溶血性鏈球菌講義

溶血性鏈球菌檢驗(yàn) 分布 溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣 存在于水 空氣 塵埃 糞便及健康人和動(dòng)物的口腔 鼻腔 咽喉中 可通過直接接觸 空氣飛沫傳播或通過皮膚 粘膜傷口感染 被污染的食品如奶 肉 蛋及其制品也會對人類進(jìn)行感染 上呼吸道感染患者 人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源 引起化膿性感染 中毒性感染 超敏反應(yīng)性疾病 生物學(xué)性狀 1 形態(tài)結(jié)構(gòu)2 培養(yǎng)特性3 分類4 生化反應(yīng)5 抵抗力 形態(tài)與染色 球形或卵圓形 直徑0 5 1 m 鏈狀排列 鏈長短不一 短者4 8個(gè)細(xì)胞組成 長者20 30個(gè)無芽胞 無鞭毛 培養(yǎng)早期 2 4h 形成透明質(zhì)酸的莢膜 培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求較高 需補(bǔ)充血液 血清 葡萄糖等在血清肉湯中易形成長鏈 管底呈絮狀沉淀在血瓊脂平板上 不同菌株溶血不一最適生長溫度為37 最適pH為7 4 7 6 培養(yǎng)特性 血平板 血平板上菌落為灰白色 半透明或不透明 表面光滑 有乳光 直徑約0 5 0 75mm 為圓形突起的細(xì)小菌落 乙型溶血鏈球菌周圍有2 4mm界限分明 無色透明的溶血圈 生化反應(yīng) 分解葡萄糖 產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 對乳糖 甘露醇 水楊苷 山梨醇 棉子糖 蕈糖 七葉苷的分解能力因不同菌株而異一般不分解菊糖 不被膽汁溶解觸酶陰性 與葡萄球菌相區(qū)別 毒素及侵襲性酶 鏈球菌溶血素致熱外毒素 曾稱紅疹毒素或猩紅熱毒素透明質(zhì)酸酶 又稱擴(kuò)散因子 溶解細(xì)胞間質(zhì)鏈激酶 又稱鏈球菌纖維蛋白溶酶 能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶 具有增強(qiáng)細(xì)菌在組織中的擴(kuò)散作用 該酶耐熱 100 50分鐘仍可保持活性 鏈道酶 又稱鏈球菌DNA酶殺白細(xì)胞素 能使白細(xì)胞失去動(dòng)力 抵抗力 該菌抵抗力一般不強(qiáng) 60 30min即被殺死對常用消毒劑敏感在干燥塵埃中生存數(shù)月乙型鏈球菌很少有耐藥性 微生物學(xué)檢查 溶血性鏈球菌檢測流程 GB T4789 11 25g ml 樣品 225ml無菌生理鹽水 葡萄糖肉浸液肉湯或匹克氏肉湯 血平板 血平板 分純培養(yǎng) 桿菌肽敏感試驗(yàn) 鏈激酶試驗(yàn) 觀察溶血 革蘭氏染色 報(bào)告 36 1 24h 36 1 24h 36 1 24h 鑒定步驟 溶血及菌落形態(tài)的觀察革蘭氏染色鏈激酶試驗(yàn)桿菌肽敏感試驗(yàn) 鏈激酶試驗(yàn) 原理 致病性乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)生鏈激酶 即溶纖維蛋白酶 此酶能激活正常人體血液中的血漿蛋白酶原 使成血漿蛋白酶 而后溶解纖維蛋白 鏈激酶試驗(yàn) 方法 吸取草酸鉀血漿0 2mL 加0 8mL滅菌生理鹽水 混勻 加入鏈球菌18 24h36 肉浸液肉湯培養(yǎng)物0 5mL及0 25 氯化鈣0 25mL 混勻 置于36 水浴10min 血漿混合物自行凝固 觀察凝塊重新完全溶解的時(shí)間 完全溶解為陽性 如24h后不溶解即為陰性 同時(shí)用肉浸液肉湯做陰性對照 用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照 桿菌肽敏感試驗(yàn) 取乙型溶血性菌落的濃菌液涂布于血平板上 用滅菌鑷子夾取每片含有0 04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上 36 培養(yǎng)18 24h 如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽性 用已知的陽性菌株做對照 結(jié)果報(bào)告 在2