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1 第十四講第十四講 生物技術(shù)實踐生物技術(shù)實踐 1 如圖表示蘆薈莖段的離體培養(yǎng)過程 請回答下列問題 1 植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基名稱為 從物理性質(zhì)來劃分屬于 培養(yǎng)基 2 培養(yǎng)基中都要加入一定的植物激素 在培養(yǎng)過程中 使用激素的 和比例都影響細胞的發(fā)育方向 細胞分裂素 生長素的比值 有利于根的 分化 3 A 步驟稱為 A 步驟前需要對蘆薈莖段進行 為確定培養(yǎng)基是否 滅菌徹底 檢測的方法是將未接種的培養(yǎng)基 下列是有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應用問題 請分析回答 1 如圖是利用 法進行微生物接種 把聚集 的菌種逐步 分散到培養(yǎng)基的表面 圖中右側(cè)手 執(zhí)的器具稱為 2 分析下面培養(yǎng)基的配方 NaNO3 KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4 7H2O KCl H2O 若 用于培養(yǎng)纖維素分解菌 應加入 物質(zhì) 為檢測纖維素分解菌的存在與否 還 應加入 染料 3 獲得的菌種如果需要長期保存 可以采用 的方法 2 2012 山東理綜 34 辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健 醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域 辣 椒素的獲得途徑如圖 2 1 圖中 和 分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的 和 過程 2 圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是 培養(yǎng)基中的生長素和細 胞分裂素用量的比值 填 高 或 低 時 有利于芽的分化 對培養(yǎng)基徹底 滅菌時 應采取的滅菌方法是 3 圖中外植體的消毒所需酒精的體積分數(shù)是 用酶解法將愈傷組織分離成單 細胞時 常用的酶是 和纖維素酶 4 提取辣椒素過程中 萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置 其目的是 3 現(xiàn)在大力提倡無紙化辦公 但是仍然不可避免的每年要產(chǎn)生大量的廢紙 其主要成分是 木質(zhì)纖維 人類正努力將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源 乙醇 下圖是工業(yè)上利用微生物用 纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工作流程 請回答相關(guān)問題 1 自然界中 環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在 的環(huán)境中 將從土壤中獲得的微 生物培養(yǎng)在以 為碳源 并加入 的培養(yǎng)基上篩選周圍有 的菌落 2 如上所述的篩選中獲得了三個菌落 對它們分別培養(yǎng) 并完成環(huán)節(jié) 且三種等量 酶液中酶蛋白濃度相同 則你認為三種酶液的活性 一定相同 不一定相同 一定不同 可以通過 進行 定量測定 3 根據(jù)測定結(jié)果 環(huán)節(jié)常選擇木霉 則 中獲得的酶是 酶 該酶至少包括 三個組分 4 生產(chǎn)中可以滿足 環(huán)節(jié)的常見菌種是 為了確保獲得產(chǎn)物乙醇 環(huán)節(jié)要 3 注意 過程要注意避免 5 該技術(shù)雖然有廣闊的前景 但存在酶的成本高等問題 為了降低成本主要從以下幾 方面入手改進該過程 首先要通過 等技術(shù)手段對產(chǎn)酶微生物改造 提 高酶的產(chǎn)量 其次 可利用 等技術(shù)使酶能夠重復利用 4 2011 浙江自選 楊梅是浙江省的特色水果之一 為對其進行深加工 某廠進行了楊梅 酒和楊梅醋的研制 基本工藝流程如圖 請回答下面的問題 1 在制備楊梅酒過程中 為了提高楊梅的出汁率 在壓榨前可加入一定濃度的纖維素 酶和 酶 甲罐頂上彎管中加水的主要目的是 發(fā)酵一定時間后 觀察 到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有 說明發(fā)酵基本完畢 2 在制備楊梅醋過程中 乙罐內(nèi)先填充經(jīng) 處理的木材刨花 然后加入含 菌的培養(yǎng)液 使該菌 在刨花上 再讓甲罐中發(fā)酵完畢的楊梅酒流入乙罐進行楊 梅醋發(fā)酵 楊梅醋的 pH 可通過控制楊梅酒的 來調(diào)節(jié) 3 若甲罐中的楊梅酒全部流經(jīng)乙罐制成楊梅醋 則乙罐中 CO2的產(chǎn)生量是 A 甲罐的兩倍 B 與甲罐的相等 C 甲罐的一半 D 幾乎為零 4 在楊梅酒和楊梅醋發(fā)酵的整個過程中 某物質(zhì)濃度隨時間變化的示意圖如下 該物 質(zhì)是 4 參考答案 1 1 MS 培養(yǎng)基 固體 2 順序 低 小 3 接種 消毒 放在 37 的恒 溫箱中培養(yǎng) 24 h 或放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時間 后觀察是否有菌落出現(xiàn) 1 平板劃線 稀釋 接種環(huán) 2 纖維素粉 剛果紅 3 甘油管藏 2 解析 本題以辣椒素的獲得途徑為情景綜合考查植物的組織培養(yǎng) 從生物材料中獲取某 些特定成分 酶的應用等基礎(chǔ)知識 1 植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵過程包括脫分化和再分化 即圖中 和 2 植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 其中的凝固劑為瓊脂 在 生長素 細胞分裂素比值低的培養(yǎng)基中 利于芽的分化 對培養(yǎng)基徹底滅菌采用的方法是 高壓蒸汽滅菌法 3 外植體消毒用的是 70 的酒精滅菌效果最好 將愈傷組織分離成單 個細胞所需要的酶是果膠酶和纖維素酶 4 辣椒素是一種易溶于有機溶劑的有機分子 萃取劑易揮發(fā) 所以安裝加熱冷凝裝置 防止有機溶劑的揮發(fā) 答案 1 脫分化 或去分化 再分化 2 瓊脂 低 高壓蒸汽滅菌 3 70 果膠酶 4 防止有機溶劑的揮發(fā) 3 解析 1 從富含纖維素的環(huán)境中可以獲得富含纖維素酶的微生物 這類微生物的純 化培養(yǎng)是以纖維素為碳源 通過加入剛果紅的培養(yǎng)基上篩選周圍有透明圈的菌落而獲得 2 由于三個菌落中的細菌數(shù)目可能不同或者產(chǎn)酶能力不同 從三個菌落中獲得三種等 量酶液中酶蛋白濃度相同 其活性也不一定相同 可以通過對纖維素酶分解纖維素后所 產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定來確定三種酶液的活性 3 木霉中產(chǎn)生的纖維素酶包括 Cl 酶 Cx酶 葡萄糖苷酶三個組分 4 生產(chǎn)中獲得乙醇的常見菌種是酵母菌 酵母菌在 無氧條件下進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精 因此生產(chǎn)中注意保證無氧條件 還要注意避免雜菌 的污染 5 為了降低成本首先要通過基因工程或基因突變等技術(shù)手段對產(chǎn)酶微生物進 行改造 提高酶的產(chǎn)量 其次 可利用固定化酶等技術(shù)使酶能夠重復利用 答案 1 富含纖維素 其他合理答案也可 如落葉較多等 纖維素 剛果紅 透明 5 圈 2 不一定相同 對纖維素酶催化纖維素分解后所產(chǎn)生的葡萄糖 3 纖維素 Cl酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 4 酵母菌 發(fā)酵裝置密閉 或保證無氧條件等 污染雜 菌 5 基因工程 基因突變 固定化酶 4 解析 1 纖維素酶和果膠酶具有專一性 能分解細胞壁中的纖維素和果膠 破壞細胞 壁 以提高出汁率 酒精發(fā)酵罐頂上彎管中加水是為了防止空氣進入 發(fā)酵一段時間后 發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡產(chǎn)生 說明發(fā)酵基本完畢 2 在制備楊梅醋過程中 醋酸發(fā)酵罐中填充的木材刨花要經(jīng)過滅菌 然后加入含有醋 酸桿菌的培養(yǎng)液 使該菌附著在刨花上 通過調(diào)節(jié)楊梅酒進入乙罐的流速來調(diào)節(jié)楊梅醋 的 pH
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