激活劑及抑制劑對(duì)酶活性的影響(修).ppt

1、激活劑及抑制劑對(duì)酶活性的影響,實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握激活劑及抑制劑對(duì)酶活性影響的原理,2.熟悉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟,3.了解溫度對(duì)酶活性的影響,二、實(shí)驗(yàn)原理,一)激活劑對(duì)酶活性影響的原理,使酶由無(wú)活性變?yōu)橛谢钚曰蚴姑富钚栽黾拥奈镔|(zhì)稱為酶的激活劑,激活劑是指無(wú)機(jī)離子，如金屬離子Mg2+、Zn2+ 、酸根離子 Cl- 、 PO43- 和小分子有機(jī)物膽汁酸鹽、VC等,激活劑,必需激活劑,非必需激活劑,如：己糖激酶必需由Mg2+激活,如：Cl-是唾 液淀粉酶的激活劑,淀粉,加碘呈色,紫糊精,紅糊精,無(wú)色糊精,麥芽糖,紫色,淀粉酶催化淀粉逐步水解,藍(lán)色,紅色,無(wú)色,無(wú)色,還原糖,加激活劑Cl-

2、(1NaCl,二)抑制劑對(duì)酶活性影響的原理,能夠有選擇地使酶的活性降低或喪失，但不能使酶蛋白變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑,抑制劑多與酶活性必需基團(tuán)結(jié)合，直接或間接的影響酶的活性中心，從而抑制酶的活性,根據(jù)抑制劑與酶結(jié)合的緊密程度不同，又分可逆性抑制和不可逆抑制劑,抑制劑,可逆性抑制劑,不可逆性抑制劑,抑制劑通過(guò)非共價(jià)鍵或酶-底物復(fù)合物可逆性結(jié)合，使酶活性降低或喪失。采用透析或超濾等物理方法將抑制劑除去，恢復(fù)酶活性,抑制劑通常與酶活性中心上的必需基團(tuán)形成共價(jià)鍵，使酶失去活性。不能用透析、超濾等方法將其除去，只能靠某藥物才能解除，恢復(fù)酶活性,重金屬離子Cu2+對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用,1. Cl-對(duì)唾液

3、淀粉酶具有激活作用。 2.重金屬離子，例如Cu2+對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用,很多藥物是酶的抑制劑，通過(guò)對(duì)病原體內(nèi)某些酶的抑制作用或改變體內(nèi)某些酶的活性而發(fā)揮其治療功效，了解酶的抑制作用是闡明藥物作用機(jī)制和設(shè)計(jì)研究新藥的重要途徑,激活劑及抑制劑對(duì)酶活性影響的意義,三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑,1.儀器 燒杯、試管、點(diǎn)滴板、滴管、漏斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴箱等,2.試劑 1淀粉液、 1 NaCl溶液、1CuSO4溶液、 1NaSO4溶液、稀碘液、唾液,四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟,1.收集唾液 用少量（約35ml）冷水漱口約1min，收集唾液至漏斗中，過(guò)濾，備用,2.加樣,觀察、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,3. 振蕩混勻，同

4、時(shí)置于37水浴中，每2min取出一滴，在點(diǎn)滴板上做碘的呈色反應(yīng)。 當(dāng)點(diǎn)滴板上有一孔呈現(xiàn)無(wú)色時(shí)，取出水浴中的4支試管，各管加碘液13滴，搖勻。 觀察4支試管的顏色，比較反應(yīng)速度,五、注意事項(xiàng) 1.刻度吸量管不能交叉使用，否則污染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。 2.實(shí)驗(yàn)所用試管沖洗干凈；編號(hào)1、2、3、4的燒杯及滴管取淀粉水解液時(shí)不能交叉使用，否則污染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。 3. 做完實(shí)驗(yàn)所有試劑擺放好，取淀粉的刻度吸量管沖洗干凈，桌面擦干凈，登記簽名。 4.值日生聽老師安排，認(rèn)真打掃，經(jīng)老師批準(zhǔn)才能離開實(shí)驗(yàn)室,六、思考題,1.什么是激活劑和抑制劑？本實(shí)驗(yàn)中的激活劑和抑制劑分別是什么？ 2.四支試管中加入1Na2SO4的目的是什么,下次實(shí)驗(yàn)： P76頁(yè) 血糖測(cè)定 實(shí)驗(yàn)報(bào)告明天交，請(qǐng)組長(zhǎng)負(fù)起責(zé)任。謝謝同學(xué)們配合,實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象分析,試管1遇碘呈無(wú)色，證明Cl-離子對(duì)唾液淀粉酶有激活作用。 試管2遇碘呈紅色，證明唾液淀粉酶也能催化淀粉水解，但比加入激活劑Cl-離子水解慢。 試管3遇碘呈藍(lán)色，證明Cu2+離子對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用，使酶活性喪失，淀粉不能水解。 試管4遇碘呈紫色，唾液淀粉酶催化淀粉水解比試管2更慢，證明Na+ 、 SO42-離子對(duì)唾液淀粉酶的催化活性有干擾；同時(shí)也證明了N