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,淀粉培養(yǎng)基(g/L)牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5g淀粉2g瓊脂18g水1000mlpH7.0-7.2121滅菌20min注:先用小燒杯稱(chēng)取淀粉,加少量水調(diào)成糊狀,再加到沸水,加熱溶化,再加其它成分。,明膠培養(yǎng)白基(g/L)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl5g明膠120-180g水1000mlpH7.0-7.2121滅菌20min注:先稱(chēng)取明膠,加適量水,加熱溶化后再加其它成分,乳糖蛋胨培養(yǎng)液蛋白胨10g乳糖5gNaCl5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml蒸餾水1000mlpH7.2-7.4注:最后加溴甲酚紫。115滅菌20min,1,實(shí)驗(yàn)七微生物的接種及培養(yǎng)特征觀察,一、目的要求:1、學(xué)習(xí)、掌握微生物的接種技術(shù)。2、了解不同微生物在固體斜面、液體和半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)特征,2,二、實(shí)驗(yàn)原理微生物的培養(yǎng)特征是指微生物培養(yǎng)在培養(yǎng)基中所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長(zhǎng)情況。不同微生物在相同培養(yǎng)基上培養(yǎng),群體形態(tài)和生長(zhǎng)情況不同。,3,在斜面固體培養(yǎng)基上:呈絲絨狀、刺毛狀、串珠狀、舒展?fàn)?、?shù)枝狀、假根狀等在液體培養(yǎng)基內(nèi):呈均勻混濁、絮狀、粘液狀,液面形成菌膜,或上層清晰而底部呈沉淀狀等。在半固體培養(yǎng)基內(nèi):可以沿接種線(xiàn)向四周蔓延(有鞭毛);僅沿線(xiàn)生長(zhǎng);或底部長(zhǎng)的好、上層不長(zhǎng);或上層生長(zhǎng)而底部不生長(zhǎng)等,4,利用微生物的培養(yǎng)特征,可以作為種類(lèi)鑒定和識(shí)別純培養(yǎng)是否被污染的參考。,5,三、實(shí)驗(yàn)材料菌種:枯草芽孢桿菌、大腸桿菌培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨的液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體斜面培養(yǎng)基器材:接種環(huán)、接種針、酒精燈等,6,四、操作步驟(一)接種技術(shù)1.斜面接種:從已長(zhǎng)好微生物的菌種管移接到另一斜面管的方法。此法用于好氧微生物的接種。左手持菌種管和斜面管,使斜面向上,并盡量放平。用右手先將棉塞擰轉(zhuǎn)松動(dòng),灼燒接種環(huán),用右手的小指、無(wú)名指和手掌撥下棉塞并夾緊,同時(shí)將管口在火焰上灼燒一圈,接種環(huán)灼燒滅菌后插入管內(nèi),冷卻、挑菌,立即轉(zhuǎn)入斜面管底部,沿斜面劃線(xiàn)曲線(xiàn):用于培養(yǎng)菌種直線(xiàn):用于觀察培養(yǎng)特征,7,2.液體接種:由斜面菌接種到液體培養(yǎng)基(如試管或三角瓶等)中的方法。操作與上法基本一致,只是在將接種環(huán)送入液體培養(yǎng)基中時(shí)使環(huán)在液體與管壁接觸的地方輕輕磨擦,使菌體分散,然后塞上棉塞,再輕輕搖動(dòng)均勻,即可培養(yǎng)。如果菌種是在液體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí),一般用無(wú)菌移液管、移液槍或滴管接種,也可用接種環(huán)。,8,3.穿刺接種(半固體培養(yǎng)基):用接種針挑取菌種后,從中間插入深層培養(yǎng)基內(nèi),(不要刺到底部,3/4),再沿原路拔出,此法用于厭氧細(xì)菌接種、檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力。4.平板接斜面:一般是將經(jīng)平板分離培養(yǎng)得到的單菌落接種到斜面,以便作鑒定或擴(kuò)大培養(yǎng)、保存之用。類(lèi)似斜面接種。,9,(二)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)菌36培養(yǎng)真菌和放線(xiàn)菌在28培養(yǎng)(三)結(jié)果觀察(細(xì)菌2d后看結(jié)果,放線(xiàn)菌和真菌下周上課時(shí)觀察),10,注意事項(xiàng),1、接種時(shí)嚴(yán)格無(wú)菌操作。2、每次接種完畢要灼燒接種環(huán)(針)3、斜面接種時(shí),不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基,菌種不要沾到管壁上。4、液體培養(yǎng)基接種時(shí)培養(yǎng)基不要流出來(lái)或沾染管口5、穿刺
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