反射時(shí)、反射弧和脊髓反射的抑制測試.doc

精品文檔課程名稱： 動物生理學(xué)及實(shí)驗(yàn)（甲） 實(shí)驗(yàn)類型： 專業(yè)基礎(chǔ) 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱： 反射時(shí)、反射弧和脊髓反射的抑制測試 目的要求 1學(xué)習(xí)測定反射時(shí)的方法，了解反射弧的組成。2觀察中樞抑制與交互抑制現(xiàn)象。3. 了解脊髓反射的功能特性。 基本原理反射是指對某一刺激無意識的應(yīng)答。反射活動的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)為反射弧，包括感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器。從皮膚接受刺激至機(jī)體出現(xiàn)反應(yīng)的時(shí)間為反射時(shí)。反射時(shí)是反射通過反射弧所用的時(shí)間。反射弧的任何一部分缺損，原有的反射不再出現(xiàn)。由于脊髓的機(jī)能比較簡單，所以常選用只毀腦的動物(如脊蛙或脊蟾蜍)為實(shí)驗(yàn)材料，以利于觀察和分析。中樞的興奮和抑制同時(shí)存在又相互影響。在脊髓反射的中樞之間或高位腦和脊髓對低位脊髓反射中樞均存在抑制作用。這些抑制作用保證了機(jī)體活動的協(xié)調(diào)性。 動物與器材蟾蜍或蛙、常用手術(shù)器械、生理信號采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、蛙嘴夾、蛙板、蛙腿夾、小燒杯、小玻璃皿(2個(gè))、小濾紙片、棉花、秒表、紗布、0.5及1硫酸溶液、2普魯卡因、烘干的浸鹽濾紙片、任氏液。方法與步驟一、反射時(shí)和反射弧的測定 （1）取一只蟾蜍(或蛙)，只毀腦稱脊蟾蜍(或脊蛙)，腹位固定于蛙板上。剪開右側(cè)股部皮膚，分離出坐骨神經(jīng)穿線備用。（2）取下蛙腿夾，用蛙嘴夾夾住脊蟾蜍下頜，懸掛于支架上(圖91)。將蟾蜍右后肢的最長趾浸入0.5硫酸溶液中23mm(浸入時(shí)間最長不超過l0s)，立即記下時(shí)間： (以秒計(jì)算)。當(dāng)出現(xiàn)屈反射時(shí)，則停止計(jì)時(shí)，此為屈反射時(shí)。立即用清水沖洗受刺激的皮膚并用紗布擦干。重復(fù)測定屈反射時(shí)3次，求出均值作為右后肢最長趾的反射時(shí)。用同樣方法測定左后肢最長趾的反射時(shí)。 （3）用手術(shù)剪自右后肢最長趾基部環(huán)切皮膚，然后再用手術(shù)鑷剝凈長趾上的皮膚。用硫酸刺激去皮的長趾，記錄結(jié)果。 （4）改換右后肢有皮膚的趾，將其浸入硫酸溶液中，測定反射時(shí)，記錄結(jié)果。（5）取一浸有1硫酸溶液的濾紙片，貼于蟾蜍右側(cè)背部或腹部，記錄擦或抓反射的反射時(shí)。 （6）用一細(xì)棉條包住分離出的坐骨神經(jīng)，在細(xì)棉條上滴幾滴2普魯卡因溶液后，每隔2min重復(fù)步驟4(記錄加藥時(shí)間)。（7）當(dāng)屈反射剛剛不能出現(xiàn)時(shí)(記錄時(shí)間)，立即重復(fù)步驟（5）。每隔2min重復(fù)一次步驟（5），直到擦或抓反射不再出現(xiàn)為止(記錄時(shí)間)。記錄加藥至屈反射消失的時(shí)間及加藥至擦或抓反射消失的時(shí)間，并記錄反射時(shí)的變化。（8）將左側(cè)后肢最長趾再次浸入0.5硫酸溶液中(條件不變)，記錄反射時(shí)有無變化。毀壞脊髓后再重復(fù)實(shí)驗(yàn)，記錄結(jié)果。二、脊髓反射抑制1.中樞抑制（謝切諾夫抑制）（1）另取一只蛙用紗布包住，沿頭部中線縱向切開并剪去顱頂皮膚，用剪刀自鼻孔向后小心打開顱骨，去掉腦膜，暴露腦組織。仔細(xì)觀察腦各部位（圖9-1-1）。（2）用手術(shù)刀在間腦處作一橫切，然后將動物掛在支架上。用干凈濾紙片吸干腦斷面上的液體。（3）待動物安定后，用硫酸刺激一側(cè)后肢，測定3次屈反射時(shí)。（4）取一片烘干的浸鹽濾紙片放在視葉斷面上，立即按步驟（3）測定曲反射時(shí)，觀察并記錄反射時(shí)的變化。待反射時(shí)明顯延長后，移去浸鹽濾紙片，用任氏液沖洗斷面，再測定反射時(shí)，觀察抑制是否解除。2. 脊髓反射的外周抑制 （1）用0.5%硫酸刺激一側(cè)后肢，并測定其反射時(shí)。（2）再用0.5%硫酸刺激一側(cè)后肢，與此同時(shí)用鑷子夾另一側(cè)后肢的趾尖，觀察硫酸刺激引起的屈反射有何變化。（3）松開鑷子，再觀察受到硫酸刺激的后肢有何反應(yīng)。3. 交互抑制(該部分實(shí)驗(yàn)可選做)（1）將動物放下，在一側(cè)后肢膝關(guān)節(jié)處作環(huán)行切口，剝?nèi)バ⊥绕つw。（2）分別結(jié)扎并剪斷脛前肌在足背上的兩附著點(diǎn)之肌腱，提起肌腱將脛前肌游離。（3）結(jié)扎并剪斷小腿后部的腓腸肌肌腱，游離腓腸肌。（4）固定動物膝關(guān)節(jié)和髖關(guān)節(jié)，將脛前肌和腓腸肌肌腱結(jié)扎線分別連接在2支張力傳感器上（注意調(diào)整松緊度）。（5）用較強(qiáng)的連續(xù)脈沖刺激同側(cè)背部皮膚，記錄肌肉收縮曲線?？梢婋枘c肌收縮，脛前肌舒張。 注意事項(xiàng) 1每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使皮膚接觸硫酸的面積不變，以保持相同的刺激強(qiáng)度。2刺激后要立即洗去硫酸，以免損傷皮膚。3. 夾動物的后肢時(shí)，用力不能太大，以防損傷腳趾。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 一、 反射時(shí)和反射弧的測定（2）右后肢及左后肢最長趾的反射時(shí)右后肢最長趾反射時(shí)/s12345平均8.1568.2815.1884.3137.3446.6564右后肢最長趾反射時(shí)/s1234平均2.6883.7191.9065.0313.336（3）環(huán)切趾端皮膚后，用硫酸刺激趾端無反應(yīng)（4）改換右后肢有皮膚的趾，用硫酸刺激，反應(yīng)時(shí)為3.719s。（5）用硫酸刺激右側(cè)腹部皮膚，抓或擦反應(yīng)時(shí)為1.750s。（6）用普魯卡因溶液處理后，當(dāng)屈反射剛剛不能出現(xiàn)時(shí)為1min28s，擦或抓反射消失的時(shí)間為6min43s。反應(yīng)時(shí)長2.813s.（7）將左側(cè)后肢最長趾再次浸入0.5硫酸溶液中,反射時(shí)為4.969s。（8）毀壞脊髓后再重復(fù)實(shí)驗(yàn)，反射消失。二、脊髓反射抑制2. 脊髓反射的外周抑制 （1）用0.5%硫酸刺激一側(cè)后肢，并測定其反射時(shí)，為4.969s（2）再用0.5%硫酸刺激一側(cè)后肢，與此同時(shí)用鑷子夾另一側(cè)后肢的趾尖，觀察硫酸刺激引起的屈反射時(shí)為：7.422s（3）松開鑷子，再觀察受到硫酸刺激的后肢，反應(yīng)時(shí)為：3.500s3. 交互抑制腓腸肌-脛前肌肌肉拮抗（張力）圖討論、心得（1） 從反射弧和反射時(shí)的測定實(shí)驗(yàn)中，我們可以看到：在相同情況下，對右下肢最長趾進(jìn)行相同程度的刺激，屈反射的反射時(shí)變化程度較大，有時(shí)在刺激時(shí)間超過10s的情況下，都沒有大腿收縮。對此，我們認(rèn)為，這可能是趾端皮膚的敏感性隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行而受損或興奮性下降；同時(shí)，我們用夾子夾住石蛙的下顎，使他固定，實(shí)驗(yàn)期間，蛙進(jìn)行了反射性的抽搐，我們猜測，蛙的全身抽搐可能與屈反射想干擾，造成反射時(shí)變化明顯。（2） 比較右下肢最長趾在環(huán)剝趾端皮膚之前的反射時(shí)和左下肢最長趾的屈反射反射時(shí)，發(fā)現(xiàn)右下肢的反射時(shí)明顯大于左下肢。我們分析，這可能是因?yàn)?，我們分離出了右下肢股部的坐骨神經(jīng)干，分離過程中神經(jīng)干受損或者離體之后興奮性下降，導(dǎo)致反射時(shí)增長。（3） 用普魯卡因溶液處理后，抓或擦反射比屈反射消失的時(shí)間早了將近4min，原因是兩者的傳入神經(jīng)、傳出神經(jīng)和感受器均不相同；坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，包括了傳入神經(jīng)和傳出神經(jīng)纖維；對于抓或擦反射，被麻醉的是傳出神經(jīng)纖維，而對于屈反射，被麻醉的傳入神經(jīng)纖維。傳入神經(jīng)纖維易被麻醉，傳出神經(jīng)纖維因?yàn)橛休^厚的髓鞘而不易被麻醉。因此，屈反射先被抑制，產(chǎn)生了消失時(shí)間差。（4） 在脊髓的外周反射抑制中，我們可以看到，當(dāng)夾住另一側(cè)的指尖并同時(shí)刺激趾端時(shí)，反射時(shí)相較于不夾住另一側(cè)指尖的刺激反射時(shí)明顯變長。這表現(xiàn)了脊髓的外周反射抑制。思考題 1.以實(shí)驗(yàn)結(jié)果為根據(jù)，以嚴(yán)密的邏輯推理方式說明反射弧的幾個(gè)組成部分。 答：1.環(huán)剝右后肢最長趾趾端的皮膚后用相同方法刺激趾端，屈反射消失，說明感受器是反射弧組成部分。2.利用普魯卡因溶液處理坐骨神經(jīng)干（抓或擦反應(yīng)的傳出神經(jīng)和屈反射的傳入神經(jīng)），經(jīng)過不同的時(shí)間之后，兩反射均消失，說明傳出神經(jīng)和傳入神經(jīng)時(shí)反射弧的組成部分。3.搗毀脊髓，反射消失，說明神經(jīng)中樞是反射弧的必須。4.顯而易見地，肌肉是反射的效應(yīng)器。綜上所述，反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器組成。 2.分析頡抗肌交互抑制的原因及其意義。答：原因：以同側(cè)屈反射為例：同側(cè)屈反射屬于多元反射，其感受器為廣大皮膚表面和其深部結(jié)構(gòu)，傳入神經(jīng)在皮神經(jīng)或肌神經(jīng)中，當(dāng)弱刺激作用脊蛙的腳趾時(shí)，神經(jīng)沖動進(jìn)入脊髓后通過一個(gè)中間神經(jīng)元的接替，再與脊髓傳出神經(jīng)元聯(lián)系；期間支配屈肌的傳出神經(jīng)元受到傳入沖