出口蛋及蛋制品中六六六、滴滴涕的殘留量檢驗(yàn)方法.doc

MM_FS_CNJ_0249出口蛋 蛋制品 六六六 滴滴涕 殘留量 氣相色譜法MM_FS_CNJ_0249出口蛋及蛋制品中六六六、滴滴涕的殘留量檢驗(yàn)方法1.適用范圍本方法適用于出口鮮蛋、皮蛋、鹽蛋中六六六、滴滴涕殘留量的檢驗(yàn)。2.原理概要試樣用無(wú)水硫酸鈉研磨成干粉后，移入濾紙筒內(nèi)，置于脂肪提取器內(nèi)，用丙酮或丙酮-石油醚回流提取農(nóng)藥。提取液用濃硫酸凈化，凈化液經(jīng)濃縮后，用氣相色譜電子俘獲檢測(cè)器測(cè)定。3.主要試劑和儀器3.1.主要試劑丙酮：分析純，重蒸餾；石油醚：重蒸餾，收集6575餾分。取300mL用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至5mL，在與測(cè)定方法相同的色譜條件下，取5L進(jìn)行色譜測(cè)定，應(yīng)無(wú)石油醚以外的干擾欲測(cè)物的雜峰；蒸餾水：取蒸餾水100mL，用石油醚10mL提取，在與測(cè)定方法相同的色譜條件下，取5L提取液進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)無(wú)石油醚以外的干擾欲測(cè)物的雜峰；無(wú)水硫酸鈉：分析純，在650灼燒4h，貯于密封容器中；硫酸鈉水溶液(20g/L)：溶20g灼燒過(guò)的無(wú)水硫酸鈉于蒸餾水中，稀釋至1L；濃硫酸：分析純；濾紙筒：用丙酮-石油醚(28)混合液100mL在脂肪提取器中，提取8h后備用；環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)物和農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品純度大于99%以上；內(nèi)標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液和農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱(chēng)取適量環(huán)氧七氯、甲體-六六六、乙體-六六六、丙體-六六六、丁體-六六六、對(duì)，對(duì)-滴滴依、鄰，對(duì)-滴滴涕、對(duì)，對(duì)-滴滴滴、對(duì)，對(duì)-滴滴涕。用少量苯溶解，然后用石油醚分別配制成0.1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。根據(jù)需要再配制成適用濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和內(nèi)標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，以及含內(nèi)標(biāo)物的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。注：如果樣品中存在環(huán)氧七氯，可選其他內(nèi)標(biāo)物。3.2.儀器氣相色譜儀并配備有電子俘獲檢測(cè)器；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；脂肪提取器：150mL；高速組織搗碎機(jī)；具磨口塞試管：10mL；微量注射器：1L和5L；分液漏斗：250mL、500mL；無(wú)水硫酸鈉柱：筒形漏斗內(nèi)裝5cm高無(wú)水硫酸鈉。4.試樣的抽取與制備4.1.檢驗(yàn)批鮮蛋、皮蛋和鹽蛋，都以不超過(guò)50件為一檢驗(yàn)批，同一檢驗(yàn)批的商品應(yīng)具有同一的特征，如包裝、標(biāo)記、產(chǎn)地、批次、級(jí)別等。4.2.樣本大小a 鮮蛋批量(件)最低抽取數(shù)(件)25以下32610051012501025015B 皮蛋和鹽蛋批量(件)最低抽取數(shù)(件)50件以下350件以上每增加50件增抽1件，尾數(shù)不足500件，以50件計(jì)。4.3.抽樣工具和方法鮮蛋、皮蛋和鹽蛋在抽取件數(shù)中，每件隨機(jī)抽取510枚作為原始樣品。4.4.試樣的制備鮮蛋或鹽蛋：將所取樣品去殼后置于打蛋機(jī)內(nèi)混勻。皮蛋：去殼后取全部或每個(gè)的部分、切碎，置于搗碎機(jī)中搗碎。鮮蛋或鹽蛋取混勻液500g，皮蛋用四分法縮分至500g。各分為二份置于清潔廣口玻璃瓶中。作為試樣和復(fù)驗(yàn)試樣，密封，填寫(xiě)標(biāo)簽，注明品名、日期、垛位、報(bào)驗(yàn)號(hào)、申請(qǐng)單位、抽樣人等。4.5.樣品保存試樣制備后，不是當(dāng)日檢驗(yàn)，應(yīng)18冷凍藏保存。注：制樣過(guò)程中防止樣品受到污染或發(fā)生任何變化。5.過(guò)程簡(jiǎn)述5.1.提取稱(chēng)取試樣鮮蛋10.0g；皮蛋或鹽蛋5.0g于150mL燒杯內(nèi)。鮮蛋試樣加無(wú)水硫酸鈉30g；皮蛋或鹽蛋試樣加無(wú)水硫酸鈉20g，用玻璃棒攪拌使成干粉狀。轉(zhuǎn)入濾紙筒內(nèi)，將濾紙筒放入脂肪提取器中，鮮蛋試樣用100mL丙酮；皮蛋或鹽蛋試樣用100mL丙酮-石油醚(28)分多次洗滌燒杯和玻璃棒，將洗液倒入濾紙筒內(nèi)，最后將全部有機(jī)溶劑通過(guò)濾紙筒放入脂肪提取器中。接上冷凝管，在水浴上回流(810次/h)提取。鮮蛋試樣2h，皮蛋或鹽蛋試樣需8h。取出濾紙筒，然后將提取液濃縮至2030mL，然后轉(zhuǎn)移至500mL分液漏斗(皮蛋或鹽蛋試樣用250mL分液漏斗)。鮮蛋試樣用40mL石油醚；皮蛋或鹽蛋試樣用20mL石油醚，分多次洗滌脂肪提取器接受瓶，并將洗液與提取液合并。加硫酸鈉水溶液250mL(皮蛋或鹽蛋試樣不需這一步操作)振搖后將水溶液放入另一分液漏斗。再用60mL石油醚分兩次提取水溶液中農(nóng)藥，合并提取液。5.2.凈化向分液漏斗內(nèi)的提取液滴加濃硫酸(用量為提取液與濃硫酸之比(101)(V/V)輕輕振搖數(shù)次，靜置至分層，棄去硫酸層，然后按上述操作重復(fù)凈化12次(直至酸液呈淺黃色)棄去硫酸層。加100mL硫酸鈉水溶液于分液漏斗內(nèi)，加塞輕輕振搖數(shù)次，靜置至分層后棄去水相。再按上述操作重復(fù)洗滌1次。將凈化后的有機(jī)相通過(guò)內(nèi)裝約10g無(wú)水硫酸鈉的筒形漏斗脫水后進(jìn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器盛液瓶?jī)?nèi)，然后與旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器連接，在50水浴中減壓濃縮至近干，混勻，冷卻，以石油醚定容，供氣相色譜測(cè)定用。5.3.測(cè)定5.3.1.色譜條件色譜柱：玻璃柱，2m2.5mm(內(nèi)徑)，填充物1.5%(m/m)OV-172%(m/m)QF-1混合液，涂于Chromosorb W AW-DMCS(80100目)；載氣：高純氮，純度99.99%，50mL/min；柱溫：190；進(jìn)樣口溫度：230；檢測(cè)器溫度：250。5.3.2.色譜測(cè)定準(zhǔn)確地取適量的凈化液，根據(jù)樣液中農(nóng)藥含量進(jìn)行濃縮或稀釋?zhuān)考尤雰?nèi)標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后取與樣液中濃度接近的含內(nèi)標(biāo)物的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液與樣液同時(shí)進(jìn)行色譜測(cè)定。注： 組分出峰順序?yàn)椋杭左w六六六、丙體六六六、乙體六六六、丁體六六六、環(huán)氧七氯(內(nèi)標(biāo)物)、對(duì)，對(duì)-滴滴依、鄰，對(duì)-滴滴涕、對(duì)，對(duì)-滴滴滴、對(duì)，對(duì)-滴滴涕。 含內(nèi)標(biāo)物混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液及樣液中農(nóng)藥內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)值，均應(yīng)在儀器線(xiàn)性范圍內(nèi)。5.4.空白試驗(yàn)按上述測(cè)定步驟進(jìn)行試劑空白試驗(yàn)。6.結(jié)果計(jì)算用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)計(jì)算各種農(nóng)藥殘留量，也可按下式分別計(jì)算：xhccihchi式中：x 樣液中農(nóng)藥某組分殘留量，mg/kg；h 樣液中農(nóng)藥的峰高，mm；h 含內(nèi)標(biāo)物混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中農(nóng)藥中農(nóng)藥的峰高，mm；hi 樣液中內(nèi)標(biāo)物的峰高，mm； 含內(nèi)標(biāo)物混合農(nóng)