實(shí)驗(yàn)一 722型分光光度計(jì)的性能檢查.doc

實(shí)驗(yàn)一 722型分光光度計(jì)的性能檢查一、 目的1、 了解722型分光光度計(jì)的性能2、 熟悉儀器的技術(shù)指標(biāo)及一般檢查方法3、 掌握儀器的正確使用方法二、 原理722型分光光度計(jì)是采用單光束自準(zhǔn)式光路，色散元件為衍射光柵，能在近紫外，可見光譜內(nèi)對(duì)樣品進(jìn)行分析，根據(jù)被測(cè)物質(zhì)在可見光區(qū)范圍內(nèi)（360800nm）吸收特性及吸光的程度（吸光定律：A=-lgT=bc）對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量測(cè)定的儀器。為保證分析的靈敏度和準(zhǔn)確性，國(guó)家計(jì)量局規(guī)定：對(duì)儀器應(yīng)定期進(jìn)行檢查，檢查周期為一年。檢查的主要技術(shù)項(xiàng)目有：儀器外觀、波長(zhǎng)精密度和重現(xiàn)型、分辨率、吸收值精密和儀器的線型范圍。對(duì)于符合閉耳定律的溶液測(cè)量時(shí)溶液的濃度與吸光值之間有良好的線性；一套比色皿之間應(yīng)互相匹配以及儀器的絕緣等。上述各項(xiàng)性能應(yīng)符合儀器所規(guī)定的技術(shù)指標(biāo)（見操作步驟），本實(shí)驗(yàn)采用規(guī)定方法對(duì)上述各項(xiàng)目進(jìn)行檢查。 三、試劑和器皿1、 K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液：1mgml-12、 CoCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液：10mgml-13、 CuSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液：10mgml-14、 0.1mol/LHCl5、 0.05mol/LH2SO46、 4只比色皿、10支10ml比色管、1支2ml移液管和4支10ml移液管四、 實(shí)驗(yàn)步驟1、 儀器外觀檢查 儀器所有緊固件應(yīng)緊固良好，各調(diào)節(jié)器能正常工作，儀器之余平穩(wěn)工作臺(tái)上操作時(shí)不得有擺動(dòng)現(xiàn)象，比色皿座應(yīng)推動(dòng)自如，無(wú)松動(dòng)、卡住的現(xiàn)象。光束透過(guò)各透光孔應(yīng)暢通無(wú)阻。儀器所配比色皿的透光面應(yīng)光潔，無(wú)表面刮痕、擦毛和斑點(diǎn)，任何一面不得有裂紋。2、 波長(zhǎng)精度的檢查 在波長(zhǎng)標(biāo)度上的波長(zhǎng)標(biāo)度值誤差，應(yīng)符合以下規(guī)定：波長(zhǎng)范圍 420500nm 510600nm 610700nm允許誤差 3nm 5nm 6nm檢查方法：使用儀器配備的鐠釹玻璃片，該片對(duì)不同波長(zhǎng)的光透光率不同。在分光光度計(jì)上測(cè)定其透光率波長(zhǎng)曲線，從曲線上找出鐠釹玻璃片的透光率峰值，則該儀器的波長(zhǎng)誤差0。 = 2nm 0等于529nm（或808nm）3、 線型誤差的檢查 在吸光度為0.10.8（透光率為8016）的范圍內(nèi)，將符合比耳定律的溶液進(jìn)行測(cè)定，在不同的吸光度值范圍測(cè)量溶液濃度的線型誤差應(yīng)符合以下規(guī)定：吸光度范圍 0.10.3 0.30.6 0.60.8線性誤差 6 3 4檢查方法：配制K2Cr2O7；CoCl2；CuSO4溶液，每種溶液配置以下三個(gè)濃度：溶液名稱溶液濃度（103gml-1）測(cè)定波長(zhǎng)備注K2Cr2O70.03000.09000.150440nm濃度以Cr計(jì)量CoCl22.006.0010.00510nm濃度以Co計(jì)量CuSO42.006.0010.00690nm濃度以Cu計(jì)量以溶劑為空白，用儀器分別測(cè)量以上各個(gè)溶液的吸光度，每一濃度的溶液必須重復(fù)測(cè)量3次，取其平均值。將記錄的吸光度與對(duì)應(yīng)濃度，按下列公式計(jì)算各點(diǎn)的線性誤差。 C1KA1； C2KA2； C1KA3式中：C1、C2 、C3是同一種溶液的三個(gè)濃度；A1、A2、A3是測(cè)得的相應(yīng)的吸光度4、 靈敏度的檢查 儀器的靈敏度是度變化值與相應(yīng)溶液濃度變化值之比，其比值應(yīng)符合下表規(guī)定：溶液名稱靈敏度（A/gml-1）測(cè)定波長(zhǎng)K2Cr2O70.012/3440nmCoCl20.014/200510nmCuSO40.014/200690nm檢查方法：配制如下濃度的溶液：溶液名稱溶液濃度（103gml-1）測(cè)定波長(zhǎng)備注K2Cr2O70.0300與0.0330440nm濃度以Cr計(jì)量CoCl22.00與2.20510nm濃度以Co計(jì)量CuSO42.00與2.20690nm濃度以Cu計(jì)量在指定波長(zhǎng)下分別測(cè)量各溶液吸光度，設(shè)每種溶液的兩個(gè)濃度間變化值為C，測(cè)得的相應(yīng)的吸光度為A，則靈敏度S=A/C。5、 重現(xiàn)性檢查 儀器在同一工作條件下，用同一種溶液連續(xù)重復(fù)測(cè)定7次其吸光度最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差不應(yīng)大于0.5%檢查方法，將波長(zhǎng)固定在690nm，用含Cu 2.00103gml-1硫酸銅溶液連續(xù)測(cè)定7次，計(jì)算其吸光度最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差。6、 吸收池（比色皿）匹配性的檢查 在同一波長(zhǎng)下，配套使用的吸收池之間透光率之差要求不大于0.5%。檢查方法：將波長(zhǎng)固定在440nm，用含Cr 0.0300103gml-1的K2Cr2O7溶液分別注入一套吸收池，將其中一只推入光路中，調(diào)節(jié)至95%（T值可選小于100%而又盡量大的任一值），然后將各吸收池一一推入光路，記錄各吸收池同第一只吸收池之間的透光率差值，差值不大于0.5%即可配對(duì)或配套使用。五、儀器的外形和使用方法1、722型分光光度計(jì)儀器外形圖2、使用方法：（1）將靈敏度旋轉(zhuǎn)置“1”檔（放大倍數(shù)最?。?）開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20分鐘，選擇開關(guān)置于“T”（3）打開試樣室蓋（光門自動(dòng)關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”（4）將裝有溶液的比色皿放置比色架中（5）旋動(dòng)儀器的波長(zhǎng)手輪，把測(cè)試所需的波長(zhǎng)調(diào)節(jié)至刻度線處（6）蓋上樣品室蓋，將參比溶液比色皿置于光路，調(diào)節(jié)通過(guò)率“100%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T”（如果顯示不到100%T，則可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)，同時(shí)應(yīng)重復(fù)“3”調(diào)整儀器的“00.0”。（7）蔣被測(cè)溶液置于光路中，數(shù)字表上直接讀出被測(cè)溶液通過(guò)率T值。（8）吸光度的測(cè)量，按照“3”，“6”調(diào)整儀器的“00.0”和“100.0”，將選擇開關(guān)置于A旋動(dòng)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為000，然后移入被測(cè)溶液，顯示值即為試樣的吸光度A值。（9）濃度C的測(cè)量：選擇開關(guān)由A旋至C，將以標(biāo)定濃度的溶液移入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測(cè)溶液移入光路，可讀出相應(yīng)的濃度值。（10）如果大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)時(shí)，在調(diào)整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時(shí)間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“00.0”和“100”即可工作。六、注意事項(xiàng)使用前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和原理，以及各個(gè)旋或之功能。儀器接地要良好，否則顯示數(shù)字不穩(wěn)定。儀器左側(cè)下角有一只干燥劑筒，應(yīng)保持其干燥，發(fā)現(xiàn)干燥劑變色應(yīng)立即更新或烘干后再用。每臺(tái)儀器所配套的比色皿不能與其他儀器上的比色皿單個(gè)調(diào)換當(dāng)儀器停止工作時(shí)，切斷電源，電源開關(guān)同時(shí)切斷，并罩好儀器。如果大幅