實驗一 722型分光光度計的性能檢查.doc

實驗一 722型分光光度計的性能檢查一、 目的1、 了解722型分光光度計的性能2、 熟悉儀器的技術(shù)指標及一般檢查方法3、 掌握儀器的正確使用方法二、 原理722型分光光度計是采用單光束自準式光路，色散元件為衍射光柵，能在近紫外，可見光譜內(nèi)對樣品進行分析，根據(jù)被測物質(zhì)在可見光區(qū)范圍內(nèi)（360800nm）吸收特性及吸光的程度（吸光定律：A=-lgT=bc）對物質(zhì)進行定性和定量測定的儀器。為保證分析的靈敏度和準確性，國家計量局規(guī)定：對儀器應(yīng)定期進行檢查，檢查周期為一年。檢查的主要技術(shù)項目有：儀器外觀、波長精密度和重現(xiàn)型、分辨率、吸收值精密和儀器的線型范圍。對于符合閉耳定律的溶液測量時溶液的濃度與吸光值之間有良好的線性；一套比色皿之間應(yīng)互相匹配以及儀器的絕緣等。上述各項性能應(yīng)符合儀器所規(guī)定的技術(shù)指標（見操作步驟），本實驗采用規(guī)定方法對上述各項目進行檢查。 三、試劑和器皿1、 K2Cr2O7標準溶液：1mgml-12、 CoCl2標準溶液：10mgml-13、 CuSO4標準溶液：10mgml-14、 0.1mol/LHCl5、 0.05mol/LH2SO46、 4只比色皿、10支10ml比色管、1支2ml移液管和4支10ml移液管四、 實驗步驟1、 儀器外觀檢查 儀器所有緊固件應(yīng)緊固良好，各調(diào)節(jié)器能正常工作，儀器之余平穩(wěn)工作臺上操作時不得有擺動現(xiàn)象，比色皿座應(yīng)推動自如，無松動、卡住的現(xiàn)象。光束透過各透光孔應(yīng)暢通無阻。儀器所配比色皿的透光面應(yīng)光潔，無表面刮痕、擦毛和斑點，任何一面不得有裂紋。2、 波長精度的檢查 在波長標度上的波長標度值誤差，應(yīng)符合以下規(guī)定：波長范圍 420500nm 510600nm 610700nm允許誤差 3nm 5nm 6nm檢查方法：使用儀器配備的鐠釹玻璃片，該片對不同波長的光透光率不同。在分光光度計上測定其透光率波長曲線，從曲線上找出鐠釹玻璃片的透光率峰值，則該儀器的波長誤差0。 = 2nm 0等于529nm（或808nm）3、 線型誤差的檢查 在吸光度為0.10.8（透光率為8016）的范圍內(nèi)，將符合比耳定律的溶液進行測定，在不同的吸光度值范圍測量溶液濃度的線型誤差應(yīng)符合以下規(guī)定：吸光度范圍 0.10.3 0.30.6 0.60.8線性誤差 6 3 4檢查方法：配制K2Cr2O7；CoCl2；CuSO4溶液，每種溶液配置以下三個濃度：溶液名稱溶液濃度（103gml-1）測定波長備注K2Cr2O70.03000.09000.150440nm濃度以Cr計量CoCl22.006.0010.00510nm濃度以Co計量CuSO42.006.0010.00690nm濃度以Cu計量以溶劑為空白，用儀器分別測量以上各個溶液的吸光度，每一濃度的溶液必須重復(fù)測量3次，取其平均值。將記錄的吸光度與對應(yīng)濃度，按下列公式計算各點的線性誤差。 C1KA1； C2KA2； C1KA3式中：C1、C2 、C3是同一種溶液的三個濃度；A1、A2、A3是測得的相應(yīng)的吸光度4、 靈敏度的檢查 儀器的靈敏度是度變化值與相應(yīng)溶液濃度變化值之比，其比值應(yīng)符合下表規(guī)定：溶液名稱靈敏度（A/gml-1）測定波長K2Cr2O70.012/3440nmCoCl20.014/200510nmCuSO40.014/200690nm檢查方法：配制如下濃度的溶液：溶液名稱溶液濃度（103gml-1）測定波長備注K2Cr2O70.0300與0.0330440nm濃度以Cr計量CoCl22.00與2.20510nm濃度以Co計量CuSO42.00與2.20690nm濃度以Cu計量在指定波長下分別測量各溶液吸光度，設(shè)每種溶液的兩個濃度間變化值為C，測得的相應(yīng)的吸光度為A，則靈敏度S=A/C。5、 重現(xiàn)性檢查 儀器在同一工作條件下，用同一種溶液連續(xù)重復(fù)測定7次其吸光度最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差不應(yīng)大于0.5%檢查方法，將波長固定在690nm，用含Cu 2.00103gml-1硫酸銅溶液連續(xù)測定7次，計算其吸光度最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差。6、 吸收池（比色皿）匹配性的檢查 在同一波長下，配套使用的吸收池之間透光率之差要求不大于0.5%。檢查方法：將波長固定在440nm，用含Cr 0.0300103gml-1的K2Cr2O7溶液分別注入一套吸收池，將其中一只推入光路中，調(diào)節(jié)至95%（T值可選小于100%而又盡量大的任一值），然后將各吸收池一一推入光路，記錄各吸收池同第一只吸收池之間的透光率差值，差值不大于0.5%即可配對或配套使用。五、儀器的外形和使用方法1、722型分光光度計儀器外形圖2、使用方法：（1）將靈敏度旋轉(zhuǎn)置“1”檔（放大倍數(shù)最小）（2）開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20分鐘，選擇開關(guān)置于“T”（3）打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”（4）將裝有溶液的比色皿放置比色架中（5）旋動儀器的波長手輪，把測試所需的波長調(diào)節(jié)至刻度線處（6）蓋上樣品室蓋，將參比溶液比色皿置于光路，調(diào)節(jié)通過率“100%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T”（如果顯示不到100%T，則可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)，同時應(yīng)重復(fù)“3”調(diào)整儀器的“00.0”。（7）蔣被測溶液置于光路中，數(shù)字表上直接讀出被測溶液通過率T值。（8）吸光度的測量，按照“3”，“6”調(diào)整儀器的“00.0”和“100.0”，將選擇開關(guān)置于A旋動吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為000，然后移入被測溶液，顯示值即為試樣的吸光度A值。（9）濃度C的測量：選擇開關(guān)由A旋至C，將以標定濃度的溶液移入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使數(shù)字顯示為標定值，將被測溶液移入光路，可讀出相應(yīng)的濃度值。（10）如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“00.0”和“100”即可工作。六、注意事項使用前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和原理，以及各個旋或之功能。儀器接地要良好，否則顯示數(shù)字不穩(wěn)定。儀器左側(cè)下角有一只干燥劑筒，應(yīng)保持其干燥，發(fā)現(xiàn)干燥劑變色應(yīng)立即更新或烘干后再用。每臺儀器所配套的比色皿不能與其他儀器上的比色皿單個調(diào)換當(dāng)儀器停止工作時，切斷電源，電源開關(guān)同時切斷，并罩好儀器。如果大幅