、開發(fā)、生產(chǎn)。為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，也為了確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設計的性能指標，計劃對該儀器進行必要的驗證。2、驗證目的為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設置的性能指標，對該儀器進行必要的驗證。3、職責分工姓名所在部門職務（職稱）驗證分工4、驗證時間安排驗證開始時間： 年 月 日驗證結束時間： 年 月 日驗 證 報 告驗證項目名稱LC05P高效液相色譜儀驗證驗證起訖日期驗 證 工 作負責驗證部門人 員參 加 部 門人 員參 加 部 門人 員檢 驗 部 門人 員驗證結果報告概要：說明：位置不夠用時可另附頁結論： 驗證小組負責人簽名： 年 月 日驗證小組成員會簽年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日生產(chǎn)技術部意見：負責人簽名： 年 月 日驗證領導小組意見：負責人簽名： 年 月 日技術副總意見：簽名： 年 月 日備 注：驗 證 證 書驗 證 項 目LC05P高效液相色譜儀驗證驗證要求及目的為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設置的性能指標，對該儀器進行必要的驗證。驗證報告編號 驗證報告名稱LC05P高效液相色譜儀驗證報告有 效 期 至備 注當影響儀器的關鍵性備件等發(fā)生重大變化時須進行再驗證。該驗證項目已按驗證方案進行驗證，各項驗證結果均符合標準要求且對驗證報告已審核無誤，予以批準。特此證明驗證領導小組負責人：簽字： 年 月 日 *藥業(yè)有限公司LC-05P高效液相色譜儀驗 證 方 案檢驗儀器與方法驗證小組 二OO八年一月*藥業(yè)有限公司LC-05P高效液相色譜儀驗 證 報 告檢驗儀器與方法驗證小組 二OO八年一月目 錄（一） 安裝確認1、資料檔案1.1概述1.2資料檔案2、技術特性2.1備件2.2技術參數(shù)3、一般狀況（二）功能試驗（三）校正1、計量部門的校正2、檢驗室校正（四）適用性預試驗（五）再確認LC-05P型高效液相色譜儀為*分離科學技術公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，我司在購買前對該產(chǎn)品的性能、價格、外觀和售后服務進行了廣泛地調查研究，在同類產(chǎn)品中價格適中、性能穩(wěn)定、美觀且售后服務好。購買該產(chǎn)品的目的是為今后新產(chǎn)品研制、開發(fā)、生產(chǎn)。為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，也為了確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設計的性能指標，計劃對該儀器進行必要的驗證。儀器名稱：高效液相色譜儀 儀器負責人：儀器型號：LC-05P 儀器編號：生產(chǎn)廠家：*分離科學技術公司儀器所在部門和房間：辦公、質檢樓三樓精密儀器室（一） 安裝確認1、資料檔案1.1 概述描述儀器的使用范圍。1.2 資料檔案儀器使用說明書、合格證、使用記錄、維修保養(yǎng)記錄及備件清單的存放情況。2、技術特性2.1 備件品 名生產(chǎn)廠家數(shù)量存放處D2燈色譜柱維修工具2.2技術參數(shù)3、 一般狀況儀器的安裝是否符合要求（二） 功能試驗目的：確認該儀器達到技術要求。1 LC-05P高壓恒流泵1.1流量準確度可執(zhí)行標準：3%（以蒸餾水為標準）測試方法：將輸液系統(tǒng)、進樣器、色譜柱和檢測器連接好，以蒸餾水為流動相，將流速穩(wěn)定后，分別設定1.0、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0ml/min六段，在流動相排出口用已恒重的比重瓶收集流動相，同時計時收集10分鐘，稱重，查表，即得。流量設定值（ml/min）1.02.02.53.03.54.010分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量準確度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.2流量精確度可執(zhí)行標準：0.3%（0.997ml/min1.003ml/min，以蒸餾水為標準）測試方法：將輸液系統(tǒng)、進樣器、色譜柱和檢測器連接好，以蒸餾水為流動相，將流速穩(wěn)定后，設定流量為1.0ml/min，在流動相排出口用已恒重的比重瓶收集流動相，同時計時收集10分鐘，稱重，查表，即得，共收集5次。次數(shù)1234510分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量精確度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.3壓力范圍可執(zhí)行標準：0.2MPa+設定值測試方法：在進樣閥的出口接一個兩通，再將兩通的另外一端用OD1.6的盲管封住。啟動泵，使壓力升至所設定的壓力，觀察儀器是否自動停泵。設定值分別為：10.0Mpa、20.0Mpa、30.0Mpa結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日 2 LC-10UV紫外可見光液相色譜檢測器2.1噪聲與漂移可執(zhí)行標準：噪聲 1.010-4AU(250nm)， 漂移 5.010-4AU/hr測試方法：將儀器各部連接好，紫外檢測器調至250nm，流動相為甲醇，流速為1.0ml/min，待柱平衡穩(wěn)定后，進行基線的測試，測試時間半小時，觀察并記錄測試結果。測試圖譜見基線漂移測試。見圖譜(1)結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日2.2重復性(定性重復性及定量重復性)目的：考核儀器整體穩(wěn)定性能。可執(zhí)行標準：定性重復性RSD1%，定量重復性RSD2.0%測試方法：精密量取二甲苯和苯適量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋成每1ml含上述兩種物質都為0.002ml的溶液，搖勻；以甲醇為流動相，精密量取上述溶液20l 注入色譜儀中，連續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，計算，即得。見圖譜(2)-(6)A、定性重復性取兩組分保留時間差進行計算。次數(shù)12345組分1保留時間組分2保留時間組分1與組分2保留時間差RSDB、定量重復性取兩組分峰面積比進行計算。次數(shù)12345組分1峰面積組分2峰面積組分1與組分2峰面積比RSD結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日2.3最小檢出量可執(zhí)行標準：檢出量為1.010-8g/ml,以萘為樣品。測試方法：精密稱定萘適量用甲醇溶解并稀釋成1.010-6g/ml，以甲醇為流動相，精密量取20l注入色譜儀中，記錄色譜圖，測試結果見圖譜(7)。結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（三） 校正1、計量部門的校正（有關檢定證書）檢定單位：檢定證書編號：檢定日期： 年 月 日2、檢驗室的校正流量校正目的：對泵的流量進行校正。將儀器各部件聯(lián)好，以蒸餾水為流動相，用秒表計時10 分鐘，將流出液收集在已恒重的比重瓶里，稱重，查表，計算即得，結果如下表設定流量值 (ml/min)0.51.01.5測量次數(shù)333實際測量時間(min)101010收集液的重量(g)收集液的體積(ml)實際流量 (ml/min)結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（四） 適用性預試驗目的：檢查儀器在測試供試品的過程中，含量測定的相對偏差。可執(zhí)行標準：含量測定的相對偏差應不得過3.0%。檢驗項目：烏雞白鳳丸含量測定。 樣品批號：采用儀器：*分離科學技術公司LC-05P高效液相色譜儀。檢驗依據(jù)：中國藥典2005年版一部。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇水（33：67）為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計應不低于2000。 對照品溶液的制備 取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含40g的溶液，即得。 供試品溶液的制備 取烏雞白鳳丸小蜜丸，研細，取約5g，精密稱定，精密加入30乙醇25ml，稱定重量，時時振搖，靜置24小時，超聲處理30分鐘（功率300W，頻率50kHz），放冷，再稱定重量，加30%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5ml，通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑1.5cm，柱高12cm），用30乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用水5ml分次使溶解，轉移至25m1量瓶中，容器用甲醇適量多次洗滌，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20l，注入液相色譜儀，測定，即得供試品中芍藥苷（C23H28O11）的含量。 標示含量%=(ArCS)/(AiWr1000)100%式中：Ar、AI-分別為樣品與對照品峰面積； C-為對照品濃度。 Wr-為樣品重量（g）；S-為供試品稀釋倍數(shù)。樣品重（g）:(1) (2) (3)樣品與對照品峰面積見圖譜。計算：標示含量(1)標示含量(2)標示含量(3)計算相對偏差 允許偏差3.0%。結論：試驗者: 日期: 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（五） 再確認1、線路連接：檢查線路，接地等情況。2、儀器維護：清潔儀器內部和外部。3、檢查：色譜柱參數(shù)是否降低，潤滑是否良好。4、功能驗證：4.1 流量用比重瓶收集一定時間的流動相比較流量是否和設定值一致，如不一致則調整。4.2 紫外檢測器性能4.2.1 將儀器各部聯(lián)好，紫外檢測器波長調到250nm，流動相為甲醇，流速為1.0ml/min，穩(wěn)定后記錄基線3040分鐘，基線飄移5.010-4AU/hr，噪聲1.010-4AU。4.2.2 重復性精密量取二甲苯和苯適量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋成每1ml含上述兩種物質都為0.002ml的溶液，搖勻；以甲醇為流動相，精密量取上述溶液20l 注入色譜儀中，連續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，計算，即得。以此檢查儀器的定性重復性和定量重復性，定性重復性RSD1%，定量重復性RSD2.0%。4.2.3 最小檢出量精密稱定萘適量，用甲醇溶解并稀釋成1.010-8g/ml，以甲醇為流動相，精密量取20l的供試液注入色譜儀中，記錄色譜圖。5、工作日記：每次試驗均應作操作者、日期和儀器狀態(tài)的記錄。6、檢查周期：再確認項目周期1每年一次2每次試驗3每月一次4每年一次5每次試驗制訂人： 日期： 年 月 日目 錄概述一、驗證結果與小結（驗證記錄）（一）安裝確認1、資料檔案2、技術特性3、一般狀況（二）能性試驗（三）校正1、計量部門的校正2、檢驗室校正（四）適用性預試驗（五）再確認1、線路連接2、清潔3、檢查4、功能性試驗5、工作日記二、驗證結果及總體評價三、再驗證計劃四、確立的正式文件五、驗證報告的審查六、審批意見概述 年 月 日至 年 月 日檢驗儀器與方法驗證小組根據(jù)批準的LC-05P高效液相色譜儀驗證方案，對該儀器進行了安裝確認、校正、適用性預試驗、再確認等一系列驗證工作，現(xiàn)將驗證工作報告如下：一、驗證結果與小結（驗證記錄） （一）、安裝確認1資料檔案1.1概述本儀器用于公司新產(chǎn)品研制、開發(fā)、生產(chǎn)。為了確保使用該儀器檢測數(shù)據(jù)真實可靠，也為了確認該儀器的各項指標能達到該儀器所設計的性能指標，對該儀器進行了驗證。儀器名稱：高效液相色譜儀 儀器負責人：儀器型號：LC-05P 儀器編號：生產(chǎn)廠家：*分離科學技術公司儀器所在部門和房間：辦公、質檢樓三樓精密儀器室1.2資料檔案資料名稱檔案編號存放地點使用說明書 LC10液相色譜儀資料室合格證 LC10液相色譜儀資料室使用記錄 LC10液相色譜儀資料室維修保養(yǎng)記錄 LC10液相色譜儀資料室備件清單 LC10液相色譜儀資料室2技術特性2.1備件品 名生產(chǎn)廠家數(shù)量存放處D2燈色譜柱維修工具2.2技術參數(shù)流量范圍：0.01ml/min4.99ml/min(以0.01ml/min 增量調節(jié))流量準確度：3%（以蒸餾水為標準）流量精確度：0.3%（以蒸餾水為標準）壓力范圍：35.5Mpa(流量0.015ml/min)壓力脈動：0.05Mpa壓力顯示精度： 0.1Mpa光源：氘燈光路系統(tǒng)：雙光路光柵單色儀接收器：光電二級管波長范圍：190600nm波長精確度：1.0nm譜帶寬度：8 nm基線噪聲：1.010-4AU 基線漂移：5.010-4AU/hr最小檢測量：1.010-8g/ml（樣品為萘）3一般狀況儀器采購符合采購質量要求，安裝符合本公司GMP及供貨商提出的要求。（二）功能性試驗1 LC-05P高壓恒流泵1.1流量準確度可執(zhí)行標準：3%流量設定值（ml/min）1.02.02.53.03.54.010分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量準確度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.2流量精確度可執(zhí)行標準：0.3%（0.997ml/min1.003ml/min）次數(shù)1234510分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量穩(wěn)定度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.3壓力范圍可執(zhí)行標準:0.2MPa+設定值壓力設定值10.0MPa0.2MPa20.0MPa0.2MPa30.0MPa0.2MPa泵運行狀態(tài)結論:試驗者: 日期: 年 月 日復核者: 日期: 年 月 日 2 LC-10UN紫外可變波長檢測器2.1噪聲與漂移可執(zhí)行標準：噪聲 1.010-5AU(250nm)， 漂移 5.010-4AU/hr測試結果見圖譜(1)結論:試驗者: 日期: 年 月 日復核者: 日期: 年 月 日2.2重復性(定性重復性及定量重復性)可執(zhí)行標準:定性重復性RSD1%,定量重復性RSD2%A、定性重復性取兩組分保留時間差進行計算。次數(shù)12345組分1保留時間組分2保留時間組分1與組分2保留時間差RSDB、定量重復性取兩組分峰面積比進行計算。次數(shù)12345組分1峰面積組分2峰面積組分1與組分2峰面積比RSD結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日2.3最小檢出量可執(zhí)行標準：檢出量為1.010-8g/ml,以萘為樣品。測試結果見圖譜(7)結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（三）、校正1、計量部門的校正檢定單位：檢定證書編號：檢定日期：年月日2、檢驗室的校正流量校正流量設定值（ml/min）1.02.02.53.03.54.010分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量精度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（四）、適用性預試驗可執(zhí)行標準：含量測定的相對偏差應不得過3.0%檢驗項目：烏雞白鳳丸含量測定。 樣品批號：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇水（33：67）為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計應不低于2000。 對照品溶液的制備 取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含40g的溶液，即得。 供試品溶液的制備 取烏雞白鳳丸小蜜丸，研細，取約5g，精密稱定，精密加入30乙醇25ml，稱定重量，時時振搖，靜置24小時，超聲處理30分鐘（功率300W，頻率50kHz），放冷，再稱定重量，加30%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5ml，通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑1.5cm，柱高12cm），用30乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用水5ml分次使溶解，轉移至25m1量瓶中，容器用甲醇適量多次洗滌，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定，即得供試品中芍藥苷（C23H28O11）的含量。 標示含量%=(ArCS) /(AiWr1000)100%式中：Ar、AI-分別為樣品與對照品峰面積； Wr-為樣品重量（g）； C-為對照品濃度；S-為供試品稀釋倍數(shù)。樣品重（g）:(1) (2) (3)樣品與對照品峰面積見圖譜。計算：標示含量(1)標示含量(2)標示含量(3)計算相對偏差 允許偏差3.0%。結論：試驗者: 日期: 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日（五）、再確認1線路連接：檢查線路，接地。2清潔：清潔儀器外部3檢查:色譜柱參數(shù)是否降低，潤滑是否良好。4功能性試驗1 LC-05P高壓恒流泵1.1流量準確度可執(zhí)行標準：3%流量設定值（ml/min）1.02.02.53.03.54.010分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量準確度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.2流量精確度可執(zhí)行標準：0.3%（0.997ml/min1.003ml/min）次數(shù)1234510分鐘收集量（g）收集量計算查表后的體積(ml)實際每分鐘流出量（ml/min）流量穩(wěn)定度（%）結論：試驗者： 日期： 年 月 日復核者： 日期： 年 月 日1.3壓力范圍可執(zhí)行標準:0.2MP