【國家標(biāo)準(zhǔn)】GB 5413.26-2010 嬰幼兒食品和乳品中?；撬岬臏y定(發(fā)布稿.僅供參考-標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng))

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中?；撬岬臏y定 of in 華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布 2010布 2010施 010 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)第二法等同采用國際分析家學(xué)會（ in 本標(biāo)準(zhǔn)代替 幼兒食品和乳粉 ?；撬岬臏y定。 本標(biāo)準(zhǔn)與 要變化如下： 將原標(biāo)準(zhǔn)方法 增加單磺酰氯柱前衍生高效液相色譜法為第二法； 對原標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了修改。 外標(biāo)法定量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法； 增加附錄 A 標(biāo)樣的液相色譜圖。 本標(biāo)準(zhǔn)附錄 本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： 413 010 1 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中?；撬岬臏y定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中?；撬岬臏y定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中牛磺酸的測定。 2 規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 第一法 后衍生法 3 原理 樣品用偏磷酸溶液溶解，經(jīng)超聲波振蕩提取、離心、微孔濾膜過濾后，通過鈉離子色譜柱分離，與鄰苯二甲醛（ 生反應(yīng)，用熒光檢測器進(jìn)行檢測，外標(biāo)法定量。 4 試劑和材料 除非另有規(guī)定，所用試劑均為分析純，水為 6682 規(guī)定的一級水。 磷酸（ 檬酸三鈉( 酚( 酸( 醇( 色譜純。 酸( 氧化鉀( 苯二甲醛( 氧乙烯月桂酸醚（ 磺酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度 99%。 磷酸溶液（ 10 g/L）：稱取 10.0 g 偏磷酸（ 用水溶解并定容至 1000 010 2 檬酸緩沖液：稱取 19.6 g 檸檬酸三鈉（ 加 950 溶解，加入 1 酚（ 用硝酸（ 至 孔濾膜過濾。 后熒光衍生溶劑（鄰苯二甲醛溶液） 硼酸鉀溶液（ 0.5 ）：稱取 30.9 g 硼酸（ 26.3 g 氫氧化鉀（ 用水溶解并定容至 1000 鄰苯二甲醛衍生溶液：稱取 g 鄰苯二甲醛（ 用 10 醇（ 解后，加入 0.5 g 用 0.5 的硼酸鉀溶液（ 容至 1000 m 微孔濾膜過濾。臨用前配制。 磺酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 ?；撬針?biāo)準(zhǔn)儲備溶液（ 1mg/：準(zhǔn)確稱取 g ?；撬針?biāo)準(zhǔn)品（ ，用水溶解并定容至 100 備液在 4下可保存 7 天。 ?；撬針?biāo)準(zhǔn)工作液：將?；撬針?biāo)準(zhǔn)儲備液（ 水稀釋制備一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為： 0、 5、 10、 15、 20 g/用前配制。 5 儀器和設(shè)備 效液相色譜儀，帶有熒光檢測器。 后反應(yīng)器。 光衍生溶劑輸液泵。 聲波振蕩器。 5.5 ：精度為 心機(jī)：轉(zhuǎn)速 5000 轉(zhuǎn) /分鐘。 m 微孔濾膜。 平：感量為 1 6 分析步驟 樣的處理 準(zhǔn)確稱取固體樣品 1 g 5 g 試樣，液體樣品 5 g 20 g（精確至 樣中含?；撬?5 g 以上） ，加 30 磷酸溶液 （ 溶解， 充分搖勻， 移入 100 量瓶中； 放入超聲波振蕩器中振蕩 10 5 取出冷卻至室溫后， 用水定容至刻度； 樣液在 5000 轉(zhuǎn) /分鐘條件下離心 10 取上清液經(jīng) m 微孔膜（ 濾，接取中間濾液以備進(jìn)樣。 定 考色譜條件 色譜柱：鈉離子氨基酸分析專用柱（ 250 .6 同等性能的色譜柱。 流動相：檸檬酸緩沖液（ 。 流動相流速： mL/ 010 3 熒光衍生溶劑流速： mL/ 柱溫： 55 。 檢測波長：激發(fā)波長： 338 射波長： 425 進(jìn)樣量： 20 L。 準(zhǔn)曲線繪制 將?；撬針?biāo)準(zhǔn)系列工作液（ 次經(jīng)衍生后按上述推薦色譜條件上機(jī)測定，記錄色譜峰面積，色譜圖參見附錄 A。以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 液測定 將試液按上述推薦色譜條件上機(jī)測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得試液相應(yīng)的濃度。 7 分析結(jié)果的表述 果計算 1000100=( 1) 式中： X 試樣中?；撬岬暮?，單位為毫克 /100 克（ 00g） ； c 試液的進(jìn)樣濃度，單位為微克 /毫升（ g/； V試樣定容容積，單位為毫升（ ； m試樣質(zhì)量，單位為克（ g） 。 果表示 以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。 8 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 10 %。 第二法 單磺酰氯柱前衍生法 9 原理 樣品用水溶解，用亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀蛋白質(zhì)。取上清液用丹磺酰氯衍生反應(yīng)，衍生物經(jīng) 紫外檢測器（波長 254 熒光檢測器（激發(fā)波長 330 射波長 530 測，外標(biāo)法定量。 10 試劑和材料 除非另有規(guī)定，所用試劑均為分析純，水為 6682 規(guī)定的一級水。 腈（ ：色譜純。 乙酸（ 。 酸。 水碳酸鈉（ 。 010 4 鐵氰化鉀 N)6。 酸鋅 。 酸鈉 。 酸甲胺（甲胺鹽酸鹽） （ 。 磺酰氯（ 51色譜純。 注： 丹磺酰氯對光和濕敏感不穩(wěn)定。 磺酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度 99%。 酸（ 1 ） ：吸取 9 酸（ ，用水稀釋并定容到 100 淀劑 沉淀劑：稱取 15.0 g 亞鐵氰化鉀（ ，用水溶解并定容至 100 沉淀劑在室溫下 3個月內(nèi)穩(wěn)定。 沉淀劑：稱取 30.0 g 乙酸鋅（ ，用水溶解并定容至 100 沉淀劑在室溫下 3 個月內(nèi)保持穩(wěn)定。 酸鈉緩沖液（ （ 80 ） ：稱取 g 無水碳酸鈉（ ，加 40 溶解，用1 鹽酸（ 至 水定容至 50 溶液在室溫下 3 個月內(nèi)穩(wěn)定。 磺酰氯溶液 （ 1.5 mg/： 稱取 g 丹磺酰氯 （ ， 用乙腈 （ 溶解并定容至 100使用前配制。 酸甲胺溶液（ 20 mg/：稱取 2.0 g 鹽酸甲胺（ ，用水溶解并定容至 100 溶液在 4下 3 個月內(nèi)穩(wěn)定。 酸鈉緩沖液（ （ 10 ） ：稱取 g 乙酸鈉（ ，加 800 溶解，用冰乙酸（ 節(jié) 至 水定容至 1000 m 微孔濾膜過濾。 磺酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 ?；撬針?biāo)準(zhǔn)儲備溶液（ 1 mg/：稱取 g ?；撬針?biāo)準(zhǔn)品（ ，用水溶解并定容至100 備液在 4下可保存 7 天。 ?；撬針?biāo)準(zhǔn)工作液（紫外檢測用） ：將牛磺酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液（ 水稀釋制備一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為： 0、 5、 10、 15、 20 g/用前配制。 ?；撬針?biāo)準(zhǔn)工作液（熒光檢測用） ：將?；撬針?biāo)準(zhǔn)儲備液（ 水稀釋制備一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為： 0、 g/用前配制。 11 儀器和設(shè)備 效液相色譜儀，帶紫外檢測器或二極管陣列檢測器或者熒光檢測器。 11.2 ：精度為 旋混合器。 聲波振蕩器。 010 5 心機(jī)：轉(zhuǎn)速 5000 轉(zhuǎn) /分鐘。 m 微孔濾膜。 平：感量 1 12 操作步驟 樣的處理 液提取 稱取固體樣品 1 g 5 g，液體樣品 5 g 30 g 試樣（精確至 g，若用紫外檢測器，試樣中含?；撬嵋嗽?1 g 以上，若用熒光檢測器，試樣中含?；撬嵋嗽?50g 以上）于 100 量瓶中，加入 80 50 60 ）溶解，充分混勻，置超聲波振蕩器上振蕩 10 卻到室溫。加 1.0 淀劑（ ，渦旋混合， 1.0 淀劑（ ，渦旋混合，用水定容至刻度，充分混勻，試液于 5000 轉(zhuǎn) /分鐘下離心 10 上清液備用。上清液在 4 暗處保存放置 24 h 穩(wěn)定。 液衍生化 吸取 述上清液到 10 塞玻璃試管中，加入 酸鈉緩沖液（ ， ，充分混合，室溫避光衍生反應(yīng) 2 h（ 1 h 后需搖晃 1 次） ，加入 酸甲胺溶液（ 旋混合，以終止反應(yīng)，避光靜置至沉淀完全。取上清液經(jīng) m 微孔濾膜（ 濾，取濾液備用。衍生物在 4 可避光保存 48 h。 另取 準(zhǔn)工作液（ 與試液同步進(jìn)行衍生。 定 考色譜條件 色譜柱： 徑 5 m， 250 .6 同等性能色譜柱。 流動相： 10 乙酸鈉緩沖液（ 乙腈（ 70+30。 流速： mL/ 柱溫：室溫。 檢測波長：紫外檢測器或二極管陣列檢測器： 254 或熒光檢測器：激發(fā)波長： 330 射波長： 530 進(jìn)樣量： 20 L。 準(zhǔn)曲線繪制 將?；撬針?biāo)準(zhǔn)系列工作液（紫外檢測用）（ （熒光檢測用）（ 衍生物依次按上述推薦色譜條件上機(jī)測定，記錄色譜峰面積，色譜圖參見附錄 A。以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 液測定 將試液衍生物按上述推薦色譜條件上機(jī)測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得試液相應(yīng)的濃度。 13 分析結(jié)果的表述 試樣中牛磺酸的含量按式（ 2）計算： 1000100=( 2) 式中： X試樣中?；撬岬暮?，單位為毫克 /100 克（ 00g） ； 010 6 c試液的進(jìn)樣濃度，單位為微克 /毫升（ g/； V試樣定容體積，單位為毫升（ ； m試樣質(zhì)量，單位為克（ g） 。 以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。 14 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 10 %。 15 其他 本標(biāo)準(zhǔn)的定量限為： 當(dāng)取樣量為 g 時， 第一法 0.5 00g ， 第二法中紫外檢測法為 5 00g，熒光檢測法