自動化方法驗證

,自動化方法驗證2004年7月林振賢博士,Ph.D.加拿大CVG協(xié)會,百萬個機(jī)會,數(shù)據(jù)自動化,LIMS,數(shù)據(jù)備份/存檔,數(shù)據(jù)采掘,物理自動化,樣品制備/分析,篩選,合成,實驗室自動化總況,實驗室自動化的益處,增加產(chǎn)出改進(jìn)員工和儀器的使用情況更少制備工作,更多靈活機(jī)動每時每刻都可以運轉(zhuǎn)改進(jìn)結(jié)果質(zhì)量更好的精度和準(zhǔn)確度降低誤差方法轉(zhuǎn)換容易安全性減少在有毒環(huán)境的中的暴露降低所有溶劑的數(shù)量,自動化系統(tǒng),含量測定片劑處理工作站-Caliper前置工作站-Caliper溶出AT70溶出系統(tǒng)-Sotax多劑量工作站-Caliper,自動化工作站,片劑處理工作站圖示,自動化工作站,溶出工作站圖示,系統(tǒng)性能是自動化分析成功的關(guān)鍵從分析員到工作站建立該系統(tǒng)的可靠性和功效提供該系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地、精確地和可靠地執(zhí)行任務(wù)的書面說明,系統(tǒng)合格化,狀況,2個可能的狀況：1.有手動方法且已經(jīng)過驗證2.沒有手動方法,典型的分析程序包括:樣品制備測量數(shù)據(jù)處理把手動制備步驟轉(zhuǎn)化成自動步驟保持相同的濃度(相同的LC濃度)單個自動步驟代替多重稀釋步驟順序處理代替批量處理恒器或者超聲處理代替晃動,自動化方法建立,自動化方法建立,方法建立包括：密度確定體積轉(zhuǎn)移系統(tǒng)兼容性過濾研究溫度研究殘存度研究溶液穩(wěn)定性萃取研究,溶液密度重量法溶劑配分或稀釋如果要求二次稀釋，準(zhǔn)備好稀釋液和過濾液體積轉(zhuǎn)移劑型占有體積如果轉(zhuǎn)移的體積很大，手動和自動的結(jié)果將會不一樣,自動化方法建立,使系統(tǒng)單元的影響最小化可以從系統(tǒng)單元和過濾器中萃取的把溶劑通過過濾器或液體通道與沒有經(jīng)過過濾的溶劑比較系統(tǒng)單元和過濾器活性保留把被分析物或樣品通過過濾器或液體通道沒有經(jīng)過過濾的樣品比較處理過的沒有經(jīng)過過濾的樣品之間的差別不應(yīng)該超出公稱濃度的1%。,自動化方法建立,過濾研究過濾預(yù)濕體積分析與過濾之間的平衡最佳流速高流速會造成過濾器堵塞（回流壓力）低流速會造成精細(xì)顆粒穿過過濾器的容積可以有效過濾的溶液體積,自動化方法建立,溫度研究萃取過程會造成萃取溶劑溫度的顯著上升溫度上升會造成因溶劑密度的改變導(dǎo)致稀釋誤差要妥善選擇溶劑和過程以使溶劑熱效應(yīng)最小能夠在計算中糾正上述問題，或需要在方法中附加浸泡/澄清時間來允許溶液降溫到室溫,自動方法建立,轉(zhuǎn)接同樣的液體通道每次都要使用每分析一個樣品后(最濃的)就分析一個空白樣品標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性蒸發(fā)和降解樣品穩(wěn)定性通常不是一個問題在重新測試穩(wěn)定性前，在典型的環(huán)境條件下，存放這些溶液一段可以達(dá)到希望的穩(wěn)定性的時間。,自動化方法建立,優(yōu)化從基質(zhì)中回收藥物崩解單元的速度萃取步驟時段萃取步驟數(shù)目浸泡時間和澄清時間,自動化方法建立,驗證的目標(biāo)和范圍自動系統(tǒng)描述驗證參數(shù)實驗程序接受標(biāo)準(zhǔn)論證極限偏差與修正,驗證方案,基本假設(shè)通過IQ、OQ、PQ和規(guī)范的性能核實建立起來的系統(tǒng)基本效能驗證參數(shù)等價性(如果存在有驗證過的手動方法）回收率(選項，如果存在有驗證過的手動方法）殘存度(積累性殘存度)重復(fù)性程式化,自動化放方法建立,等價性,與驗證過的手動方法一致比較手動與自動結(jié)果分析上還是統(tǒng)計上的差別?設(shè)置合理的判據(jù),等價性,含量均勻性/多重劑型含量均勻性：在全濃度（100%公稱濃度）范圍內(nèi)10個確測點（理想情況測3批總共30個樣品）批量含量：在全濃度（100%公稱濃度）范圍內(nèi)6個確測點（理想情況測3批總共18個樣品）通過手動方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)手動和自動方法平均差要滿足3%,等價性,降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似;所有超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足以下限度：1.0%+0.3%確定一個具有代表性的劑型，理想情況需要兩批不同樣品，還要與手動方法對這相同兩批樣品進(jìn)行比較,等價性,溶出每一個溶出需要6個全濃度范圍的確測量來確定(理想情況測3批總共18個樣品)通過手動方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)在樣品從同一次實驗中獲得的情況下,手動方法和自動方法之間的平均差異在Q時間點要求3%,否則if則要求滿足5%,等價性,溶出情況比較,回收率(準(zhǔn)確率),含量基質(zhì)的活性成分回收率等價實驗顯示回收率接近公稱濃度的100%在公稱濃度80%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收率每個水平+2%溶出在公稱濃度0%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收率每個水平+3%,含量均勻性樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的70130%中的最小范圍(3個濃度/3次復(fù)測=9個樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的2%批量測試樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的80120%中的最小范圍(3個濃度/3次復(fù)測=9個樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的2%,回收率(準(zhǔn)確率),降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似;所有超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足在前面列出的限度.在安慰劑中摻入可以得到的雜質(zhì)/降解產(chǎn)物，涵蓋公稱濃度的定量極限至130%(3個濃度/3次復(fù)測=9個樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的10%,回收率(準(zhǔn)確率),溶出樣品基質(zhì)的活性成分回收率是在Q時間點屬性的20%中的最小范圍(3個濃度/3次復(fù)測=9個樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的3%準(zhǔn)確率可以通過滿意的專屬性、線性和精度來保證,回收率(準(zhǔn)確率),殘存度,所有樣品使用相同的液體通道顯示系統(tǒng)有效的清洗和最小的交叉污染程序操作典型的樣品，接著做空白樣品分析在空白中殘留的活性成分在空白中活性成分的濃度小于前面分析樣品的1%或小于公稱濃度的1%,殘存度,片劑含量分析三個典型樣品，每一個樣品后分析一個空白計算觀察到的殘存度水平,殘存度,溶出分離每個容器的取樣線一般來說，一次活性測試緊跟一次空白測試所以容器都具有共同的取樣線在三個溶出容器中每一個都放入一片藥片進(jìn)行溶出操作接著進(jìn)行一次容器中沒有藥片的操作對其它兩個容器重復(fù)上面的步驟計算觀察到的殘存度水平,精度,精度精度說明產(chǎn)生一致性數(shù)據(jù)的能力可以比較兩個獨立操作的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比和平均值典型的接受標(biāo)準(zhǔn)含量測試:+2%（平均值）,+2%（相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）溶出操作:+3%fo（平均值）+3%（相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）,含量均勻性100%公稱濃度范圍需要10個確測點自動方法相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在手動方法RSD2%范圍，且不得超過6%沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足6%批量測試100%公稱濃度范圍需要6個確測點自動方法的RSD在手動方法RSD的2%范圍沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足3%,精度,降解物和雜質(zhì)對于已知雜質(zhì)數(shù)量的單批樣品或摻雜樣品的制劑需要6個確測點對于單個雜質(zhì)：RSD15%對于雜質(zhì)總量：RSD10%,精度,溶出100%公稱濃度范圍需要6個確測點自動方法的RSD不超過手動方法RSD的2%沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足3%,精度,重現(xiàn)性實驗室之內(nèi)：如果有一個以上系統(tǒng)實驗室之間：一般作為方法轉(zhuǎn)讓進(jìn)行穩(wěn)定性:樣品制備步驟的程式化在大量的方法建立中都有描述分析測量的程式化將類似于一般的程式化評價,重現(xiàn)性和程式化,參考文獻(xiàn),Chapter5:DevelopmentandValidationofAutomatedMethods,ChantalIncledonandHermanLam;AnalytcialMethodValidationandInstrumentPerformanceverification,ChungChowChan,Y.C.Lee,HermanLamandXueMingZhang,WileyInterScience,2004.DevelopmentandValidationofAutomatedMethodsforFinishedProductTesting,AWalshetal,PharmaceuticalTechnologyEurope,p44May,2000.DevelopmentandValidationofAnalyticalMethodsChristopherRileyandThomasRosanke,Perga