生物安全實驗室操作技術(shù)規(guī)范

.,1,生物安全實驗室操作技術(shù)規(guī)范,.,2,發(fā)展概況和我國現(xiàn)狀,國際概況20世紀5060年代1983年WHO第一版實驗室生物安全手冊（LaboratoryBiosafetyManual）1993年WHO發(fā)表了第二版實驗室生物安全手冊(LaboratoryBiosafetyManual，2ndedition)2002年WHO又發(fā)表了實驗室生物安全手冊第二版的網(wǎng)絡修訂版2004年正式發(fā)布了第三版。,.,3,關(guān)于實驗室生物安全規(guī)范化管理，美國、歐洲、加拿大等國家做得都比較好。在1993年由美國疾病預防控制中心/國立衛(wèi)生研究院（CDC/NIH）發(fā)布了BiosafetyintheMicrobiologicalandBiomedicalLaboratoriesManual,3theditionCDC/NIH1999年發(fā)布了第四版，目前已被國際公認為“金標準”。,.,4,國內(nèi)概況（1）：起步,進口少數(shù)BSL-3實驗室20世紀80年代我國自己研制第一個國產(chǎn)三級生物安全防護水平（biosafetylevel3,BSL-3）實驗室誕生我國也建造了一批此種防護水平或接近BSL-3水平的生物安全實驗室。2002年頒布了微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則（WS2332002），這是一個開創(chuàng)性工作。2003年獸醫(yī)實驗室生物安全通用標準并已頒布實施。,.,5,國內(nèi)概況（2）：SARS期間,2003年5月6日科技部、衛(wèi)生部、國家食品藥品監(jiān)督管理局和國家環(huán)境保護總局聯(lián)合發(fā)布了關(guān)于印發(fā)傳染性非典型肺炎病毒研究實驗室暫行管理辦法的通知。其內(nèi)容包括傳染性非典型肺炎病毒研究實驗室暫行管理辦法和傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動物模型的暫行管理辦法。,.,6,國內(nèi)概況（3）：國家標準,2003年8月開始起草，實驗室生物安全通用要求GB19489-2004。2004年5月中華人民共和國質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和中華人民共和國標準化管理委員會正式頒布了該標準。2004年9月1日中華人民共和國建設(shè)部與國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局又聯(lián)合發(fā)布了生物安全實驗室建設(shè)技術(shù)規(guī)范(GB50346-2004）,.,7,國內(nèi)概況（4）病原微生物實驗室生物安全管理條例,2004年11月12日，由溫家寶總理簽發(fā)中華人民共和國國務院令(第424號)公布施行病原微生物實驗室生物安全管理條例（簡稱條例）。該條例規(guī)定了在病原微生物實驗活動中保護實驗人員和公眾健康的宗旨，從而使我國病原微生物實驗室的管理工作步入法制化管理軌道。不言而喻，條例對我國防生物威脅和處理突發(fā)衛(wèi)生事件的建設(shè)具有現(xiàn)實的和深遠的意義。,.,8,臨床檢驗相關(guān)生物危險等級分布,.,9,病原微生物實驗室的有關(guān)概念一、生物學相關(guān)概念,1.生物因子（劑）(bio-agents):具有一定生物活性的制劑2.微生物（microbes,microorganisms）:微生物是指活的生物因子，包括能夠復制或基因物質(zhì)傳遞的細胞或非細胞的微小生物實體，其中包括致病和非致病的微生物。主要指細菌（螺旋體、立克次體、衣原體）、真菌、病毒和某些寄生蟲。3.病原體（pathogens）:病原體是能致病的生物因子，包括能夠引發(fā)人和動物、植物傳染病的生物因子，主要指致病微生物。,.,10,生物學相關(guān)概念,4、生物戰(zhàn)劑(agentofbio-war):5、生物氣溶膠(bioaerosol)：氣溶膠是指懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001-100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。分散相含有生物因子的氣溶膠。6.生物戰(zhàn)劑氣溶膠(bio-agentaerosol)：分散相含有生物戰(zhàn)劑的氣溶膠。氣溶膠噴灑是國外生物戰(zhàn)釋放生物戰(zhàn)劑的主要方式。,.,11,生物學相關(guān)概念,7.生物危害(bio-hazard)和生物危險(bio-risk)：生物危害是由生物因子形成的傷害。生物危險(bio-risk)是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴重性的綜合。8.危險廢物（hazardouswaste）：即有潛在危險的廢物，即可燃、易燃、腐蝕、有毒、傳染、放射或其他破壞作用的廢物,.,12,病原微生物實驗室的有關(guān)概念二、生物威脅概念,1生物威脅(bio-threat)：是指生物因子形成的使人憂慮的、可能發(fā)生的嚴重危害。2生物戰(zhàn)（bio-war）：是指用生物戰(zhàn)劑進行的戰(zhàn)爭。目前世界發(fā)達國家的生物武器相當先進，武器化能力很強；一些第三世界國家也掌握了生物武器，被稱為窮人的原子彈；一旦發(fā)生造成的災難不可設(shè)想國內(nèi)外有關(guān)專家認為發(fā)生生物戰(zhàn)的潛在危機正在增加，令人憂慮,.,13,病原微生物實驗室的有關(guān)概念二、生物威脅概念,3生物恐怖（bio-terror）：生物恐怖是遇到生物因子形成的危險和邪惡產(chǎn)生的極度恐懼。生物恐怖的特點是具有想象或未來時間較長的憂慮或恐懼。生物恐怖活動可利用的病原體種類很多、攻擊面寬、實施手段多種多樣、突然發(fā)生、真真假假難以預料和防護。,.,14,二、生物威脅概念,4基因武器（geneweapon）：指用基因工程研制的生物武器。現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展一方面為人類造福，另一方面也會被人利用發(fā)展武器?，F(xiàn)代生物技術(shù)能改變生物戰(zhàn)劑的攻擊性能，改變其抗原性使之難以診斷；增強其致病性以加強殺傷力；增強其存活力以延遲攻擊時間和擴大攻擊面積；增強其抗藥性造成治療困難；改變其基因特性形成基因武器。專家推測，基因武器能夠進行對人種的特異性攻擊。,.,15,二、生物威脅概念,5實驗室相關(guān)感染(laboratory-associatedinfection)：由于從事實驗活動而發(fā)生的與操作的生物因子相關(guān)的感染。在研究病原微生物中存在某種風險，如果在管理和操作病原體中一旦有所疏漏或錯誤就會發(fā)生實驗室感染，造成威脅，進而可能造成病原體擴散或傳染病的流行。6醫(yī)院感染(hospital-acquiredinfection)：醫(yī)院感染也叫醫(yī)院獲得性感染或院內(nèi)感染,指在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的一切感染。,.,16,二、生物威脅概念,7.人畜共患病(zoonosis):人和動物間相互傳播的傳染病。人的傳染病常常由動物傳播,可通過接觸經(jīng)皮膚和粘膜感染,也可經(jīng)消化道進入體內(nèi),更可通過氣溶膠經(jīng)呼吸道感染。8外來病(exoticdisease)：國外存在和流行的，國內(nèi)尚未證實存在或已被消滅的傳染病。9傳染?。╟ommunicabledisease）:是指由各病原體引起的一組具有傳染性的疾病。已有的一些烈性傳染病還沒有有效的預防和控制，已經(jīng)控制的一些傳染病有死灰復燃的勢頭，新的傳染病不斷出現(xiàn)，是我們面臨挑戰(zhàn)。,.,17,二、生物威脅概念,10突發(fā)公共衛(wèi)生事件(emergenteventsofhealth)：（簡稱突發(fā)事件），是指突然發(fā)生，造成或者可能造成社會公眾健康嚴重損害的重大傳染病疫情、群體性不明原因疾病、重大食物和職業(yè)中毒以及其他嚴重影響公眾健康的事件。突發(fā)公共衛(wèi)生事件的危害性和破壞性是多方面的，不僅危害公眾身體健康和生命安全、造成公眾心理恐懼，甚至導致社會混亂、經(jīng)濟衰退，威脅國家安全。,.,18,二、生物威脅概念,11食源性傳染?。╢oodborneinfectious：指通過飲食媒介經(jīng)消化道感染的疾病。第53屆世界衛(wèi)生大會上，世界衛(wèi)生組織將食品安全列為重要議題，并指出食源性疾病與食品污染是不斷擴大的公共衛(wèi)生問題。在過去的20年里，食源性疾病的發(fā)生率明顯上升。在發(fā)達國家，估計每年有13以上的人群感染食源性疾病。美國每年約有7000萬8000萬人患食源性疾病，其中32.5萬人入院治療，5000人死亡。,.,19,國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,病原微生物實驗室生物安全管理條例按危害程度將病原微生物分為四類：第四類危險程度最低，第一類危險程度最高，第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物實驗室生物安全通用要求（GB19489-2004）對微生物的危害進行分類，評價標準和等級劃分與WHO生物安全手冊第三版（2004）基本一致，但危害程度由4級至1級遞減,.,20,國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較不同標準微生物危害等級劃分與標準,.,21,國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理條例通用要求WHO安全手冊,.,22,國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理條例通用要求WHO安全手冊,.,23,國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理條例通用要求WHO安全手冊,.,24,我國對具體病原微生物的分類詳見衛(wèi)生部頒布的人間傳染的病原微生物名錄。該名錄除對病原微生物的危害分類標準除進行危害程度分類外，還規(guī)定了其不同實驗操作的防護水平以及運輸?shù)陌b要求。,.,25,四、生物安全防護相關(guān)概念（1）,1生物安全防護(bio-safetycontainment)：是指避免生物危險因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對生物體包括實驗室工作者在內(nèi)的傷害和對環(huán)境的污染的意識和措施。實驗室生物安全防護分為一級防護（屏障）(primarybarriers)二級防護（屏障）(secondarybarriers)。,.,26,四、生物安全防護相關(guān)概念（2）,2一級防護：包括兩方面內(nèi)容：（1）生物安全柜(biologicalsafetycabinet,BSC)和類似的設(shè)備等，分成三個級別；（2）個人防護裝備(personalprotectiveequipment,PPE)，也分成三個級別。3.二級防護:是指實驗室屏障設(shè)施，其建設(shè)有4種不同的結(jié)構(gòu)。各種一級防護和二級防護的組合構(gòu)成不同防護水平級別的實驗室（BSL-14）。,.,27,四、生物安全防護相關(guān)概念（3）,4.生物安全防護實驗室(biosafetycontainmentforlaboratories):指能夠避免或控制被操作的有害生物因子危險的實驗室。措施：通過規(guī)范的實驗室設(shè)計和精心施工、正確的實驗設(shè)備的配置、適合的個人防護裝備的使用、嚴格管理、翔實的操作規(guī)程（SOP)實現(xiàn)其功能。建造具有BSL-1和BSL-2的實驗室稱為基礎(chǔ)實驗室；具有BSL-3防護水平的實驗室被稱為生物安全防護實驗室；達到BSL-4水平的稱為高度生物防護實驗室。,.,28,四、生物安全防護相關(guān)概念（4）,5生物安全柜(bio-safetycabinet,BSCs)：是直接操作危險性微生物時所用的箱形安全設(shè)備，是生物安全實驗室必備的裝備，保護使用者和環(huán)境，保護樣品。按防護水平生物安全柜分為I級、II級、III級,II級的又分為4種類型(ClassIIA1、ClassIIA2、ClassIIB1和ClassIIB2)。,.,29,四、生物安全防護相關(guān)概念（5）,6安全罩(safetyhood)：即覆蓋在生物醫(yī)學實驗室工作臺或儀器設(shè)備上的內(nèi)部空氣壓力低于環(huán)境壓力的經(jīng)HEPA濾器過濾的排風罩，以減少對實驗室工作者和環(huán)境的危害。7圍場操作（enclose）：是指操作有害生物因子時，用物理防護設(shè)備把病原微生物局限在一定的空間內(nèi)，避免生物因子對人體的暴露和污染環(huán)境。,.,30,四、生物安全防護相關(guān)概念（6）,8氣鎖（airlock）和緩沖間（bufferroom）：氣鎖是設(shè)置在氣壓不同的鄰近二區(qū)之間的氣壓可調(diào)節(jié)的密閉小室，作為二區(qū)的過渡通道。緩沖間是設(shè)在生物安全實驗室的清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，或半污染區(qū)與污染區(qū)之間的類似于氣鎖的密閉小室，小室的兩門互鎖。,.,31,四、生物安全防護相關(guān)概念（7）,9個人防護裝備：用于防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的器材和裝備。其根本目的是屏蔽生物因子,不與人體發(fā)生直接接觸。我國在傳染病和微生物實驗室把個人防護分為三級。10實驗室分區(qū)(laboratoryarea)：我國把BSL-3和BSL-4實驗室平面布局明確分為：“三區(qū)二緩”的結(jié)構(gòu)。“三區(qū)”是指把實驗室分成污染(C)、潛在(半)污染(B)、清潔(A)三個功能區(qū)。,.,32,四、生物安全防護相關(guān)概念（8）,（1）清潔區(qū)：是指在正常情況下不可能有實驗因子的污染的區(qū)域。（2）半污染區(qū)：是指在正常情況下只有輕微污染可能的區(qū)域。此區(qū)的功能是大量的準備工作,例如培養(yǎng)基、細胞、制劑的配制、低溫冰箱的放置等。在此工作的人員要做好個人防護,如穿上一層防護服、戴口罩和手套等。（3）污染區(qū)：是指操作實驗因子的地方(BSL-3中心實驗室),在操作過程中一定會有污染的區(qū)域,有潛在嚴重污染的可能。,.,33,四、生物安全防護相關(guān)概念（9）,（4）緩沖間：是指在A和B之間,B和C之間的區(qū)域（小室）。緩沖間有送、排風進行凈化換氣,以保證在人員出入時污染空氣不會直接向清潔區(qū)擴散或分割到清潔區(qū)。其功能包括空氣隔離、更衣?lián)Q鞋、去污染消毒淋浴。（5）傳遞窗：在BSL-3的A和B,B和C之間各設(shè)一個物流通道,以便傳遞實驗物資。它也是2門連鎖,并可進行消毒。,.,34,實驗室生物安全,操作者,操作對象,環(huán)境,.,35,所有操作人員必須經(jīng)過培訓，通過考核，獲得上崗證書；在開始相關(guān)工作之前，應對所從事的病原微生物及相關(guān)操作進行危險評估，根據(jù)國家對于各種微生物操作的危險等級劃分和防護要求以及危險評估的結(jié)果，制定全面、細致的標準操作規(guī)程和程序文件，對于關(guān)鍵的危險步驟設(shè)計出可行的防護措施并對這些細節(jié)了然于胸；熟悉各級生物安全實驗室運行的一般規(guī)則，掌握各種儀器、設(shè)備、裝備的操作步驟和要點，對于各種可能的危害應非常熟悉；應掌握各種感染性物質(zhì)操作的一般準則和技術(shù)要點。,生物安全意識至關(guān)重要,.,36,實驗室感染的傳播鏈,容器中的病原體,泄漏,預防接種,感染途徑/感染劑量,傳播,個人防護裝備,易感宿主,規(guī)程/設(shè)備,潛伏期,醫(yī)學監(jiān)測,規(guī)程/設(shè)備,.,37,實驗室的生物安全規(guī)范,實驗室的運行規(guī)范儀器設(shè)備的使用規(guī)范針對感染性材料的操作規(guī)范個人防護用品的使用規(guī)范,.,38,LaboratoryBiosafetyManual,3rdedition-labcommissioningandcertification-labbiosecurityconcepts,Biosafety:Topromotetheuseofsafepracticesinthehandlingofpathogenicmicroorganismsinthelaboratoryduringtransportationinfieldinvestigationsinmanufacturingfacilitiesinhealth-carefacilities,LaboratoryBiosafetyManual1stedition,1983,1993,2003,2004,WHOLaboratoryBiosafetyManual,-translatedintoF,S,P,Ch,Ru-availableonweb,CD-Rom,hardcopies,.,39,病原微生物實驗室的生物危險,.,40,實驗室主要生物危害,微生物氣溶膠吸入刺傷、割傷皮膚、黏膜污染食入感染的實驗動物咬傷,還有許多不明原因的實驗室相關(guān)感染,.,41,Pike等對3921例實驗室相關(guān)感染統(tǒng)計分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，已知原因的實驗室感染只占全部感染的18，不明原因的實驗室感染卻高達82。對不明原因的實驗室感染的研究表明，大多數(shù)可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴散，實驗室內(nèi)工作人員吸入了污染的空氣感染發(fā)病的。,.,42,實驗室微生物氣溶膠的種類,飛沫核氣溶膠粉塵氣溶膠,兩類微生物氣溶膠對實驗室工作人員都具有嚴重的危害性，其程度取決于微生物本身的毒力、氣溶膠的濃度、氣溶膠粒子大小、以及當時實驗室內(nèi)的微小氣候條件。研究發(fā)現(xiàn)，粒徑100m的飛沫沉降很快，而粒徑5m的飛沫核能夠被呼吸道的粘膜捕獲。,.,43,產(chǎn)生微生物氣溶膠的其它因素,另外，一些在自然環(huán)境中可以繁殖的微生物，一旦進入實驗室的空調(diào)或通風系統(tǒng)，污染了空調(diào)的冷卻水，則可以形成更廣泛的微生物氣溶膠污染。除了實驗室操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠外，患有呼吸道傳染病或皮毛上染有病原微生物的實驗動物也可以產(chǎn)生微生物氣溶膠。微生物氣溶膠在一個實驗室內(nèi)產(chǎn)生后，還可以通過氣流轉(zhuǎn)移到同一建筑物的其他地方，甚至污染整個建筑物的空氣。,.,44,生物安全實驗室的運行規(guī)范,.,45,生物安全防護水平（BSL）,由一級防護屏障（安全設(shè)備）和二級防護屏障（實驗室設(shè)施）組合構(gòu)成四級生物安全水平。一級生物安全防護水平（BSL1）二級生物安全防護水平（BSL2）三級生物安全防護水平（BSL3）四級生物安全防護水平（BSL4）,.,46,一級生物安全防護水平（BSL1）,BSL1適合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、對實驗室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子（對應于我國的第四類危害的微生物）的工作。許多通常與人類疾病不相關(guān)的病原微生物是條件致病性的，在特定情況下，可以在兒童、老年人、免疫缺陷的和免疫抑制的個體中引起感染。對于在體內(nèi)已經(jīng)繁殖多代的疫苗株不要簡單地認為是無毒的。,.,47,一級生物安全防護水平（BSL1）,枯草桿菌、格氏阿米巴原蟲和感染性犬肝炎病毒是符合這些標準微生物的代表。BSL1不需要特殊的一級和二級屏障、除需要洗手池外，依靠標準的微生物操作即可獲得基本的防護水平。,.,48,BSL1實驗室,.,49,二級生物安全防護水平（BSL2）,二級生物安全防護水平是指實驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國的第三類（少量二類）危害的致病微生物。二級生物安全防護水平是適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織。,.,50,二級生物安全防護水平（BSL2）,接觸這些致病微生物的工作人員的主要危害是與感染性材料的偶然的皮膚或粘膜破損、或吞食感染性食物。必須強調(diào)對污染的針頭或利器的使用要非常謹慎。對未知是通過氣溶膠途徑傳播的微生物、具有可以增加工作人員暴露的可能氣溶膠或高度飛濺物的程序，二級生物安全防護水平微生物操作必需在一級生物安全防護水平的基礎(chǔ)之上，增加生物安全柜、高壓滅菌器、安全離心機罩帽、防濺罩或面罩等。,.,51,BSL2實驗室,.,52,BSL1實驗室安全設(shè)備的要求,BSL1實驗室對高壓滅菌器、離心機安全罩沒有要求；生物安全柜要求型生物安全柜。,.,53,BSL1實驗室安全設(shè)備的要求,防護服實驗室外套手套,.,54,BSL1實驗室安全設(shè)備的要求,另外,個人防護設(shè)備可能也需要面部防護眼睛防護,.,55,BSL2實驗室安全設(shè)備的要求,生物安全柜各實驗室根據(jù)實際情況選用合適的級A1型或B1型生物安全柜。生物安全柜應安裝在BSL2實驗室內(nèi)氣流流動小，人員走動少，離門和中央空調(diào)送風口較遠的地方。生物安全柜的周圍應有一定的空間，與墻壁至少保持30cm的距離，便于清潔環(huán)境衛(wèi)生。,.,56,BSL2實驗室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器高壓滅菌器應選擇立式或臺式不排氣（產(chǎn)生的蒸汽被回收）的，放置在BSL2實驗室內(nèi)，或門外。離心機安全罩不需要離心機安全罩。洗眼器應根據(jù)實驗室的實驗活動內(nèi)容，確定是否需要安裝洗眼器。如果需要洗眼器，則應安裝在BSL2實驗室內(nèi)靠近出口的地方。,.,57,一、BSL-1和BSL-2實驗室,.,58,（一）BSL-1和BSL-2實驗室的進入,未經(jīng)批準，任何人不得進入實驗室工作區(qū)域。兒童不得進入實驗室工作區(qū)域。可能增加獲得性感染的危險性或感染后可能引起嚴重后果的人員不允許進入實驗室或動物房。BSL-2實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志，包括通用的生物危險性標志，標明傳染因子、實驗室負責人或其他人姓名、電話、以及進入實驗室的特殊要求。實驗室的門應保持關(guān)閉。工作人員進入動物房應當經(jīng)過特別批準。與實驗室工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。,.,59,（二）BSL-1和BSL-2防護要求,在實驗室工作時，必須穿著合適的工作服或防護服。在進行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應戴上合適的手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后必須洗手。在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰撞或人工紫外線輻射的傷害，必須戴合適的安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護設(shè)備。嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室工作區(qū)域。不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋。禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。,.,60,（三）BSL-1和BSL-2有關(guān)操作的指導原則,嚴禁用口吸移液管,嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。所有的實驗操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。應限制使用注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液外，注射針頭和注射器不能用于移液或用作其他用途。實驗室應制訂并執(zhí)行處理溢出物的標準操作程序。出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾?。實驗室應如實記錄有關(guān)暴露和處理的情況，保存相關(guān)記錄。污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學或物理學方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果準備專門的污水處理系統(tǒng)。只有保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染的文件紙張才能帶出實驗室,.,61,（四）BSL-1和BSL-2實驗室工作區(qū)的管理原則,實驗室應保持清潔整齊，嚴禁擺放和實驗無關(guān)的物品。每天工作結(jié)束后應清除工作臺面的污染。若發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出應立即清除污染。所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須先清除污染。感染性材料的包裝和運輸應遵循國家和或國際的相關(guān)規(guī)定。如果窗戶可以打開，則應安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗。,.,62,（五）BSL-1和BSL-2生物安全管理的指導原則,實驗室負責人負責制訂和采用生物安全管理計劃以及實驗室安全或/和操作手冊。實驗室應能提供常規(guī)的實驗室安全培訓,并建立制度。實驗室負責人（或生物安全負責人）要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員，同時要求他們閱讀生物安全或/和操作手冊，并遵循標準的操作程序。實驗室內(nèi)應備有可供取閱的安全或/或操作手冊。所有實驗室人員必須經(jīng)過培訓，了解所從事工作的危險、掌握有關(guān)的管理規(guī)定和操作程序，通過考核后方可從事相關(guān)實驗室工作。應當制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。如有必要，應為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療，并建立健康檔案。實驗室人員應接受與所操作生物因子或?qū)嶒炇覂?nèi)潛在的因子相關(guān)的免疫接種或檢測。,.,63,三級生物安全防護水平（BSL3）,三級生物安全防護水平是指實驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國第二類（個別第一類）病原微生物。這些致病微生物對工作人員的主要危害是與自身接種(自傷)、吞服、和暴露于感染性氣溶膠。,.,64,三級生物安全防護水平（BSL3）,三級生物安全防護水平有嚴格的一級防護屏障和二級防護屏障的要求，以防止相鄰區(qū)域的工作人員、社會和環(huán)境暴露于可能的感染性氣溶膠。例如，所有實驗室操作應該在生物安全柜或其它密閉容器中操作，諸如氣密型氣溶膠發(fā)生柜。這一水平的二級屏障包括實驗室的控制入口和為減小感染性氣溶膠從實驗室釋放的特殊通風系統(tǒng)。,.,65,BSL3實驗室,.,66,BSL3實驗室安全設(shè)備的要求,生物安全柜BSL3實驗室必須安裝和使用生物安全柜，應根據(jù)病原微生物試驗活動的內(nèi)容的不同，選擇不同型別的生物安全柜。級A2型、B1型生物安全柜，B2型生物安全柜也可以使用，但因換氣量太大，對實驗室負壓和氣流的影響比較大，一般不需要使用級B2生物安全柜；少數(shù)特殊操作（如感染的中型和大型動物解剖）可以使用級B2生物安全柜。另外，BSL3實驗室內(nèi)安裝級生物安全柜時，要充分考慮實驗室和生物安全柜的氣流平衡和回流的問題。生物安全柜排風口與排風管道之間可以通過硬連接，也可以通過套管結(jié)構(gòu)連接，無論是那一種連接方式，排風管道中都應有止回閥，且排風管道中還應有一道HEPA過濾器。,.,67,BSL3安全設(shè)備(一級屏障),在BSL-1and2安全設(shè)備的基礎(chǔ)上，加:呼吸道保護,.,68,BSL3實驗室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器在BSL3實驗室的半污染區(qū)和清潔區(qū)之間，宜安裝雙扉生物安全型高壓滅菌器，即高壓滅菌器跨墻安裝，雙門互鎖結(jié)構(gòu)，且對高壓產(chǎn)生的蒸汽具有回收再高壓的性能。高壓滅菌器的安裝，必須確保高壓滅菌器與墻體之間的密封，不能夠有一點泄漏。污染區(qū)內(nèi)應設(shè)置不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器或其他消毒裝置。,.,69,BSL3實驗室安全設(shè)備的要求,離心機安全罩是否需要離心機安全罩，取決于離心機的類型。如果是傳統(tǒng)型的離心機，最好安裝離心機安全罩；如果離心機是新式生物安全型的，即負壓離心機或有離心杯帽的離心機，則不需要離心機安全罩。離心機和安全罩宜靠近排風口。,.,70,BSL3實驗室安全設(shè)備的要求,洗手裝置應在污染區(qū)和半污染區(qū)出口處設(shè)洗手裝置。洗手裝置的供水應為非手動開關(guān)。供水管應安裝防回流裝置。不得在實驗室內(nèi)安設(shè)地漏。下水道應與建筑物的下水管線完全隔離，且有明顯標識。下水應直接通往獨立的液體消毒系統(tǒng)集中收集，經(jīng)有效消毒后處置。,.,71,四級生物安全防護水平（BSL4）,四級生物安全防護水平是指實驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國第一類病原微生物。另外，與四級生物安全防護水平的微生物具有相近的或一致的抗原關(guān)系的微生物也應該在該防護水平進行研究。,.,72,四級生物安全防護水平（BSL4）,四級生物安全防護水平的微生物對工作人員的主要危害是呼吸道暴露于感染性氣溶膠、粘膜暴露于感染性飛沫、和自身接種。所有操作可能具有感染性的診斷材料、分離培養(yǎng)物、以及自然或?qū)嶒灨腥镜膭游飼r，實驗室工作人員、社會和環(huán)境均可造成高度危險的感染。,.,73,四級生物安全防護水平（BSL4）,III級生物安全柜或全身正壓防護服能夠把實驗室工作人員與氣溶膠的化感染性材料完全隔離開。四級生物安全防護水平設(shè)施一般是獨立建筑物或具有復雜的、特殊的通風系統(tǒng)和防止活的微生物釋放到環(huán)境中的污物處理系統(tǒng)與其它建筑完全隔離。,.,74,BSL4實驗室安全設(shè)備的要求,生物安全柜BSL4實驗室必須安裝和使用生物安全柜，應根據(jù)病原微生物試驗活動的內(nèi)容的不同，可以選擇級B型和級兩種不同型別的生物安全柜。在正壓防護服型BSL4實驗室內(nèi)，可以選擇級生物安全柜；在生物安全柜型BSL4實驗室中，選擇級生物安全柜；在混合型BSL4實驗室中，應選擇級生物安全柜。,.,75,BSL4實驗室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器根據(jù)實驗室生物安全通用要求GB194892004的要求，應在半污染區(qū)和清潔區(qū)墻上、半污染區(qū)和污染區(qū)墻上設(shè)置不排蒸汽的雙扉高