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文檔簡介

1、第一章 緒論要點(diǎn)難點(diǎn)1必須掌握分子生物學(xué)的基本概念;2一般了解分子生物學(xué)發(fā)展簡史,特別是那些與分子生物學(xué)發(fā)展有密切關(guān)系的關(guān)鍵事件;3熟悉分子生物學(xué) (一)分子生物學(xué)的基本概念1分子生物學(xué)術(shù)語2分子生物學(xué)的任務(wù)(二)分子生物學(xué)誕生的背景及發(fā)展簡史 發(fā)展史表1早期的分子生物學(xué)發(fā)展動態(tài)2現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展(三)分子生物學(xué)的研究內(nèi)容1DNA重組技術(shù)2基因表達(dá)調(diào)控3結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)4基因組5功能基因組6生物信息學(xué)(四)分子生物學(xué)發(fā)展前景展望、它與其它學(xué)科的關(guān)系 習(xí)題一、名詞解釋1分子生物學(xué)(Molecular biology)2DNA重組技術(shù)(Recombinant DNA techniques)3基因

2、(gene)二、填空題1分子生物學(xué)是研究核酸等生物大分子的 、 、 及其重要性和規(guī)律性的科學(xué),是人類從 水平上真正揭開生物世界的奧秘,由被動地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科。2分子生物學(xué)主要研究核酸在細(xì)胞生命過程中的作用,包括 的復(fù)制、 以及基因的 規(guī)律,所以,這門學(xué)科其實應(yīng)該叫做核酸生物學(xué)(biology of nucleic acid)。31869年米歇爾(Friedrich Miescher)分離出 。41928年格里菲斯(Frederick Griffith)發(fā)現(xiàn)了一種可以在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移的 。51953年沃森(James Watson)和克里克(Francis Cric

3、k)在 雜志上發(fā)表DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的論文。正是由于這個模型,他們獲得 年諾貝爾獎。6D.Baltimore;H.Temin,美國科學(xué)家。由于他們各自發(fā)現(xiàn)了 ,打破了中心法則,該酶能使mRNA反轉(zhuǎn)錄成 ,使真核基因的克隆表達(dá)成為可能,為病毒學(xué)、遺傳學(xué)、基因工程作出了重大貢獻(xiàn),他們獲得 年諾貝爾獎。71972年P(guān)aul Berg創(chuàng)造出第一個 分子。81973年Herbert Boyer和Stanley Cohen發(fā)展了 技術(shù),發(fā)現(xiàn)改造后的DNA分子可在外來細(xì)胞中復(fù)制。S.Cohen,在質(zhì)粒的研究中作出了開創(chuàng)性的研究,1973年他又第一個實現(xiàn)了 的轉(zhuǎn)移,創(chuàng)立了 重組模式。科學(xué)界把這一年定為_ 誕生之

4、年,以紀(jì)念這位基因工程的創(chuàng)始人。91977年Walter Gilbert,Allan M. Maxam和Frederick Sanger開發(fā)出 測序技術(shù)。F.Sanger,英國劍橋大學(xué)教授。由于他在 一級結(jié)構(gòu)和核酸序列分析方面的天才創(chuàng)造和震驚世界的成果,在 年和 年先后兩次獲得諾貝爾獎。他是生物醫(yī)學(xué)科學(xué)領(lǐng)域里唯一兩次獲得這一最高榮譽(yù)的偉大科學(xué)家。101978,P.Berg首次用SV40作載體與噬菌體實現(xiàn)了 的重組。由于他在重組DNA技術(shù)方面的功績獲得 年諾貝爾獎。111982年 數(shù)據(jù)庫建立。121983年Kary Mullis發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),并因此獲 年諾貝爾獎。13199

5、8年6月29日美國宣布正式啟動 計劃,世界各國也開始加大投入,以生物芯片為核心的相關(guān)產(chǎn)業(yè)正在全球崛起,專家統(tǒng)計:全球目前生物芯片工業(yè)產(chǎn)值為10億美元左右,預(yù)計今后5年之內(nèi),生物芯片的市場銷售可達(dá)到200億美元以上。142001年2月,Nature和Science同時發(fā)表了 ,這是人類歷史上最偉大的成就之一。152003年人類基因組計劃宣布,人類基因組 繪制成功,人類基因組計劃的所有目標(biāo)全部實現(xiàn)。三、選擇題(單選或多選)11869年首先分離出核酸的科學(xué)家是 ( )(a)Walter Flemming(b)Archibald Garrod(c)Friedrich Miescher(d)Thomas

6、 Hunt Morgan(e)Alfred Henry Sturtevant21944年指出Griffith發(fā)現(xiàn)的遺傳分子就是DNA的科學(xué)家是 ( )(a)Oswald Avery(b)Colin Macleod(c)Maclyn McCarty(d)Rosalind Franklin(e)Linus Pauling31961年根據(jù)試驗,提出在分子水平上特定基因被激活或抑制的機(jī)制乳糖操縱子學(xué)說的科學(xué)家是 ( )(a)Friedrich Miescher(b)Maclyn McCarty(c)Francois Jacob(d)Jacques Monod(e)Marshall Nirenberg4

7、有位科學(xué)家首先發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶,打破了中心法則,該酶能使mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,使真核基因的克隆表達(dá)成為可能,為病毒學(xué)、遺傳學(xué)、基因工程作出了重大貢獻(xiàn),他們獲得1965年諾貝爾獎。這位科學(xué)家是 ( )(a)Jacques Monod(b)D.Baltimore(c)H.Temin(d)Marshall Nirenberg(e)Robert Holley51973年發(fā)展了重組DNA技術(shù),發(fā)現(xiàn)改造后的DNA分子可在外來細(xì)胞中復(fù)制。這位科學(xué)家是 ( )(a)Herbert Boyer(b)Stanley Cohen(c)H.Temin(d)Marshall Nirenberg(e)Robert Ho

8、lley答案部分第一章 緒 論一、名詞解釋1分子生物學(xué)(Molecular biology)答:分子生物學(xué)是從分子水平上研究生命本質(zhì)的一門新興邊緣學(xué)科,廣義的講,一切從分子水平研究生命奧秘的研究工作都是分子生物學(xué)。它是研究核酸等生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能、及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對象,是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。2DNA重組技術(shù)(Recombinant DNA techniques)答:DNA重組技術(shù)(又稱基因工程),它是將不同的DNA片段(某個基因或基因的一部分)按照人們的設(shè)計定向連接起來,在特定的受體細(xì)胞中與載體同時復(fù)制并得到表

9、達(dá),產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀。嚴(yán)格地說,DNA重組技術(shù)并不完全等于基因工程,因為后者還包括其他可能使生物細(xì)胞基因組結(jié)構(gòu)得到改進(jìn)的體系。3基因(gene)答:基因(gene)是DNA(脫氧核糖核酸)分子上具有遺傳效應(yīng)的特定核苷酸序列的總稱,是具有遺傳效應(yīng)的DNA分子片段,是合成一種功能蛋白或RNA分子所必須的全部DNA序列。二、填空題1形態(tài);結(jié)構(gòu);功能;分子 2核酸本身;表達(dá)與調(diào)控 3核酸 4遺傳分子 5自然;1958 6逆轉(zhuǎn)錄酶;cDNA;1965 7重組DNA 8重組DNA;細(xì)菌間抗藥性基因;基因工程;基因工程 9DNA;蛋白質(zhì);1958;1980 10兩種病毒DNA;1980 11G

10、enBank 12Kary Mullis;1993 13生物芯片 14人類基因組全序列 15序列圖三、選擇題1c;2a,b,c;3c,d;4b,c;5a,b第二章 染色體與DNA要點(diǎn)難點(diǎn)1必須掌握一些基本概念:DNA的一級結(jié)構(gòu)、高級結(jié)構(gòu)、復(fù)制子、組蛋白、非組蛋白、基因組、DNA類型、2熟悉染色體的基本成分和基本結(jié)構(gòu)單位3領(lǐng)會原核生物和真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)4探討各種各類生物的DNA復(fù)制的基本概念和過程;參與工作的酶或蛋白質(zhì),真核生物與原核生物DNA復(fù)制特點(diǎn)。5分析在DNA復(fù)制時出現(xiàn)錯誤的修復(fù)方式;6了解轉(zhuǎn)座子的分類和結(jié)構(gòu)特征以及大腸桿菌的基因.掌握轉(zhuǎn)座機(jī)制和轉(zhuǎn)座效應(yīng)。主要內(nèi)容(一)染色體染色

11、體概述;1染色體基本成分:組蛋白,非組蛋白,DNA2染色體基本單位:核小體(二)基因與基因組1.基因與基因組的概念2.基因組和C值矛盾3.真核基因組的結(jié)構(gòu)特征(與原核基因組的比較)4.真核基因組DNA類型:(1)重復(fù)序列:單拷貝,中度重復(fù),高度重復(fù)(衛(wèi)星DNA,小衛(wèi)星DNA,微衛(wèi)星DNA)(2)核外基因組:線粒體基因組、葉綠體基因組5.原核生物基因組特點(diǎn)(三)DNA的結(jié)構(gòu) 1DNA一、二、三級結(jié)構(gòu) 2DNA變性與復(fù)性(四)DNA的復(fù)制:1DNA在遺傳信息貯存和傳遞中的功能、實驗依據(jù)2DNA復(fù)制:半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制(五)原核和真核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)(六)DNA修復(fù)1錯配修復(fù)2堿基切除修復(fù)

12、3核苷酸切除修復(fù)4DNA的直接修復(fù)5SOS修復(fù);(七)DNA轉(zhuǎn)座1轉(zhuǎn)座子概念2轉(zhuǎn)座子的分類和結(jié)構(gòu)特征3轉(zhuǎn)座的機(jī)制和遺傳學(xué)效應(yīng)習(xí)題一、名詞解釋1染色體(chromosome)2HMG蛋白(high mobility group protein)3DNA結(jié)合蛋白(DNA combines protein)4DNA的復(fù)制(DNA replication)5核小體(nucleosome)6連接數(shù)(linking number)7扭轉(zhuǎn)數(shù)(纏繞數(shù)、盤繞數(shù):twisting number)8超螺旋數(shù)(writhing number)9DNA的半保留復(fù)制(DNA semiconservative replic

13、ation)10復(fù)制叉(replicating fork)11復(fù)制子(replicon)12型復(fù)制( type replication)13滾環(huán)型復(fù)制(rolling circle replication)14D環(huán)復(fù)制(D circle replication)15單鏈結(jié)合蛋白(single strand binding protein,SSB蛋白)16DNA的半不連續(xù)復(fù)制(DNA semi-noncontinuous replication)17解螺旋酶(Helicase)18引物和引發(fā)酶(Primase)19DNA修復(fù)(DNA repairing)20光修復(fù)(light repair)21

14、SOS修復(fù)(SOS- repair)22轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)23插入序列(insertionsequence,IS)24復(fù)合式轉(zhuǎn)座子(compositetransposon)25轉(zhuǎn)座(transposition)26基因組(genome)27C值(C value)28C值矛盾(C-value paradox)29單拷貝序列(single copy segment,又稱非重復(fù)序列)30輕度重復(fù)序列(slightly repeated segments)31中度重復(fù)序列(medium repeated segments)32高度重復(fù)序列(high repeated segments

15、)33Kpn家族(Kpn family)34DNA的一級結(jié)構(gòu)(DNA primary structure)35DNA的二級結(jié)構(gòu)(DNA secondary structure)36發(fā)夾(hairpan)37回文序列(palindromic sequence)38DNA的高級結(jié)構(gòu)(DNA advanced structure)39變性(denaturation)40增色效應(yīng)(hyperchromatic)41熔解溫度(meiting temperature,Tm)42復(fù)性(renaturation)43雜交(hybridization)44前導(dǎo)鏈(leading strand)45滯后鏈(lag

16、ging strand)46DNA連接酶(DNA ligase)二、填空題1核酸(DNA和RNA)是一種線性 ,它的基本結(jié)構(gòu)單元是 。核苷酸本身由核苷和 組成。而核苷則由 和 形成。2真核生物的染色體在細(xì)胞生活周期的大部分時間里都以染色質(zhì)的形式存在。染色質(zhì)是一種纖維狀結(jié)構(gòu),稱為 。它是由最基本的單位 串聯(lián)而成的。這里有一系列的結(jié)構(gòu)等級:DNA和組蛋白構(gòu)成 ,核小體再繞成一個中空的螺線管成為 ,染色質(zhì)絲再與許多非組蛋白結(jié)合進(jìn)一步螺旋化形成 。3染色體上的蛋白質(zhì)主要包括 和 。蛋白是染色體的_,它與DNA組成 。4真核生物的染色體一般有5種主要的組蛋白,分別命名為 、 、 、 和 。在5種組蛋白中

17、, 富含賴氨酸, 富含精氨酸。5非組蛋白主要包括與 和 有關(guān)的酶類、與細(xì)胞分裂有關(guān)的 等。66在染色質(zhì)中可分為 (euchromatin)和 (heteromatin),它們在細(xì)胞中凝聚的時期不同,異染色質(zhì)是包裝成2030nm,不具有轉(zhuǎn)錄活性的染色質(zhì)。異染色質(zhì)又分為 (constitutive heteromatin)和_(facultative heteromatin)。前者是指在各種細(xì)胞中,在整個細(xì)胞周期內(nèi)都處于凝聚狀態(tài)的染色質(zhì),如著絲粒、端粒等。后者是指在某些特定的細(xì)胞中,或在一定的發(fā)育時期和生理條件下 ,由常染色質(zhì)變成異染色質(zhì)。這本身也是真核生物的一種表達(dá)調(diào)控的途徑。7真核細(xì)胞DNA序

18、列大致上可分為4類,它們是: ,非重復(fù)序列,在基因組中只存在一個拷貝。 ,在基因組中只有210個拷貝,主要是組蛋白和tRNA等基因。 _,這類序列的重復(fù)次數(shù)在數(shù)十到數(shù)百次之間。_,衛(wèi)星DNA,這類DNA只在真核生物中發(fā)現(xiàn),占基因組的1060,由6100個堿基組成,在DNA鏈上有幾百到幾百萬個拷貝。8DNA的一級結(jié)構(gòu)是指DNA分子中多個 的排列順序。即數(shù)目龐大的_ 堿基的排列順序。9研究細(xì)菌質(zhì)粒DNA(環(huán)狀雙鏈DNA)時發(fā)現(xiàn),天然狀態(tài)下,該DNA以 為主,稍被破壞即出現(xiàn)開環(huán)結(jié)構(gòu),兩條鏈均斷裂,則呈 。在電場作用下,相同分子質(zhì)量的DNA結(jié)構(gòu)不同,遷移率也不同: 。10利福平可以抑制RNA的轉(zhuǎn)錄,使

19、細(xì)菌無法繁殖。用利福平處理發(fā)現(xiàn): 不能合成,而 能合成。11DNA修復(fù)包括 、 、 、 和 。12回復(fù)修復(fù)是較簡單的修復(fù)方式,一般都能將DNA修復(fù)到原樣。它包括 、_ 和 。13腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)間含有 ;鳥嘌呤-胞嘧啶(G-C)間含有 。14通常情況下,DNA的二級結(jié)構(gòu)分為兩大類:一類是右手螺旋的,如 、 、_ 等;另一類是局部的左手螺旋,如 。天然狀態(tài)下的DNA大多為 。15真核細(xì)胞DNA的復(fù)制調(diào)控是通過: ; 和 。16原核生物的轉(zhuǎn)座子,依組成結(jié)構(gòu)分為以下幾類:1) ;2) ;3) ;4) 。17DNA的復(fù)性對片段有兩個要求: 互補(bǔ)序列的_; 堿基的 ,但不需要完全配對,即不需要

20、兩條鏈完全互補(bǔ)。18促使DNA復(fù)性(退火)的條件是:1) ;2) ;3)_可以促進(jìn)DNA復(fù)性(退火)。19解鏈的DNA溶液在260nm處吸光值A(chǔ)260 ,即核苷酸單鏈DNA雙鏈DNA,稱為 ,反之為 。20真核生物基因組中影響C0t1/2值的參數(shù)有:1) ;2) ;3) 。21DNA修復(fù)包括3個步驟: 對DNA鏈上不正常堿基的識別與切除; 對已切除區(qū)域的重新合成; 對剩下切口的修補(bǔ)。22大腸桿菌中,任何由于DNA損傷造成的DNA復(fù)制障礙都會誘導(dǎo) 的信號,即允許跨過障礙進(jìn)行復(fù)制,給細(xì)胞一個生存的機(jī)會。23修復(fù)是由細(xì)菌中的 來完成,此酶能特異性識別紫外線造成的核酸鏈上相鄰 共價結(jié)合的 ,并與其結(jié)合

21、,這步反應(yīng)不需要光;結(jié)合后如受300600nm波長的光照射,則此酶就被激活,將二聚體分解為兩個正常的 ,然后酶從DNA鏈上釋放,DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)。24能使生物中DNA的堿基順序發(fā)生變化的4種方式是: 、 、_ 和 。25在DNA修復(fù)中,胸腺嘧啶二聚體往往是由 鏈上的相鄰胸腺嘧啶間形成的。26光復(fù)活酶在起作用時需要光,是因為光提供二聚體裂解反應(yīng)的 。三、判斷題1DNA單鏈斷裂是常見的損傷,其中一部分可僅由DNA連接酶(ligase)參與而完全修復(fù)。此酶在各類生物各種細(xì)胞中都普遍存在,修復(fù)反應(yīng)容易進(jìn)行。但雙鏈斷裂幾乎不能修復(fù)。2切除修復(fù)是修復(fù)DNA損傷最為普遍的方式,對多種DNA損傷包括堿基脫落

22、形成的無堿基位點(diǎn)、嘧啶二聚體、堿基烷基化、單鏈斷裂等都能起修復(fù)作用。這種修復(fù)方式普遍存在于各種生物細(xì)胞中,也是人體細(xì)胞主要的DNA修復(fù)機(jī)制。3大部分天然DNA呈正的超螺旋,即DNA變形的方向與雙螺旋解旋的方向相同。4大多數(shù)生物體內(nèi)DNA的復(fù)制都以雙向等速方式進(jìn)行。5大腸桿菌染色體DNA復(fù)制時,DnaB蛋白是復(fù)制起始的關(guān)鍵蛋白,可識別復(fù)制起點(diǎn)并與之結(jié)合。6大腸桿菌染色體DNA的復(fù)制調(diào)控是通過復(fù)制起點(diǎn)與調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的作用。7插入序列對插入點(diǎn)后的基因不產(chǎn)生極性效應(yīng)。8在DNA合成中負(fù)責(zé)復(fù)制和修復(fù)的酶是RNA聚合酶。9非組蛋白染色體蛋白負(fù)責(zé)30nm纖絲高度有序的壓縮。10在核酸雙螺旋(如DNA)中形成發(fā)

23、夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對稱的發(fā)夾,呈十字結(jié)構(gòu)。11在DNA復(fù)制的過程中是堿基發(fā)生錯配的最主要來源。12單鏈結(jié)合蛋白通過與磷酸骨架結(jié)合使DNA單鏈相互分開,它們離開暴露的堿基,所以那些堿基可以作為DNA合成的模板。13模板鏈或反義鏈DNA是指在轉(zhuǎn)錄過程中被RNA聚合酶識別并合成個互補(bǔ)的mRNA,這一mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板。14在先導(dǎo)鏈上DNA沿53方向合成,在后隨鏈上則沿35方向合成。15若大腸桿菌DNA聚合酶缺失了35校正外切核酸酶活性時會使DNA合成時的可靠性增加。16大腸桿菌中的錯配校正系統(tǒng)是通過子鏈上甲基化來區(qū)別親本鏈和子鏈的,從而對子鏈上的

24、錯誤進(jìn)行校正修復(fù)的。17在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)了3種DNA聚合酶,DNA修復(fù)時需要DNA聚合酶III。18真核DNA聚合酶和具有35外切核酸酶的活性。19單個堿基改變是DNA損傷的一種形式,它可以由UV照射(如嘧啶二聚體)或加成化合物形成(如烷基化)所引起。20錯配修復(fù)是基于對復(fù)制期間產(chǎn)生的錯配的識別。假如識別發(fā)生在被重新甲基化的半甲基化的DNA之前,那么修復(fù)可能偏向野生型序列(Dam甲基化,MutH,MutSL)。21DNA修復(fù)的第一步是由專用于修復(fù)過程的酶催化的,下面的步驟由DNA代謝過程中的常用酶位化。22大腸桿菌中SOS反應(yīng)的最主要作用是通過在原始DNA損傷區(qū)附近導(dǎo)入補(bǔ)償突變來提高細(xì)胞存活率

25、。23大腸桿菌的單鏈結(jié)合蛋白通過與糖-磷酸骨架結(jié)合并使堿基暴露,從而解開單鏈上的短發(fā)夾結(jié)構(gòu)。24無義突變是由于一種氨基酸的密碼子轉(zhuǎn)變成終止密碼子,結(jié)果使蛋白質(zhì)鏈變短。25當(dāng)溴乙錠存在時,超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA分子的浮力密度要低于線狀分子。26由于溴乙錠的存在而引起的在CsCl中DNA分子浮力密度的降低,會受(G十C)含量的影響。27在DNA合成中,與2-OH和5-P基團(tuán)之間形成共價鍵。28在大腸桿菌中主要參與DNA復(fù)制的酶是DNA聚合酶I。29已知DNA聚合酶的共同特性是將底物加到3-OH基團(tuán)上,需要有模板。30多數(shù)核酸酶和聚合酶的活性在加入螯合劑如EDTA后會受到抑制,是因為幾乎全部核酸酶活性都

26、需要Ca2。31在DNA復(fù)制過程中,解旋酶松開螺旋,ssb蛋白阻止重新形成螺旋,阻止分子內(nèi)發(fā)生堿基配對。32在線狀DNA分子中會出現(xiàn)D環(huán)復(fù)制。33如果環(huán)狀DNA分子在復(fù)制開始前有一條鏈斷裂,同樣會出現(xiàn)D環(huán)復(fù)制。34如果將一段供體DNA片段導(dǎo)入到受體細(xì)胞中,若不發(fā)生整合作用,通常能在受體細(xì)胞中復(fù)制。四、選擇題(單選或多選)1肺炎球菌在小鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌實驗證明了遺傳物質(zhì)是:( )(a)RNA(b)反義RNA(c)DNA(d)蛋白質(zhì)(e)噬菌體2雙鏈RNA中的堿基對有 ( )(a)A-U(b)G-T(c)C-G(d)C-A(e)T-A3不同的核酸分子其解鏈穩(wěn)定(Tm)不同,關(guān)于

27、Tm的正確說法是 ( )(a)DNA中GC對比例愈高,Tm愈高(b)DNA中AT對比例愈高,Tm愈高(c)核酸愈純,Tm范圍愈大(d)核酸分子愈小,Tm范圍愈大(e)Tm較高的核酸,常常是RNA4通常不存在RNA中,也不存在DNA中的堿基是 ( )(a)腺嘌呤(b)黃嘌呤(c)鳥嘌呤(d)胸腺嘧啶(e)尿嘧啶5AUC為異亮氨酸的遺傳密碼,在tRNA中其相應(yīng)的反密碼應(yīng)為 ( )(a)GAT(b)TAG(c)GAU(d)UAG(e)LAG6核酸中核苷酸之間的連接方式是 ( )(a)2,3磷酸二酯鍵(b)3,5磷酸二酯鍵(c)2,5磷酸二酯鍵(d)1,5糖苷鍵(e)氫鍵7下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型

28、的敘述,不正確的是 ( )。(a)兩股脫氧核苷酸鏈呈反向平行(b)兩股鏈間存在堿基配對關(guān)系(c)螺旋每周包含10對堿基(d)螺旋的螺距為3.4nm(e)DNA形成的均是左手螺旋結(jié)構(gòu)8既有內(nèi)含子又有外顯子的RNA是 ( )(a)rRNA(b)mRNA(c)hnRNA(d)tRNA(e)snRNA9下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的敘述正確的是 ( )(a)一條鏈?zhǔn)亲笫致菪?,另一條鏈為右手螺旋(b)由兩條完全相同的多核苷酸鏈繞同一中心軸盤旋成雙螺旋(c)A+T與G+C的比值為1(d)A+G與C+T的比值為1(e)兩條鏈的堿基間以共價鍵相連10下列DNA分子的堿基組成各不相同,解鏈溫度(Tm)最低的是

29、( )(a).DNA中A+T含量占15%(b)DNA中G+C含量占25%(c)DNA中G+C含量占40%(d)DNA中A+T含量占60%(e)DNA中G+C含量占70%11紫外線對DNA的損傷主要是 ( )(a)引起堿基置換(b)導(dǎo)致堿基缺失(c)形成嘧啶二聚物(d)發(fā)生堿基插入(e)使磷酸二酯鍵斷裂12DNA變性過程中發(fā)生的變化主要是 ( )(a)包括雙螺旋的解鏈(b)與溫度無關(guān)(c)是可逆的過程(d)磷酸二酯鍵的斷裂(e)包括氫鍵的斷裂13在類似RNA等出現(xiàn)的“二級結(jié)構(gòu)”中,發(fā)夾結(jié)構(gòu)的形成是由于 ( )(a)僅僅當(dāng)兩配對區(qū)段中所有的堿基均互補(bǔ)時就會發(fā)生(b)依賴于A-U含量,因為形成的氫鍵

30、越少則發(fā)生堿基配對所需的能量也越少(c)基于各個片段間的互補(bǔ),形成反向平行雙螺旋(d)同樣包括有像G-U這樣的不規(guī)則堿基配對(e)允許存在幾個只有提供過量的自由能才能形成堿基對的堿基14DNA在10nm纖絲(螺線管)中被壓縮的倍數(shù)是(長度) ( )(a)6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (e)l 000 倍15DNA在30nm纖絲(超螺線管)中被壓縮的倍數(shù)是 ( )(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)l 000倍16DNA在染色體的常染色質(zhì)區(qū)被壓縮的倍數(shù)是 ( )(a)6倍(b)40倍(c)240倍(d)l000倍(e)10000倍17DNA在中期染色體中被壓

31、縮的倍數(shù)是 ( )(a) 6倍(b) 40倍(c) 240倍(d) 1000倍(e) l0000倍18組蛋白的凈電荷是 ( )(a)正 (b)中性 (c)負(fù) (d)未知19核小體的電性是 ( )(a)正 (b)中性 (c)負(fù) (d)未知20當(dāng)一個基因具有活性時 ( )(a)啟動子一般不帶有核小體(b)整個基因一般不帶有核小體(c)基因被核小體遮蓋,但染色質(zhì)結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變,以致于整個基因?qū)怂崦附到飧用舾校╠)整個基因組一般不帶有核小體(e)基因被核小體遮蓋,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)沒有變化。21在DNA復(fù)制和修復(fù)過程中,修補(bǔ)DNA螺旋上缺口的酶為 ( )(a)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶(b)DNA解旋酶(c)DNA

32、連接酶(d)DNA聚合酶(e)DNA酶22DNA后隨鏈合成的起始要一段短的RNA引物,該引物的合成是以核糖核苷酸為底物,合成時所需的酶為 ( )(a)DNA聚合酶(b)DNA連接酶(c)RNA引發(fā)酶(d)DNA引發(fā)酶(e)RNA連接酶23下述對于DNA復(fù)制的說法正確的有 ( )(a)兩條鏈按完全相同的機(jī)制進(jìn)行(b)按35方向進(jìn)行(c)按53方向進(jìn)行(d)需要DNA聚合酶I(e)涉及RNA引物的形成24在大腸桿菌中,復(fù)制叉以每秒500個堿基對的速度向前移動進(jìn)行DNA的復(fù)制,那么,為滿足這種合成速度,復(fù)制叉前的DNA的旋轉(zhuǎn)速度為 ( )(a)100rmin(b)500rmin(c)1 000rmi

33、n(d)2 000rmin(e)3 000rmin25在依賴于DNA的DNA聚合酶所進(jìn)行的DNA復(fù)制過程中,要求有個作為引發(fā)物的游離3-OH的存在。獲得游離的3-OH的途徑有 ( )(a)合成一個RNA引物(b)DNA自我引發(fā)的(c)一個末端蛋白通過磷酸二酯鍵共價結(jié)合到一個核苷酸(d)內(nèi)含子的剪切(e)蛋白質(zhì)的磷酸化26在細(xì)菌的光修復(fù)過程中,完成修復(fù)所需的酶是 ( )(a)DNA連接酶(b)DNA聚合酶(c)DNA光復(fù)活酶(d)DNA外切酶(e)DNA內(nèi)切酶27大腸桿菌的染色體可以聯(lián)會,而且可使同源雙鏈DNA彼此配對。這需要 ( )(a)RecA蛋白(b)RecB蛋白(c)RecC蛋白(d)R

34、ecD蛋白(e)RecE蛋白28DNA最普遍的修飾是甲基化。在原核生物中這種修飾的作用是 ( )(a)保護(hù)它自身的DNA免受核酸內(nèi)切限制酶的作用(b)復(fù)制之后區(qū)分鏈,以確定是否繼續(xù)復(fù)制(c)識別外來的甲基化的DNA,并將其重組到基因組中(d)識別受損的DNA以便于修復(fù)(e)識別轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)以便RNA聚合酶起作用29產(chǎn)生單個堿基變化的突變稱為 ( )(a)移碼突變(b)野生型突變(c)點(diǎn)突變(d)自發(fā)突變(e)致死突變30理論上自發(fā)突變是隨機(jī)發(fā)生,并均勻分布于基因組中。然而,精細(xì)分析表明,DNA中的某些位點(diǎn)較其他位點(diǎn)更易發(fā)生突變。這些“熱點(diǎn)”突變是由于 ( )(a)DNA的空間結(jié)構(gòu)選擇性地使部分

35、DNA暴露在誘變因子的作用下(b)存在可被進(jìn)一步修飾(如脫氨基)的已修飾堿基(如甲基化),導(dǎo)致堿基轉(zhuǎn)換并通過復(fù)制產(chǎn)生突變(c)被修飾(如甲基化)堿基的存在,易于發(fā)生錯配復(fù)制并因此產(chǎn)生突變(d)DNA中富含A-T區(qū)域的存在,使得自發(fā)解鏈及錯配堿基的摻入(e)對沉默突變的選擇壓力很低,因此熱點(diǎn)多為密碼子第三位的堿基31IS元件的特性主要是 ( )(a)所有IS元件全是相同的(b)具有轉(zhuǎn)座酶基因(c)是旁側(cè)重復(fù)序列(d)引起宿主DNA整合復(fù)制(e)每代每個元件轉(zhuǎn)座104次32組成轉(zhuǎn)座子的旁側(cè)IS元件可以 ( )(a)同向(b)反向(c)兩個都有功能(d)兩個都沒有功能33復(fù)制型轉(zhuǎn)座的特性主要是 (

36、)(a)復(fù)制轉(zhuǎn)座子,即在原位點(diǎn)上留有一個拷貝(b)移動元件轉(zhuǎn)到一個新的位點(diǎn),在原位點(diǎn)上不留元件(c)要求有轉(zhuǎn)座酶(d)要求解離酶(e)涉及保守的復(fù)制,在這個過程中轉(zhuǎn)座子序列不發(fā)生改變34非復(fù)制轉(zhuǎn)座的特性主要是 ( )(a)復(fù)制轉(zhuǎn)座子,即在原位點(diǎn)上留有一個拷貝(b)移動元件到一個新的位點(diǎn),在原位點(diǎn)上不留元件(c)要求有轉(zhuǎn)座酶(d)要求解離酶(e)涉及保守的復(fù)制,在這個過程中轉(zhuǎn)座子序列不發(fā)生改變35關(guān)于A1u序列的描述正確是 ( )(a)所有A1u序列都是相同的(b)A1u序列來源于有翻譯功能的7SL RNA(c)A1u序列是靠RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄的(d)Alu序列永遠(yuǎn)不會存在于結(jié)構(gòu)基因中(e)這

37、些序列有一個區(qū)段與病毒的DNA復(fù)制起點(diǎn)同源36如果缺乏下列酶之一,復(fù)制叉上一個核苷酸也加不上去。這種酶是 ( )(a)聚合酶I(聚合活性)(b)聚合酶I(53核酸外切酶活性)(c)聚合酶III(d)DNA連接酶第二章 染色體與DNA一、名詞解釋1答:細(xì)胞核中由DNA、蛋白質(zhì)和少量RNA組成的易被堿性染料著色的一種絲狀或桿狀物。1888年瓦爾德第一次提出了染色體這一名詞。親代能夠?qū)⒆约旱倪z傳物質(zhì)DNA以染色體的形式傳給了子代,保持了物種的穩(wěn)定性和連續(xù)性。2答:這是一類能用低鹽溶液抽提、能溶于2三氯乙酸、相對分子質(zhì)量在3.0104以下的非組蛋白。因其在凝膠電泳中遷移速度快而得名?,F(xiàn)在一般認(rèn)為這類蛋

38、白可能與DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有關(guān)。3答:只有用2mol/L NaCl和5mol/L尿素才能把這些蛋白從DNA上解離下來的非組蛋白。它們是一些分子質(zhì)量較低的蛋白質(zhì),約占非組蛋白的20,染色質(zhì)的8。它們與DNA結(jié)合比較緊密,可能是一些與DNA的復(fù)制或轉(zhuǎn)錄有關(guān)的酶或調(diào)節(jié)物質(zhì)。4答:細(xì)胞分裂時,每個子代細(xì)胞必須含有同樣的遺傳信息,即DNA分子必須變成兩個同樣的分子,這個過程就是DNA的復(fù)制。5答:指的是200bp長度的DNA與一組組蛋白構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu),是構(gòu)成真核生物染色質(zhì)的基本單位。 圖6答:指環(huán)形DNA分子中,一條鏈以右手螺旋繞另一條鏈纏繞的次數(shù),以L表示。只要不發(fā)生鏈的斷裂,L是個常量。7答:扭轉(zhuǎn)數(shù)

39、是指DNA分子中Watson-Crick的螺旋數(shù),以T表示。8答:超螺旋數(shù)(writhing number)以W表示。L=T+WDNA分子具有相同的結(jié)構(gòu),但L值不同,所以稱它們?yōu)橥負(fù)洚悩?gòu)體。拓?fù)洚悩?gòu)酶能夠催化它們之間的轉(zhuǎn)換。9答:DNA的復(fù)制是分別以親代DNA鏈為模板合成兩條子代DNA鏈;在子代DNA雙鏈中,一條是新合成的,一條是親代的,稱為DNA的半保留復(fù)制。 圖10答:復(fù)制時,雙鏈DNA要解開兩股鏈分別進(jìn)行,所以這個復(fù)制起點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式,稱為復(fù)制叉。復(fù)制正在發(fā)生的位點(diǎn)叫復(fù)制叉。11答:DNA分子上一個獨(dú)立的復(fù)制單位,包含一個復(fù)制起始位點(diǎn)和適當(dāng)?shù)恼{(diào)控序列的一個DNA分子(或片段)。一個復(fù)制

40、子只含有一個復(fù)制起點(diǎn)(origin,ori)。原核生物的基因組只有一個復(fù)制子,真核生物具有多個復(fù)制子。12答:環(huán)形DNA大多采用型復(fù)制,如E.coli。特點(diǎn)是從原點(diǎn)ori開始,通常采用雙向等速復(fù)制,不斷擴(kuò)大復(fù)制泡,形成環(huán)。 圖13答:某些環(huán)形的病毒DNA,如x174、噬菌體都是以這種方式復(fù)制。這是一種單向復(fù)制類型。 圖14答:雙鏈環(huán)在固定點(diǎn)解開進(jìn)行復(fù)制。但兩條鏈的合成是高度不對稱的,一條鏈上迅速合成出互補(bǔ)鏈,另一條鏈則成為游離的單鏈環(huán)(D-環(huán))。 圖15答:SSB蛋白可牢固地結(jié)合在單鏈DNA上,在原核生物中表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng),如第一個SSB蛋白結(jié)合到DNA上去的能力為1,第二個SSB蛋白結(jié)合能力則

41、高達(dá)103。SSB蛋白的作用是保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前能保持單鏈結(jié)構(gòu),它以四聚體形式存在于復(fù)制叉處,待單鏈復(fù)制后才掉下,重新循環(huán)。所以,SSB蛋白只保持單鏈的存在,并不起解鏈的作用。SSB沒有催化功能,它可以特異性地結(jié)合在單鏈區(qū),使之免被核酸酶水解,起到保護(hù)和維持單鏈的作用。16答:在DNA的復(fù)制過程中,前導(dǎo)鏈?zhǔn)沁B續(xù)復(fù)制的,而滯后鏈?zhǔn)峭ㄟ^岡崎片段的連接來合成的,是不連續(xù)的,稱之為DNA的半不連續(xù)復(fù)制。 圖17答:用于把DNA雙鏈解開形成單鏈。具有ATPase活性,利用水解ATP釋放的能量,催化雙鏈DNA解鏈。dnaB基因的產(chǎn)物dnaB蛋白是一種解鏈酶,是一個六聚體蛋白。功能為通過AT

42、P水解驅(qū)動dnaB蛋白在復(fù)制叉上移動使DNA解旋。大部分解鏈酶可沿滯后鏈53方向移動,蛋白沿前導(dǎo)鏈35方向移動18答:引物是由引發(fā)酶合成的,是DNA復(fù)制所需的一段RNA序列,引物通常是RNA寡核苷酸而不是DNA。引發(fā)酶是dnaG基因的產(chǎn)物,是一個單亞基的多肽,它能重新起始一個新核苷酸鏈的合成。19答:DNA修復(fù)是細(xì)胞對DNA受損傷后的一種反應(yīng),這種反應(yīng)可能使DNA結(jié)構(gòu)恢復(fù)原樣,重新能執(zhí)行它原來的功能。20答:這是最早發(fā)現(xiàn)的DNA修復(fù)方式。修復(fù)是由細(xì)菌中的DNA光復(fù)活酶來完成,此酶能特異性識別紫外線造成的核酸鏈上相鄰嘧啶共價結(jié)合的二聚體,并與其結(jié)合,這步反應(yīng)不需要光;結(jié)合后如受300600nm波

43、長的光照射,則此酶就被激活,將二聚體分解為兩個正常的嘧啶單體,然后酶從DNA鏈上釋放,DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)。后來發(fā)現(xiàn)類似的修復(fù)酶廣泛存在于動植物中,人體細(xì)胞中也有發(fā)現(xiàn)。 圖21答:SOS修復(fù)是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式,修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性,提高細(xì)胞的生成率,但留下的錯誤較多,故又稱為錯誤傾向修復(fù)(error prone repair),使細(xì)胞有較高的突變率。 圖22答:轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。23答:插入序列是不含宿主基因的最簡單的轉(zhuǎn)座子,它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。IS序列都是可以獨(dú)立存在的單

44、元,帶有介導(dǎo)自身移動的蛋白。插入序列對插入點(diǎn)后的基因產(chǎn)生極性效應(yīng)。IS除帶有編碼轉(zhuǎn)座酶的基因外,不帶任何其它遺傳信息。24答:是由兩個重復(fù)序列夾著一個或多個結(jié)構(gòu)基因組成的轉(zhuǎn)座單位,往往存在于R因子及其它質(zhì)粒中。有的復(fù)合轉(zhuǎn)座子的重復(fù)序列就是IS。IS序列插入到某個功能基因兩端時就可能產(chǎn)生復(fù)合式轉(zhuǎn)座子。 圖除了末端帶有IS序列的復(fù)合式轉(zhuǎn)座子以外,還存在一些沒有IS序列、體積龐大的轉(zhuǎn)座子TnA家族,一般長4 500200 000bp。25答:一個轉(zhuǎn)座子由基因組的一個位置移動到另一個位置的過程稱為轉(zhuǎn)座。26答:對于原核生物來說就是它的整個染色體;對于真核生物來說就是一個物種的單倍體的染色體數(shù)目。 表2

45、727答:單倍體基因組中的DNA含量。28答:C值指單倍體基因組中的DNA含量。不同物種的C值有很大差異:C值矛盾:在結(jié)構(gòu)和功能相似的物種中,甚至在親緣關(guān)系相近的物種中,C值差異大。與預(yù)期的編碼蛋白質(zhì)的基因的數(shù)量相比,基因組DNA的含量過多。29.答:在基因組中只有一個拷貝。30答:在基因組中只有2-10個拷貝,主要是組蛋白和tRNA等基因。31答:重復(fù)次數(shù)在數(shù)十到數(shù)百次之間。又可分為: 長散在重復(fù)序列(long interspersed repeated segments)LINES 短散在重復(fù)序列(short interspersed repeated segments)SINESSINE

46、S:長度105,如人Alu序列。LINEs:長度1000bp(可達(dá)7Kb),拷貝數(shù)104105,如人LINEl。32答:有幾百到幾百萬個拷貝。33答:人類和靈長類DNA經(jīng)Kpn酶解后,產(chǎn)生4個片段(1.2、1.5、1.8、1.9kb),這些就被命名為Kpn家族。人類基因組中的Kpn序列約在3-6%,也是散在分布的。功能尚不清楚。僅次于Alu家族的第二大家族。34答:指的是DNA分子內(nèi)4種核苷酸的連接及排列順序。DNA鏈的方向總是理解為從5-P端到3-OH端。35答:DNA的二級結(jié)構(gòu)指的是由兩條DNA鏈反向平行盤繞所形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。36答:當(dāng)同一個RNA分子的一段堿基序列附近緊接著一段它的互補(bǔ)

47、序列時,核酸鏈有可能自身回折配對產(chǎn)生一個反平行的雙螺旋結(jié)構(gòu),叫做發(fā)夾(hairpan)。發(fā)夾結(jié)構(gòu)由叫做莖的堿基互補(bǔ)配對的雙螺旋區(qū)域和末端不配對的環(huán)構(gòu)成。37答:雙鏈DNA以相反方向排列的完全相同的序列結(jié)構(gòu)叫做反向重復(fù)(reverse repaeat)。反向重復(fù)中的序列叫做回文序列(回文)?;匚男蛄惺请p螺旋DNA中的一段序列,如果按確定的方向讀雙鏈中的每一條鏈的序列都是相同的。38答:指雙螺旋DNA本身的進(jìn)一步盤繞成超螺旋的結(jié)構(gòu),形成特定的空間結(jié)構(gòu)。39答:DNA雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,使雙螺旋的兩條鏈完全分開變成單鏈,鏈分離的過程叫做變性(denaturation)或熔解。40答:在變性過程中,2

48、60nm紫外線吸收值先緩慢上升,當(dāng)達(dá)到某一溫度時驟然上升,稱為增色效應(yīng)。41答:通常把DNA雙螺旋失去一半時的溫度稱為該DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度42答:變性后的DNA用某種方法處理后,使之重新形成天然DNA的過程叫做復(fù)性或退火。復(fù)性是一個比較慢的過程。43答:不同來源的兩個互補(bǔ)核酸序列通過相互退火形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。44答:以復(fù)制叉向前移動的方向為標(biāo)準(zhǔn),一條模板鏈?zhǔn)?5走向,在其上DNA以53方向連續(xù)合成,稱為前導(dǎo)鏈。45答:另一條模板鏈?zhǔn)?3走向,在其上DNA也是以53方向合成,但是與復(fù)制叉移動的方向相反,所以隨著復(fù)制叉的移動,形成許多不連續(xù)的片段,最后連接成一條完整的DNA鏈,該鏈稱為滯后鏈。4

49、6答:催化雙鏈DNA切口處的5-磷酸基和3-羥基生成磷酸二酯鍵。T4連接酶需ATP、大腸桿菌連接酶需NAD做為輔助因子。二、填空題1多聚核苷酸;核苷酸;核苷;磷酸;戊糖;堿基2染色質(zhì);染色質(zhì)絲;核小體;核小體;染色質(zhì)絲;染色體3組蛋白;非組蛋白;結(jié)構(gòu)蛋白;核小體4H1;H2A;H2B;H3;H4;H1;H3、H45復(fù)制;轉(zhuǎn)錄;蛋白6常染色質(zhì);異染色質(zhì);組成性異染色質(zhì);兼性異染色質(zhì);凝聚7單一拷貝;輕度重復(fù)序列;中度重復(fù)序列;高度重復(fù)序列8脫氧核苷酸;四種9負(fù)超螺旋;線性結(jié)構(gòu);雙鏈環(huán)狀DNA;線狀DNA;開環(huán)DNA10先導(dǎo)鏈;后隨鏈11回復(fù)修復(fù);錯配修復(fù);切除修復(fù);重組修復(fù);SOS修復(fù)12光修復(fù);單鏈斷裂的重接;堿基的直接插入13二個氫鍵;三個氫鍵14 B-DNA;A-DNA;C

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