實(shí)驗(yàn)動物學(xué)：大小鼠實(shí)驗(yàn)動物的一般操作技術(shù)

1、要求： 四人一組 動物： 小鼠 30g左右 （每人1只）每組、各半 大鼠 150g左右（兩人1只）每組、各半 材料: 一次性1ml、5 ml注射器、大小灌胃針頭（兩人一套） 大小鼠固定器（兩人一套） 棉簽 棉球 剪刀 血色素吸管 紗手套 一次性膠手套 染液 頭皮針（4號半或5號）小鼠籠（每組2個(gè)）、搪瓷托盤（每組一個(gè)） 試劑： 75%酒精 生理鹽水,實(shí)驗(yàn)所需的試劑、材料和動物量,1,實(shí)驗(yàn)動物一般操作技術(shù)（一）,大鼠、小鼠,2,3R原則 體外替代實(shí)驗(yàn)（目前在國際上被承認(rèn)的體外替代實(shí)驗(yàn)的方法） 皮膚刺激實(shí)驗(yàn) 眼刺激實(shí)驗(yàn)等,體外替代實(shí)驗(yàn),3,1.了解動物實(shí)驗(yàn)的目的和意義 2.了解實(shí)驗(yàn)動物選擇和染毒途

2、徑。 3.掌握大、小鼠實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)。,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?4,5,1. 實(shí)驗(yàn)動物的選擇 2. 實(shí)驗(yàn)動物的抓取和固定 3. 性別鑒定 4. 實(shí)驗(yàn)動物編號標(biāo)記 5. 實(shí)驗(yàn)動物染毒途徑和方法（灌胃、腹腔注射、尾靜脈注射） 6. 生物標(biāo)本的采集 （鼠尾取血、眼眶取血） 7. 實(shí)驗(yàn)動物的處死,二. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：,6,實(shí)驗(yàn)流程,7,動物物種選擇基本原則：,動物的選擇,8,健康動物首先看外觀： 體形豐滿，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應(yīng)行動靈活。 有無明顯疾病癥狀 體重、年齡 小鼠3周體重約為1015g，大鼠34周體重約為5070g,外觀觀察,9,動物的抓取和固定,注意抓取動物的手法 抓取固定時(shí)力量

3、大小適宜,10,未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯，肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠(yuǎn)、近。 成年鼠：雄性臥位可見睪丸，雌性可見腹部有12個(gè)乳頭。,性別鑒定,11,常用標(biāo)記，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）,動物的編號標(biāo)記,12,原則： 同一實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動物的年齡盡可能一致，實(shí)驗(yàn)動物體重大致相近； 同組、同性別動物體重差異應(yīng)小于平均體重的10%；不同組間同性別動物體重均值差異小于5%；動物各半，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果分開統(tǒng)計(jì)、分析。 稱重 編號 隨機(jī)分組,實(shí)驗(yàn)動物的分組,13,經(jīng)口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等） 經(jīng)呼吸道染毒（靜式、動式和氣管內(nèi)注入） 經(jīng)皮膚染毒 注射染毒（皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等） 其

4、它（直腸內(nèi)、鼻腔等）,實(shí)驗(yàn)動物染毒途徑和方法,14,灌胃,抓取老鼠時(shí)應(yīng)是鼠 成豎直線 灌胃成功時(shí)，所遇阻力較小 灌胃時(shí)注意胃容量,15,腹下1/3外側(cè)，避免損傷實(shí)質(zhì)器官 扎入時(shí)有“落空感”，回抽無尿液或血液,腹腔注射,16,從遠(yuǎn)端進(jìn)針 注意拽鼠尾時(shí)不要用力過大，以免損傷鼠尾或使小鼠致死,尾靜脈注射,17,血液采集（斷尾采血、眼眶采血、動脈采血等） 尿液采集 膽汁采集 糞便采集,生物標(biāo)本的采集,18,眼眶后靜脈叢采血,19,脊椎脫臼法（斷髓處死）：大、小鼠 斷頭法；急性大失血法；（摘取眼球法）擊打頭部法；麻醉后急性放血法； 開放性氣胸法。,動物的處死,20,報(bào)告要求書寫整潔，過程明了 內(nèi)容包括：

5、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，主要的?shí)驗(yàn)內(nèi)容，各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的主要的操作手法及注意事項(xiàng)（內(nèi)容可和后面的討論一起寫，按照每一個(gè)小問題來答題） 實(shí)驗(yàn)討論： 大動物要求： 某公司現(xiàn)研發(fā)出一種新型農(nóng)藥要做產(chǎn)品登記，請根據(jù)今天所學(xué)的內(nèi)容設(shè)計(jì)一個(gè)簡要的一般毒性試驗(yàn)方案（主要是操作思路和關(guān)鍵手法）。 1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?2.實(shí)驗(yàn)過程：包括（1）動物的選擇和分組；（2）選取兩種染毒方式；（3）關(guān)鍵的操作步驟。 3.實(shí)驗(yàn)心得體會。 小動物要求： 1、大、小鼠的抓取和性別判斷；2、實(shí)驗(yàn)動物的標(biāo)記方法；3、實(shí)驗(yàn)動物的分組方法；4、實(shí)驗(yàn)動物的染毒途徑和方法（灌胃，腹腔注射和尾靜脈注射方法）；5、動物的處死方法。 （還可包括實(shí)驗(yàn)中你覺得那些操作的手法自己不適合，或那些實(shí)驗(yàn)步驟需要改進(jìn)等，還可有其他的關(guān)于這堂課相關(guān)的擴(kuò)展知識都可上）,三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫和實(shí)驗(yàn)討論：,21,1. 抓取與操作動物時(shí)小心不要被咬傷，如果被咬傷需立即用清水沖洗并用碘酒消毒。 2. 抓取動物時(shí)用力要恰當(dāng),防止動物窒息死亡。 3. 抓取動物時(shí)要小心其身上可能存在的