D值是指在一定溫度下.doc

D值是指在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時(shí)間。在一定滅菌條件下，不同微生物具有不同的D值；同一微生物在不同滅菌條件下，D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類(lèi)、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。Z值是指滅菌時(shí)間減少到原來(lái)的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時(shí)間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。 F值為在一定溫度（T）下，給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度（T0）下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)，所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間，以min為單位。F值常用于干熱滅菌。 F值的數(shù)學(xué)表達(dá)式如下：式中，t為測(cè)量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔，一般為0.51min，T為每個(gè)時(shí)間間隔t所測(cè)得被滅菌物溫度，T0為參比溫度。F0值為一定滅菌溫度（T）下，Z為10時(shí)所產(chǎn)生的滅菌效果與121，Z值為10所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（min）。也就是說(shuō)，不管溫度如何變化，t分鐘內(nèi)的滅菌效果相當(dāng)于在121下滅菌F0 分鐘的效果。 在濕熱滅菌時(shí)，參比溫度定為121，以嗜熱脂肪芽孢桿菌作為微生物指示菌，該菌在121時(shí)，Z值為10。則：顯然，即把各溫度下滅菌效果都轉(zhuǎn)化成121下滅菌的等效值。因此稱F0為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（min）。F0目前僅應(yīng)用于熱壓滅菌。干熱滅菌法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設(shè)備中、利用干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或消除熱原物質(zhì)的方法。適用于耐高溫但不宜用濕熱滅菌法滅菌的物品的滅菌，如玻璃器具、金屬制容器、纖維制品、固體試藥、液狀石蠟等均可采用本法滅菌。 干熱滅菌條件一般為160170120min以上、17018060min以上或25045min以上，也可采用其它溫度和時(shí)間參數(shù)?？傊瑧?yīng)保證滅菌后的產(chǎn)品其SAL10-6。干熱過(guò)度殺滅后產(chǎn)品的SAL應(yīng)10-12，此時(shí)物品一般無(wú)需進(jìn)行滅菌前污染微生物的測(cè)定。250 45min的干熱滅菌也可除去無(wú)菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。 采用干熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌b和裝載方式，保證滅菌的有效性和均一性。 干熱滅菌法驗(yàn)證與濕熱滅菌法相同，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)、生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)或細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)。以確認(rèn)滅菌柜中的溫度分布符合設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)、確定最冷點(diǎn)位置、確認(rèn)最冷點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（FH）能達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)并達(dá)到SAL要求。常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis)。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)是證明除熱原過(guò)程有效性的試驗(yàn)。一般將不小于1000單位的細(xì)菌內(nèi)毒素加入待去熱原的物品中，證明該去熱原工藝能使內(nèi)毒素至少下降3個(gè)對(duì)數(shù)單位。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)所用的細(xì)菌內(nèi)毒素一般為大腸桿菌內(nèi)毒素（Escherichia coli endoxin）。驗(yàn)證時(shí)，一般采用最大裝載方式。注射劑2008新法規(guī)解析及應(yīng)對(duì)方案系列培訓(xùn)班注射制劑無(wú)菌保證工藝技術(shù)要求的探討注射制劑無(wú)菌保證工藝技術(shù)要求一、 前言二、注射劑基本技術(shù)的要求三、無(wú)菌保證工藝研究與驗(yàn)證要求 四、無(wú)菌藥品生產(chǎn)關(guān)鍵工藝的法規(guī)要求 (以最終濕熱滅菌藥品工藝為例)一、前 言1970年1975年，美國(guó)因輸液污染所導(dǎo)致的并發(fā)敗血癥事件有400多起，這在美國(guó)國(guó)內(nèi)引起強(qiáng)烈的反響。FDA從1975年開(kāi)始進(jìn)行了深入、廣泛的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)這些事件并不是出于企業(yè)違規(guī)生產(chǎn)，而是整個(gè)生產(chǎn)體系中的不穩(wěn)定因素所致。 此后，F(xiàn)DA于1976年首次將驗(yàn)證列入GMP。承認(rèn)在無(wú)保證系統(tǒng)中，過(guò)程控制優(yōu)于結(jié)果檢驗(yàn)。 30多年過(guò)去了，注射劑染菌所致的藥難事件降臨我國(guó)，“欣弗”事件使得無(wú)菌制劑的無(wú)菌保障問(wèn)題成為公眾關(guān)注的焦點(diǎn)。 -無(wú)菌檢查的局限性-研究無(wú)菌保證的途徑面臨的主要問(wèn)題劑型選擇不合理 無(wú)菌保證工藝選擇不合理無(wú)菌保證工藝研究不全面無(wú)菌保證工藝缺乏必要的驗(yàn)證GMP與發(fā)達(dá)國(guó)家要求還存在差距 整頓和規(guī)范藥品研制、生產(chǎn)、流通秩序工作方案（國(guó)食藥監(jiān)辦2006465號(hào)）要求:嚴(yán)格審評(píng)審批化學(xué)藥品注射劑、中藥注射劑和多組分生化注射劑等安全性風(fēng)險(xiǎn)較大的3類(lèi)品種。二、 注射劑基本技術(shù)的要求審評(píng)審批要求:一、國(guó)家局已受理但尚未批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑和多組分生化藥注射劑應(yīng)參照技術(shù)要求進(jìn)行研究。二、已經(jīng)批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑和多組分生化藥注射劑也應(yīng)參照技術(shù)要求進(jìn)行相關(guān)研究，并在申報(bào)再注冊(cè)時(shí)提供相關(guān)研究資料。三、對(duì)已上市化學(xué)藥品注射劑、多組分生化藥注射劑進(jìn)行仿制、改變劑型或者改變給藥途徑研究時(shí)，研究者應(yīng)當(dāng)慎重考慮已上市品種的研究基礎(chǔ)。以化學(xué)藥品注射劑為例:一、化學(xué)藥品注射劑劑型選擇的必要性、合理性二、化學(xué)藥品注射劑規(guī)格的合理性、必要性三、化學(xué)藥品注射劑原、輔料質(zhì)量控制及來(lái)源四、化學(xué)藥品注射劑處方及制備工藝合理性、可行性研究，特別是滅菌工藝的選擇及驗(yàn)證研究、工藝穩(wěn)定性研究等五、化學(xué)藥品注射劑質(zhì)量研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂 六、化學(xué)藥品注射劑穩(wěn)定性研究 七、化學(xué)藥品注射劑非臨床安全性評(píng)價(jià)的技術(shù)要求 八、化學(xué)藥品注射劑臨床研究技術(shù)要求 九、仿制化學(xué)藥品注射劑的技術(shù)要求 十、化學(xué)藥品注射劑說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽內(nèi)容的技術(shù)要求 本講座主要探討無(wú)菌保證工藝研究及評(píng)價(jià)包括： 制備工藝的選擇 工藝參數(shù)的確定 工藝的驗(yàn)證 注射劑滅菌工藝及其驗(yàn)證三、無(wú)菌保證工藝研究與驗(yàn)證要求1. 最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平規(guī)定為:微生物污染概率不超過(guò)百萬(wàn)分之一2.采用無(wú)菌生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品:其無(wú)菌保證水平為微生物污染概率不超過(guò)千分之一3.與產(chǎn)品無(wú)菌保證相關(guān)的影響因素環(huán)境廠房、設(shè)備原材料（原輔料、包裝材料）無(wú)菌保證工藝生產(chǎn)過(guò)程控制人員衛(wèi)生4.滅菌方法選擇按歐盟1999年8月正式開(kāi)始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹(shù)決策樹(shù)的作用是在考慮各種復(fù)雜因素的情況下輔助選擇最佳的滅菌方法凡是可以最終滅菌的產(chǎn)品務(wù)必要最終滅菌2.3. 決策樹(shù)越往下，風(fēng)險(xiǎn)越大需要提供的必要證據(jù)越多5.基本原則:無(wú)菌產(chǎn)品應(yīng)在灌裝到最終容器后進(jìn)行最終滅菌（首選）如因產(chǎn)品對(duì)熱不穩(wěn)定不能進(jìn)行最終滅菌時(shí)，可采用最終滅菌方法的替代方法-過(guò)濾除菌和/或無(wú)菌生產(chǎn)工藝（退而求其次）同時(shí)明確如下要求：無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)，首先應(yīng)根據(jù)特定的處方選擇最佳的滅菌方法，然后再選擇包裝材料使用熱不穩(wěn)定的包裝材料不能作為選擇無(wú)菌生產(chǎn)工藝的理由因其他因素選擇的包裝容器不能進(jìn)行最終滅菌，藥品生產(chǎn)企業(yè)仍有責(zé)任不斷尋找可接受的替代容器，使得產(chǎn)品可以在可接受的時(shí)間范圍內(nèi)采用最終滅菌的方法 任何商業(yè)考慮均不能作為不使用具有最高無(wú)菌保證水平的最終滅菌方法的理由常用的滅菌方式及其無(wú)菌保證水平1、過(guò)度殺滅法 微生物殘存概率10-62、殘存概率法 微生物殘存概率10-63、無(wú)菌生產(chǎn)工藝 無(wú)菌保證一般只能達(dá)到10-3水平4. 最終滅菌工藝的驗(yàn)證要求最終滅菌工藝：過(guò)度殺滅法（ Fo12） 殘存概率法（8 Fo12）目標(biāo)：滅菌后的微生物殘存概率10-6 過(guò)度殺滅設(shè)計(jì)方法：一種滅菌設(shè)計(jì)方法，只需要最少的關(guān)于產(chǎn)品生物負(fù)載的信息。最差條件的生物負(fù)載猜測(cè)用來(lái)確定所產(chǎn)生的殺滅力需要獲得滅菌物上的PNSU為10-6。在使用這個(gè)方法時(shí)，確效計(jì)劃必須證明FBIO和FPHY都大于12分鐘。5. 殘存概率法：一種滅菌設(shè)計(jì)方法，當(dāng)所產(chǎn)生的殺滅力需要達(dá)到PNSU為10-6時(shí)，以（滅菌物品上或內(nèi)的）生物負(fù)載的特性和產(chǎn)品對(duì)熱的敏感度為基礎(chǔ)。應(yīng)產(chǎn)品而定的設(shè)計(jì)方法工藝驗(yàn)證要求：過(guò)度殺滅法和殘存概率法均應(yīng)進(jìn)行工藝驗(yàn)證 驗(yàn)證內(nèi)容：空載熱分布 滿載熱分布 熱穿透試驗(yàn) 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)（殘存概率法）滅菌前微生物污染水平-數(shù)量和耐熱性 -過(guò)程控制6. 熱力滅菌的動(dòng)力學(xué)原理微生物耐熱參數(shù) （D值）溫度系數(shù) Z值FT 值 T滅菌時(shí)間F0 值標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間無(wú)菌保證值（SAL）滅菌率L對(duì)數(shù)規(guī)則：Arrhenius 質(zhì)量作用定律 濕熱滅菌的對(duì)數(shù)規(guī)則始于1921年Bigeow發(fā)表的論文-用對(duì)數(shù)規(guī)則闡述滅菌工藝過(guò)程，他認(rèn)為，滅菌過(guò)程可以用阿倫尼烏斯的一級(jí)反應(yīng)式來(lái)描述。根據(jù)質(zhì)量作用定律，在恒定溫度及保持其它條件不變的情況下，單位時(shí)間內(nèi)被殺滅的微生物數(shù)正比于t0時(shí)原有的數(shù)目，即： dN/dtK(N0Nk) 式中：N0為t0時(shí)，存活的微生物數(shù)； Nk為t時(shí)被殺滅的微生物數(shù)； N為t時(shí)存活的微生物數(shù)。由此得出，滅菌時(shí)微生物的死亡遵循對(duì)數(shù)規(guī)則。7. 微生物存活數(shù)與滅菌時(shí)間關(guān)系圖8. 微生物耐熱參數(shù)（D值）:D值是指在特定滅菌條件下，使微生物數(shù)量下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位或殺滅90%所需要的時(shí)間（分鐘）。9. 滅菌溫度系數(shù)（Z值）: Z 值系指使某一種微生物的D 值變化一個(gè)對(duì)數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高或下降的度數(shù). 在沒(méi)有特定要求時(shí) : 濕熱滅菌條件下Z值通常取10； 干熱滅菌條件下Z值通常取20； 干熱去熱原時(shí)Z值通常取54。FT 值T(): 滅菌時(shí)間FT 值指T()滅菌值，系指一個(gè)給定Z 值下，滅菌程序在溫度T()下的等效滅菌時(shí)間。 FTDTlgN式中:DT 為在T()下微生物的D 值；lgN 為T(mén)()下滅菌程序使微生物數(shù)下降的對(duì)數(shù)單位數(shù)。F0值: 標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（用于濕熱滅菌），系滅菌過(guò)程賦予待滅菌物品在121下的等效滅菌時(shí)間（分鐘）。FH值: 標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（用于干熱滅菌），系滅菌過(guò)程賦予待滅菌物品在170下的等效滅菌時(shí)間（分鐘）。滅菌率L： L 指在某一溫度T()下滅菌lmin 所獲得的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。L=10 (Ti-TR) /Z Ti滅菌溫度 TR標(biāo)準(zhǔn)參照溫度 Z 微生物死亡率常數(shù)10.11. 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 生物指示劑-簡(jiǎn)稱為BI（biological indicator）:是對(duì)特定滅菌工藝具有一定耐受性并且能夠定量測(cè)定滅菌效力的微生物制劑，適用于制備生物指示劑的微生物多為芽胞類(lèi)細(xì)菌，這是因?yàn)?，除輻射滅菌外，芽胞?lèi)細(xì)菌比常規(guī)的生長(zhǎng)態(tài)微生物對(duì)滅菌工藝具有更強(qiáng)的耐受性。生物指示劑既可用來(lái)測(cè)定一個(gè)給定的滅菌工藝條件的滅菌效果，也可判別它是否符合無(wú)菌保證要求。12. 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 所謂濕熱滅菌工藝的生物指示劑微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)，系指將一定量已知D值的耐熱孢子接入被滅菌的產(chǎn)品中，在設(shè)定的濕熱滅菌條件下滅菌，以驗(yàn)證設(shè)定的滅菌工藝是否確實(shí)能賦予產(chǎn)品所需的SAL 為106而進(jìn)行的試驗(yàn)及評(píng)價(jià)過(guò)程。13. 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) USP和BP對(duì)這方面有專門(mén)的論述。一般說(shuō)來(lái)，對(duì)生物指示劑選擇的原則性要求是： 孢子（菌株）穩(wěn)定 耐熱性強(qiáng)于被滅菌物品中常見(jiàn)的污染菌 系非致病菌 易于培養(yǎng)，孢子萌發(fā)率要在90%以上 有效期長(zhǎng) 保存及使用方便 安全性好14. 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 濕熱滅菌工藝驗(yàn)證用生物指示劑的來(lái)源主要有兩類(lèi): 一類(lèi)是采用標(biāo)準(zhǔn)生物指示劑，這類(lèi)生物指示劑可從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)； 另一類(lèi)需用從日常生產(chǎn)污染菌監(jiān)控分離出的最耐熱微生物孢子制備，并測(cè)得相關(guān)參數(shù)（最佳生長(zhǎng)條件、耐熱性等）后方可使用。 15. 濕熱滅菌工藝驗(yàn)證中常用的生物指示劑 菌 種 名 稱常規(guī)D121值/min嗜熱脂肪芽胞桿菌 Bacillus stereatherno philus1.53.0枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis ATCC52300.30.7凝結(jié)芽胞桿菌 Bacillus coagulans0.40.8梭狀芽胞桿菌 Clostridium sporogenes0.40.8例: 國(guó)產(chǎn)非治病性嗜熱肪芽胞菌芽胞（ATCC 7953） D值-D121值1.74存活時(shí)間- 121oC飽和蒸汽下, 存活時(shí)間不 少于3.9分鐘死亡時(shí)間- 121oC飽和蒸汽下, 死亡時(shí)間不 少于19分鐘孢子量- 5105-6cfu/支16使用方法: 將生物指示劑和被滅菌物品一起放置在滅菌柜（鍋）內(nèi)，上、中層、中央和排氣口（冷點(diǎn)處）滅菌后取出，然后直接置于56 60 oC培養(yǎng)24 48小時(shí)，并另取一支未經(jīng)滅菌生物指示劑一起培養(yǎng)，作為陽(yáng)性對(duì)照。結(jié)果判斷: 根據(jù)顏色判斷滅菌效果，培養(yǎng)后全部保持紫色滅菌合格。若由紫色變?yōu)辄S色判為滅菌不合格。對(duì)照管應(yīng)紫變黃色為該指示劑有效。例: 進(jìn)口3MTMATTESTTM (1262) 蒸汽滅菌生物培養(yǎng)指示劑(嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片) 在121飽和蒸汽條件下，存活時(shí)間大于或等于5分鐘，殺滅時(shí)間小于或等于15分鐘。 滅菌完畢，取出生物指示劑后至少冷卻10分鐘以上，方可擠破生物指示劑內(nèi)安瓿。否則有可能導(dǎo)致安瓿的碎片傷人。 只有對(duì)照管為陽(yáng)性，其生物結(jié)果才算有效。使用方法1、將壓力蒸汽滅菌生物培養(yǎng)指示劑放于一標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包中；2、按照國(guó)家規(guī)范，分別將測(cè)試包放于鍋內(nèi)不同位置；3、滅菌完畢，取出生物指示劑；4、擠破內(nèi)含的安瓿，與一支對(duì)照管一起放于56培養(yǎng)鍋培養(yǎng)；5、48小時(shí)后，閱讀結(jié)果。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)挑戰(zhàn)試驗(yàn)合格標(biāo)準(zhǔn) 生物指示劑的選用應(yīng)構(gòu)成挑戰(zhàn)性的必要條件：可用藥典，如USP中規(guī)定的生物指示劑；對(duì)存活概率滅菌程序的產(chǎn)品而言，應(yīng)當(dāng)強(qiáng)調(diào)，所用生物指示劑的耐熱性應(yīng)大于產(chǎn)品中常見(jiàn)污染菌的耐熱性，生物指示劑的用量也應(yīng)大于產(chǎn)品中該污染菌的水平。 經(jīng)生物指示劑驗(yàn)證后，應(yīng)能證明在設(shè)定的F0條件下，產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平低于10-6。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)方案制訂 制訂驗(yàn)證方案時(shí)，應(yīng)當(dāng)綜合考慮相關(guān)法規(guī)要求、滅菌熱分布及熱穿透試驗(yàn)數(shù)據(jù)、產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性、日常生產(chǎn)監(jiān)控中所獲得的滅菌前產(chǎn)品中的微生物污染水平和污染菌的耐熱性數(shù)據(jù)。方案還包括驗(yàn)證記錄的各種表格。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)濕熱滅菌程序通常分為兩類(lèi)： 過(guò)度殺滅程序（Overkill Design Approach） 殘存概率程序（Product-Specific Design Approach ）微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)挑戰(zhàn)試驗(yàn)(生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn) ): 生物指示劑的裝載 滅菌 檢查和培養(yǎng) 結(jié)果評(píng)價(jià) 驗(yàn)證試驗(yàn)的頻率 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 作為一項(xiàng)生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，盡管生物指示劑驗(yàn)證不能替代物理驗(yàn)證，但它能如實(shí)反映滅菌工藝條件對(duì)微生物的殺滅效果，從而證明該滅菌工藝所賦予相關(guān)產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平是否符合要求。生產(chǎn)指示劑在試驗(yàn)中扮演了各種可能因素造成的產(chǎn)品中的“污染菌”的角色，以這種方式進(jìn)行的驗(yàn)證更切合實(shí)際，更能說(shuō)明所設(shè)定的滅菌程序是否安全。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 對(duì)熱穩(wěn)定性很好的產(chǎn)品而言，通常采用過(guò)度殺滅程序，該程序能賦予產(chǎn)品足夠大的安全系數(shù)，使在121下D值約為1.0min的細(xì)菌孢子至少下降12個(gè)對(duì)數(shù)單位。在過(guò)度殺滅程序的一半時(shí)間時(shí)，可使該孢子至少下降6個(gè)對(duì)數(shù)單位。由于殺滅微生物孢子（生物指示劑）的滅菌條件極為苛刻，因此，從滅菌程序的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0來(lái)看，毋須擔(dān)心產(chǎn)品滅菌后的無(wú)菌保證問(wèn)題。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) 并不是所有的滅菌程序都可進(jìn)行生物指示劑驗(yàn)證。有些產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性相當(dāng)差，滅菌溫度僅能控制在100左右，整個(gè)滅菌程序的F0值還不到1min，對(duì)此類(lèi)程序進(jìn)行生物指示劑驗(yàn)證就沒(méi)有太多的意義。此類(lèi)產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平主要是通過(guò)無(wú)菌生產(chǎn)工藝來(lái)實(shí)現(xiàn)，滅菌僅能作為提高產(chǎn)品無(wú)菌保證水平的手段。微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn) WHO GMP中強(qiáng)調(diào)，化學(xué)或生物指示劑可用于滅菌過(guò)程的監(jiān)控，但不得代替物理監(jiān)控（溫度、時(shí)間）。 FDA均認(rèn)為生物指示劑驗(yàn)證并不能取代物理驗(yàn)證，這是由生物指示劑驗(yàn)證的復(fù)雜性所決定的。Dry heat sterilization D value isF值為在一定溫度（T）下，給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度（T0）下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)，所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間，以min為單位。F值常用于干熱滅菌。 F值的數(shù)學(xué)表達(dá)式如下： 式中，t為測(cè)量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔，一般為0.51min，T為每個(gè)時(shí)間間隔t所測(cè)得被滅菌物溫度，T0為參比溫度。Z值是指滅菌時(shí)間減少到原來(lái)的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時(shí)間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。1.將指示劑與待滅菌的物品一同放入滅菌器內(nèi)，一同滅菌。2.滅菌結(jié)束后，取出指示劑，待冷卻（約15分鐘）后，將蓋子按下以密封塑料管。3.用所提供的工具擠壓塑料管，使安培瓶破裂，培養(yǎng)基溢出，與紙片接觸。4.置于56攝氏度培養(yǎng)，定時(shí)觀察生長(zhǎng)情況5.48小時(shí)內(nèi)出結(jié)果D值是指在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時(shí)間。在一定滅菌條件下，不同微生物具有不同的D值；同一微生物在不同滅菌條件下，D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類(lèi)、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。F0值為一定滅菌溫度（T）下，Z為10時(shí)所產(chǎn)生的滅菌效果與121，Z值為10所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（min）。也就是說(shuō)，不管溫度如何變化，t分鐘內(nèi)的滅菌效果相當(dāng)于在121下滅菌F0 分鐘的效果。 在濕熱滅菌時(shí)，參比溫度定為121，以嗜熱脂肪芽孢桿菌作為微生物指示菌，該菌在121時(shí)，Z值為10。則：顯然，即把各溫度下滅菌效果都轉(zhuǎn)化成121下滅菌的等效值。因此稱F0為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（min）。F0目前僅應(yīng)用于熱壓滅菌。2、什么是化學(xué)滅菌法，分為哪幾類(lèi)，有何應(yīng)用特點(diǎn)？ 答：化學(xué)滅菌法系指用化學(xué)藥品殺死微生物的方法。 化學(xué)滅菌法分為：氣體滅菌法：有環(huán)氧乙烷、臭氧、過(guò)氧乙酸、甲醛、丙二醇、乳酸等。以環(huán)氧乙烷最為常用。氣體滅菌法用于塑料容器、玻璃制品、金屬制品等表面，設(shè)備表面，室內(nèi)空氣的滅菌，也可用于包裝紙箱，注射針、筒，衣著敷料，紙或塑料包裝的藥物的滅菌?；瘜W(xué)滅菌劑滅菌法：常用的有0.10.2的新潔爾滅溶液，2左右的酚或甲酚皂液，75的乙醇液等。主要作為物體表面，無(wú)菌室墻面、地面、臺(tái)面等的消毒。17、物理滅菌法可分為哪幾類(lèi)，各有何應(yīng)用特點(diǎn)？ 答：物理滅菌法可分為干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過(guò)濾滅菌法。射線滅菌法。 1)干熱滅菌法是一種利用干熱空氣進(jìn)行滅菌的方法。分為火焰滅菌法和干熱空氣滅菌法，火焰滅菌法適于耐火焰材料的滅菌，如金屬、玻璃及瓷器等。干熱空氣滅菌法適于耐高溫的玻璃器具、金屬容器、耐高溫的藥物粉末及不允許濕氣穿透的油性物質(zhì)(如油脂性軟膏基質(zhì)、注射用油等)的滅菌，不適于橡膠、塑料及大部分藥品。 2)濕熱滅菌法分為熱壓滅菌法、流通蒸氣滅菌法、煮沸滅菌法和低溫間歇滅菌法。熱壓滅菌法時(shí)濕熱滅菌中最可靠的方法，適用于耐熱壓滅菌的藥物、玻璃器皿、金屬容器、瓷器、橡膠塞、濾膜過(guò)濾器、醫(yī)院手術(shù)用品等的滅菌。流通蒸氣滅菌法與煮沸滅菌法均不能保證殺死所有的耐熱芽孢，適用于必須加熱滅菌，但不耐高溫的藥物。低溫間歇滅菌只能殺死