藥物分析》維生素類藥物的分析.ppt

1、第九章 維生素類藥物的分析 Analysis of Vitamines,維生素A 維生素B1 維生素C 維生素E,第一節(jié) 維生素A( Vit A),2-Cis Neovitamin Aa 2,6-dicis Isovitamin Ab 4-Cis Neovitamin Ab 2,4-dicis Neovitamin Ac 6-Cis Isovitamin Aa,Retinol (Vit A alcohol),VA acetate,VA polmitate,Vit A含量表示,I.U.(international Unit) 國際單位 效價(I.U./g) 按WHO規(guī)定 VA acetate V

2、A alcohol 效價(I.U./g) 2.907106 3.33106 1g pure VA acetate 2.907106I.U.,按WHO規(guī)定 VA acetate,VA alcohol,Vit A含量表示,I.U.(international Unit) 國際單位,效價(I.U./g),效價(I.U./g) 2.907106,3.33106,1g pure VA acetate 2.907106I.U.,第一法,測定VA acetate 環(huán)己烷為溶劑 max328nm,Vit A UV法校正公式,第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340),若 在3%范

3、圍，則仍以A328計算含量,若 在-15%-3%范圍，則以A325(校正)計算含量,若 3%，或-15%，則采用第二法,第二法 測定其他維生素,第一法未通過，包括：,則A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334,酯 乙醚提取VA醇，洗滌，過濾 溶于異丙醇,在 300，310，325，334nm處分別測A 當max為323327nm，A300nm/A325nm0.73, 若 在3%范圍，則仍以A325計算含量,若max不在323327nm，或者 A300nm/A325nm0.73,表明干擾雜質(zhì)含量過高，則可采用色譜法將未皂化部分純化后再進行測定,第一法 A328

4、(校正)=3.25(2A328- A316 -A340),Vit A sample,pure VA acetate,impurities,校正公式由來,用幾何圖形推導(dǎo)出公式,A325(校正)=7A325-2.625A310-4.375A334,比實際值高出2.62.7% 故扣除2.65%得第二法校正公式,A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334,稱取Vit A滴劑0.1082g(標示量50 000I.U./g)，加環(huán)已烷至50.0ml，取出5.0ml置于另一50 ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，搖勻后置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長處測得相應(yīng)的吸收

5、度值，試求此滴劑中Vit A的標示量百分率：,精密稱取Vit A滴劑0.06126g(標示量50000 I.U./g)，置于25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，精密吸取2ml置于另一25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，并混勻，置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長處測得吸收度值，試求此滴劑中Vit A為標示量的百分含量：,第二節(jié) 維生素B1( Vit B1),H2O,結(jié)構(gòu)特點與鑒別,噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可被高鐵氰化鉀等氧化劑氧化，然后與嘧啶環(huán)上的-NH2縮合生成具有熒光的硫色素，后者易溶于異丁醇中顯強烈的藍色熒光，該反應(yīng)又稱為硫色素熒光反應(yīng)。為維生素B1所特有,生成沉淀反應(yīng),分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，

6、易與生物堿沉淀劑 (碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸， 雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀,維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS,含量測定 Assay,硅鎢酸重量法 Silicotungstic Acid Gravimetry,非水溶液滴定法 Non-aqueous Titrimetry,硫色素熒光法 Thiochrone Fluoremetry,Vit B1 硅鎢酸重量法,2Vit B1+過量硅鎢酸*,第三節(jié) 維生素C( Vit C),L-抗壞血酸 L-去氫抗壞血酸 L-二酮古羅糖酸,有生物活性 有生物活性 無生物活性,H2O,含量測定,碘量法,2,

7、6-二氯靛酚法,第五節(jié) 維生素E( Vit E),Vit E (dl-Tocopheryl Acetate),-Tocopheryl 52.0 68.0,-Tocopheryl 9.3 22.0,-Tocopheryl 28.0 5.0,-Tocopheryl 10.7 5.0,ChP VE 中檢查生育酚,取Vit E 0.1g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺T.S.1滴，用硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)不得過1.0ml,固定液：5% SE30柱 溫：25510檢測器：FID內(nèi) 標：十六酸十六醇酯,鈰量法(%) GC(%) 97.91 83.5

8、3 97.99 82.51 98.48 85.09,14.54VE,24.40內(nèi)標,中國藥典 維生素E色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 System Suitability Tests SST,以硅酮(OV-17)為固定相，涂布濃度為2%；柱溫為265，理論板數(shù)按VE峰計算，應(yīng)不低于500，VE峰與內(nèi)標峰的分離度應(yīng)大于2。內(nèi)標：正三十二烷,校正因子測定,取正三十二烷適量，加正已烷溶解并稀釋成每1ml中含1.0g的溶液，搖勻，作為內(nèi)標溶液。另取Vit E對照品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標溶液10ml，密塞，振搖使溶解；取13l注入氣相色譜儀，計算校正因子 測定法 取本品約20m

9、g，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標溶液10ml，密塞，振搖使溶解；取13l注入氣相色譜儀，測定，計算，即得,JP Vit E: dl-生育酚,色譜柱：ODS 1530cm4mm 510m 流動相：甲醇-水 (491) 流 速：調(diào)整到生育酚的tr10min UVD：292nm R2.6 人血清中VA和VE的含量測定 Waters -Bondapak C18 30cm3.9mm Resolve C18 預(yù)柱 甲醇-水 (964)，1.2ml/min UVD：08min 330nm 8min后 292nm 血清樣品的制備 血樣離心后，分離血清，置5ml塑料試管中， 充N2密封，于-40保存?zhèn)溆?4,6 Cholestadienol,USP 24,Cleanup column 30cm4.6mm C8 Mobile phase A CH3CNCH3OHH2O 25 25 1 The amount of H2O & the flow rate may be varied to meet sy