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HITACHI7600全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)結(jié)果為負(fù)值的分析及處理方法 【關(guān)鍵詞】 全自動(dòng)生化儀 儀器分析原理 檢驗(yàn)結(jié)果 隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及,檢驗(yàn)工作對(duì)設(shè)備的重視和依賴程度越來(lái)越高,因此,作為檢驗(yàn)工作人員應(yīng)當(dāng)熟悉儀器的分析原理,在日常工作中儀器設(shè)備出現(xiàn)異常狀況時(shí),應(yīng)該知道如何排查故障原因,做到及時(shí)處理,是現(xiàn)代檢驗(yàn)人員工作能力和自身素質(zhì)的良好體現(xiàn)。本文就HITACHI7600全自動(dòng)生化分析儀結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值的各種情況進(jìn)行了歸納和總結(jié),旨在讓廣大檢驗(yàn)人員在HITACHI7600全自動(dòng)生化分析儀結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值時(shí),能根據(jù)其反應(yīng)曲線認(rèn)真地找出原因并正確處置,使儀器盡快恢復(fù)正常工作狀態(tài)?,F(xiàn)介紹如下,供同行參考。1. 檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值的情況分類及原因分析1.1 標(biāo)本因素1.1.1標(biāo)本量過(guò)少 常見(jiàn)現(xiàn)象為同一份標(biāo)本多個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目出現(xiàn)負(fù)值,引起原因是使用分離膠負(fù)壓試管且采血量偏少,因HITCHI7600采用的是電容式原理,樣品針一旦接觸到液面會(huì)繼續(xù)下降1.5mm,當(dāng)血清量少是,樣品針會(huì)直接插入到分離膠或血細(xì)胞中,致使針堵塞,并影響下一個(gè)樣本測(cè)試。處理方法:將患者血清分離后用加樣器轉(zhuǎn)移到日立專用標(biāo)準(zhǔn)樣品杯中;本著對(duì)患者負(fù)責(zé)的態(tài)度,檢驗(yàn)科應(yīng)拒收不合格的檢驗(yàn)標(biāo)本,而臨床科室應(yīng)重新正確采集標(biāo)本及時(shí)送檢;用無(wú)水酒精擦拭樣品針金屬部位,在執(zhí)行一次排氣處理,預(yù)防堵針。1.1.2清中有氣泡,纖維蛋白原(FIB) 此種情況見(jiàn)于某一份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果中多個(gè)項(xiàng)目測(cè)得結(jié)果為負(fù)值,原因是血清表面有氣泡或者含有FIB,導(dǎo)致樣品針吸空或堵塞。處理方法:去除血清表面氣泡;將血清放置一段時(shí)間,待其凝固,并用干凈竹簽挑出FIB,重新離心;腎功能衰竭做透析的患者血清往往呈高凝結(jié)狀態(tài),需延長(zhǎng)溫浴時(shí)間,多次離心,遇到此類情況應(yīng)結(jié)合到臨床再處理。1.13標(biāo)本脂濁 常見(jiàn)現(xiàn)象為血清標(biāo)本脂濁使某一些檢測(cè)項(xiàng)目出現(xiàn)負(fù)值,原因是脂濁標(biāo)本可以通過(guò)多種途徑影響生化檢測(cè)結(jié)果,包括:由于標(biāo)本粘度增大及CM的屏蔽效應(yīng),減少了抗原抗體結(jié)合幾率,對(duì)免疫比濁法的項(xiàng)目造成很大影響;脂濁血清中水分被不溶性的CM所取代,可使同一標(biāo)本大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目產(chǎn)生負(fù)值(除TG少數(shù)項(xiàng)目外);脂濁血清對(duì)光線有一定的散射作用,使空白吸光度值升高,對(duì)吸光度產(chǎn)生正向干擾,直接影響比色,比濁分析法的項(xiàng)目測(cè)定,導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值。處理方法:用生理鹽水稀釋,可以降低樣本空白,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性(但應(yīng)注意其負(fù)面影響,如使樣本粘度,張力等物理或化學(xué)特性發(fā)生機(jī)制效應(yīng)變化,出現(xiàn)結(jié)果誤差);將標(biāo)本加蓋密封,高速離心5min(5000r/min),離心后血清可分為兩層,吸取下層血清用來(lái)檢測(cè)酶類的生化項(xiàng)目(一般PCR實(shí)驗(yàn)室配備,易于推廣)1.1.4 標(biāo)本采集或保存不良 不正確的標(biāo)本采集或保存對(duì)一些特定項(xiàng)目如血糖有直接影響,使其結(jié)果偏低甚至負(fù)值。正常情況下,離體后Glu含量可下降5%-7%/h左右,即使是離心后的標(biāo)本Glu濃度也會(huì)隨著放置時(shí)間而呈進(jìn)行性降低,平均降低1.4%/h。血漿仍對(duì)Glu有影響,這可能與紅,白細(xì)胞的糖酵解有關(guān)。處理方法是在Glu測(cè)定時(shí),盡量縮短樣本分離時(shí)間,避免將血液標(biāo)本放置37C水浴箱中促凝,分離血清后盡快完成測(cè)定(草酸鉀氟化鈉是最理想的Glu測(cè)定抗凝劑,但不適合其他生化項(xiàng)目),建議使用帶促凝分離膠的真空采血管,并及時(shí)分離血清。肝素鋰是可用于Glu測(cè)定抗凝劑,同時(shí)也適于其他大多數(shù)臨床生化指標(biāo)的測(cè)定。1.2 試劑與人為因素 常見(jiàn)現(xiàn)象為連續(xù)多份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果中某一檢測(cè)項(xiàng)目出現(xiàn)多個(gè)負(fù)值,導(dǎo)致原因一時(shí)試劑失效,污染,這主要體現(xiàn)在試劑有顏色的檢測(cè)項(xiàng)目(如TP,Alb,Mg,Ca,TBA,Cr苦味酸法);二是人為放錯(cuò)試劑位置(如:ALT與ALP,TBil與DBil容易混淆)。處理方法;定期檢查試劑的效期與試劑顏色的變化,過(guò)期試劑進(jìn)行特殊處理后棄去,對(duì)顏色變化的試劑及時(shí)更換;更換批號(hào)的試劑進(jìn)行定標(biāo);檢驗(yàn)人員應(yīng)提高責(zé)任心,嚴(yán)格按照SOP文件進(jìn)行操作;經(jīng)常更換試劑瓶,(一些檢驗(yàn)工作人員在添加試劑時(shí)重復(fù)使用同一個(gè)試劑瓶,增加了污染概率)。1.3 水質(zhì)因素 常見(jiàn)現(xiàn)象是離子類的血清檢測(cè)項(xiàng)目出現(xiàn)負(fù)值,原因?yàn)樗|(zhì)電導(dǎo)率超標(biāo)(電導(dǎo)率正常位1s/cm(25C)。處理方法:取一次性塑料試管,加入1ml左右的Mg試劑(二甲苯胺藍(lán)比色法),然后加入一,二滴水,5min后觀察有無(wú)變化,如變成紅色表明所用水中含有離子;定期檢查水質(zhì)電導(dǎo)率及更換純水機(jī)樹脂,使超純水的水質(zhì)在1s/cm(25C)以下。1.4 儀器硬件故障1.4.1 噴嘴堵塞 常見(jiàn)于連續(xù)檢測(cè)血清標(biāo)本時(shí)出現(xiàn)多個(gè)負(fù)值(包括Rate A/END法的項(xiàng)目),導(dǎo)致原因?yàn)閲娮旒肮苈繁环磻?yīng)物堵塞。處理方法:儀器處于Stand By 狀態(tài)下,取下噴嘴,用含有5%NaCLO清洗劑的注射器用力推拉以除掉管壁的污物,再用無(wú)水酒精擦拭清洗機(jī)構(gòu)的8只噴嘴(包括3.8號(hào)噴嘴小白塊),并用通針疏通噴嘴,將1號(hào)噴嘴置于100ml 5%NaCLO清洗劑中,在UtilityMaintenanceCheckMechanisms CheckSelectModule 選擇模塊(選中呈白色)Cycles 50次Execute 直至100ml 5%NaCLO清洗劑吸完。1.4.2 SV21(負(fù)壓電磁閥)閉合故障,負(fù)壓不足 常見(jiàn)現(xiàn)象為隨機(jī)性的出現(xiàn)負(fù)值,但不會(huì)連續(xù)發(fā)生異常結(jié)果。導(dǎo)致原因是負(fù)壓不足或者SV21內(nèi)部腐蝕,生銹,致使其運(yùn)動(dòng)受限,閉合不嚴(yán),造成清洗過(guò)程中間歇性不吸反應(yīng)杯里的廢液并污染周圍反應(yīng)杯。處理方法:OFF儀器,用無(wú)水酒精分解檫試SV21與其相關(guān)的SV30,SV31各個(gè)內(nèi)部組件;經(jīng)上述處理后,還出現(xiàn)負(fù)壓報(bào)警,需更換負(fù)壓泵膜(需工程師執(zhí)行)。1.4.3 光源燈與隔熱玻璃劣化,恒溫槽及反應(yīng)杯臟污 常見(jiàn)現(xiàn)象主要在一個(gè)批次Rate A法(酶類)的項(xiàng)目在反應(yīng)過(guò)程中出現(xiàn)波折型曲線,致測(cè)定結(jié)果為負(fù)值。導(dǎo)致原因?yàn)楣庠礋襞c隔熱玻璃劣化,恒溫槽臟污或被絮狀物覆蓋,反應(yīng)杯擦痕污跡從而阻礙光線從透光窗穿過(guò)。由于全自動(dòng)生化分析儀大多用比色法,因此以上兩個(gè)問(wèn)題都會(huì)導(dǎo)致吸光度的檢測(cè)出現(xiàn)偏差。處理方法:Stand By狀態(tài)下,執(zhí)行UtilityMaintenancePhotometer CheckSelect選擇模塊(選中呈白色)Execute,運(yùn)行兩次檢測(cè),兩次測(cè)定需間隔10min,判斷光源是否穩(wěn)定,將兩次光度計(jì)值作對(duì)比,正常光度計(jì)值340nm反應(yīng)19000需要更換光源燈,340與405nm光度計(jì)差值3000,需要更換隔熱玻璃)。更換光源燈時(shí)需待燈室冷卻30min后,運(yùn)行UtilityMaintenanceChange Light Source lamps 選擇模塊(選中呈白色)Execute,更換完畢直接點(diǎn)擊Stop;擦拭透光窗時(shí)要謹(jǐn)慎,用無(wú)菌紗布清洗反應(yīng)槽與過(guò)濾網(wǎng),更換反應(yīng)槽循環(huán)水,執(zhí)行UtilityMaintenanceInc.Water EXchgSelect 選擇模塊(選中呈白色)Execute;更換反應(yīng)杯,更換前需將反應(yīng)杯浸泡于2%Hitergengt溶液中2小時(shí)以上,安裝時(shí)再用去離子水沖洗一次,執(zhí)行UtilityMaintenanceCell BlankSelect選擇模塊(選中呈白色)Execute。警記,凡是處理光路系統(tǒng)后都必須執(zhí)行(Cell blank)測(cè)定。1.4.4 Sample Probe 空吸或堵塞,Alarm Sample Short 現(xiàn)象為所有項(xiàng)目無(wú)法檢測(cè),而且連續(xù)性出現(xiàn)負(fù)值 導(dǎo)致原因?yàn)镾ample Probe 堵塞,Sample Probe與Sensor板劣化,HV PCR臟污,G線通電不良。處理方法:OFF儀器,用無(wú)水酒精擦拭HV PCR,S.Probe 并用通針疏通,重做G線;ON儀器,執(zhí)行針位置確認(rèn)與調(diào)整,確認(rèn)針尖是否在樣品杯中心,不經(jīng)確認(rèn)而直接執(zhí)行有可能無(wú)法測(cè)得下降距離。執(zhí)行水平調(diào)整運(yùn)行UtilityMaintenanceProbe AdjustSelect選擇模塊(選中呈白色)S.probe(Horiz)按F1鍵Stop;垂直調(diào)整時(shí)在標(biāo)準(zhǔn)液用S樣品針架(黑色)位置1,2上安裝調(diào)整具,將樣品架放置于樣品供給部,運(yùn)行UtilityMaintenanceProbe AdjustSelect選擇模塊(選中呈白色)S.probe(Vert);執(zhí)行兩次UtilityMaintenanceAir PurgeSelect選擇模塊(選中呈白色)Execute,確認(rèn)水是否從樣品針的尖端筆直吐出。2. 結(jié)論 HITACHI 7600全自動(dòng)生化儀在檢測(cè)標(biāo)本過(guò)程中所出現(xiàn)的負(fù)值結(jié)果,其主要原因是沒(méi)有做好日常維護(hù)保養(yǎng)工作,這與檢驗(yàn)人員的責(zé)任心有一定關(guān)系。因此,在檢驗(yàn)工作中,需要檢驗(yàn)人員高度重視,認(rèn)真負(fù)責(zé),熟悉儀器的性能,做好一起日常維護(hù)保養(yǎng)工作,嚴(yán)格按照SOP操作,儀器才會(huì)處于最佳狀態(tài),為臨床醫(yī)生與患者提供快速,準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報(bào)告,從而提高工作質(zhì)量與檢測(cè)水平。HITACHI 7600-020E 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)結(jié)果偏低的分析及處理方法 現(xiàn)象 某醫(yī)院反映使用TP,GGT等部分項(xiàng)目在HITACH 7600-020儀器的PI模塊上測(cè)定臨床標(biāo)本時(shí),經(jīng)常出現(xiàn)偏低現(xiàn)象。而在P2模塊上測(cè)定質(zhì)控及臨床標(biāo)本良好。 處理 針對(duì)該院P2模塊測(cè)定結(jié)果良好而P1模塊測(cè)定結(jié)果不良的現(xiàn)象,工程師首先排除了試劑,校準(zhǔn)品以及參數(shù)設(shè)置不良等問(wèn)題,重點(diǎn)懷疑儀器原因。隨后,工程師分別查看了在P1模塊上部分異常結(jié)果及在P2模塊上正常結(jié)果的反應(yīng)曲線. 從兩個(gè)模塊上的反應(yīng)曲線看,P1模塊較P2模塊,騎在最后幾點(diǎn)所檢測(cè)的反應(yīng)吸光度有明顯下降的現(xiàn)象。針對(duì)該現(xiàn)象,工程師排除了由于樣本針加樣不足所導(dǎo)致的測(cè)定結(jié)果偏低(樣本針加樣不足所引起的偏低,其反應(yīng)吸光度應(yīng)呈系統(tǒng)性偏低的趨勢(shì),而不會(huì)在最后幾點(diǎn)才出現(xiàn)下降),重點(diǎn)懷疑為光路系統(tǒng)不穩(wěn)定所造成,因此,工程師首先進(jìn)行光密度檢測(cè),其340nm處的吸光度值為10220(要求不超過(guò)19000),10分鐘后再進(jìn)行1次光密度檢測(cè),其340nm處的吸光度值為10233(要求前后兩次相差不超過(guò)20)。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn),工程師暫時(shí)排除了光源燈以及光路不穩(wěn)等原因所造成的上述現(xiàn)象發(fā)生。為了查找原因,工程師于第二日到該醫(yī)院觀察儀器整個(gè)運(yùn)行狀況。當(dāng)儀器在運(yùn)行了一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)反應(yīng)杯有液體溢出的現(xiàn)象,查詢?cè)摃r(shí)間段所測(cè)定項(xiàng)目的結(jié)果及反應(yīng)曲線,部分項(xiàng)目的最后幾點(diǎn)反應(yīng)吸光度均有明顯下降現(xiàn)象,引起測(cè)定結(jié)果偏低且個(gè)別項(xiàng)目出現(xiàn)負(fù)值。經(jīng)過(guò)最終確定,出現(xiàn)反應(yīng)杯溢液現(xiàn)象的原因?yàn)榍逑礄C(jī)構(gòu)中用于吸走清洗用水的3號(hào)針,吸走堿性清洗液的5號(hào)針以及吸走酸性清洗液的6號(hào)針的管腔堵塞,使反應(yīng)杯內(nèi)的液體無(wú)法完全吸走。待儀器停機(jī)后,工程師對(duì)以上3根清洗針進(jìn)行疏通時(shí)發(fā)現(xiàn)3根針的管腔內(nèi)均含有細(xì)小的白色結(jié)晶顆粒(詢問(wèn)得知該院為節(jié)約成本并未使用原裝清洗液,而是自行配置。由于自行配置的清洗液不含表面活性劑等去污物質(zhì),長(zhǎng)期以來(lái)導(dǎo)致白色結(jié)晶形成)。在對(duì)管腔內(nèi)白色結(jié)晶顆粒進(jìn)行清理疏通后,檢測(cè)結(jié)果良好,無(wú)偏低現(xiàn)象出現(xiàn)。 分析 該院7600-020E儀器上P1模塊出現(xiàn)測(cè)定結(jié)果偏低的原因分析為:該院長(zhǎng)期使用自行配制的清洗液,影響清洗效果,日積月累就會(huì)形成白色結(jié)晶顆粒堵塞官腔。最終使清洗機(jī)構(gòu)不能正常吸走清洗反應(yīng)杯所用的洗液與水,導(dǎo)致反應(yīng)杯中的液體溢出并污染周圍的反應(yīng)杯,當(dāng)受污染的反應(yīng)杯(溢入的液體會(huì)稀釋反應(yīng)杯中的反應(yīng)原液)正在進(jìn)行檢測(cè)時(shí),由于反應(yīng)原液被稀釋,
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