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文檔簡介

1、第九章 分光光度法簡介例1 將精制的純品氯霉素(Mr=323.15)配成2.0010-2gL-1的溶液,在波長278nm處,用1.00cm吸收池測得溶液的吸光度A=0.614,試求氯霉素的摩爾吸光系數。解 將有關數據代入例2. 某遵守Lambert-Beer定律的溶液,當濃度為c1時,透光率為T1,當濃度為0.5 c1、2 c1時,在液層不變的情況下,相應的透光率分別為多少?何者最大?解 根據Beer定律 A= -lgT = kc當濃度為c1時 -lg T1= k c1當濃度為0.5 c1時 -lg T2= k c2 = k(0.5 c1) = 0.5(-lg T1) -lg T2= -lg

2、(T1)1/2 T2= T11/2當濃度為2 c1時 -lg T3= k c3 = 2(k c1) = 2(-lg T1) T3= T12 0T1 T2為最大例3 某化合物,其相對分子質量Mr =125,摩爾吸光系數e = 2.5105Lmol-1cm-1,今欲準確配制該化合物溶液1 L,使其在稀釋200倍后,于1.00cm吸收池中測得的吸光度A = 0.600,問應稱取該化合物多少克?解 設應稱取該化合物x克 A = ebc0.600=2.50105Lmol-1cm-1x = 0.0600g例4 為測定某試液鐵含量,稱0.4320g (NH4) Fe (SO4)212H2O溶于水配成50.0

3、0ml標準鐵溶液,吸取此溶液4.00ml,加磺基水楊酸顯色后,稀釋成50.00ml,測得A = 0.408。取未知試液5.00ml稀釋成25.00ml,再吸取稀釋后試液4.00ml在上述相同條件下顯色后,稀釋成50.00ml,測得A = 0.413,試計算試樣中的鐵含量(gL-1)。解 (NH4) Fe (SO4)212H2O : Fe481.85 55.850.4320 x稀釋后標準鐵溶液濃度已知 As = 0.408, Ax = 0.413 設樣品鐵含量為cx故未知試液鐵含量為:例5 未知相對分子質量的胺試樣,通過用苦味酸(Mr = 229)處理后轉化為胺苦味酸鹽(1:1加成化合物)。當波

4、長為380nm時,胺苦味酸鹽在95%乙醇中的摩爾吸光系數為1.35104mol-1Lcm-1。現(xiàn)將0.0300g胺苦味酸鹽溶于95%乙醇中,準確配制1.00 L溶液,在380nm,b = 1.00cm時,測得溶液吸光度A = 0.800,試計算未知胺的相對分子質量。解 設未知胺的相對分子質量為x 胺與苦味酸形成的胺苦味酸鹽為1:1加成化合物 胺苦味酸鹽的相對分子質量為(229+x)v = 1.00 L,M為229+x 代入0.800 = 1.35104mol-1Lcm-11.00cm229+x =506 x = 227一、判斷題(對的打,錯的打)1. 分光光度法靈敏度高,特別適用于常量組分的測

5、定。 ( )2. 光照射有色溶液時,A與T的關系為lgT=A。 ( )3. 當某一波長的單色光照射某溶液時,若T=100%,說明該溶液對此波長的光無吸收。 ( )4. 符合Lambert-Beer定律的某有色溶液,其濃度越大,透光率越大。 ( )5. 如果吸收池的厚度增加1倍,則溶液的透光率將減少1倍。 ( )6. 吸光系數與入射光波長、溶劑及溶液濃度有關。 ( )7. e (max)只與物質的性質有關,是物質的特性常數。 ( )8. e 愈大,表明溶液對入射光愈易吸收,測定的靈敏度愈高。 ( )9. 一般e 值在103以上即可進行分光光度法測定。 ( )10. 吸收曲線的基本形狀與濃度無關。

6、 ( )二、選擇題(將每題一個正確答案的標號選出)1下列敘述錯誤的是 ( )A. 光的能量與波長成反比 B. 物質對光的吸收有選擇性C. 不同物質的吸收光譜不同,因此可根據吸收光譜進行定性分析D. 有色物質的顏色是其所吸收光的顏色E. 有色溶液越濃,對一定能量的光的吸收也越多。2在分光光度法中的吸光度A可表示為 ( )A. It/I0 B. lg(It/I0) C. I0/It D. lg(I0/It) E. lgT3關于Lambert-Beer定律,下述正確的是 ( )A. 該定律僅適用于可見光區(qū)的單色光。B. 該定律僅適用于有色物質的含量測定。C. 其他條件不變,溶液濃度改變,吸光度和吸光

7、系數都會改變。D. 其他條件不變,入射光波長改變,吸光度和吸光系數都會改變。E. 其他條件不變,溶液厚度改變,吸光度和吸光系數都會改變。4下列哪種情況下,Lambert-Beer定律不能成立 ( )A. 入射光波長為260nm B. 溶液透明、均勻、無散射 C. 溶液中待測物質的濃度為1.0 molL-1D. 溶劑為甲醇 E. 溶液中吸光物質穩(wěn)定。5某一有色溶液濃度為c,測得透光率為T0,把濃度稀釋到原來的1/2,在同樣條件下測得的透光率為( )A. 2T0 B. T0/2 C. T01/2 D. T02 E. T0 6吸光物質(Mr=180)的=6103,稀釋10倍后,在1cm吸收池中測得的

8、吸光度為0.30,則原溶液的質量濃度為 ( )A. 90mgL-1 B. 900 mgL-1 C. 9 mgL-1 D. 0.9 mgL-1 E. 0.0005 mgL-17將某波長的單色光通過厚度為1cm的溶液,則透射光強度為入射光強度的1/2,若該溶液厚度為2cm時,吸光度應為 ( )A. 0.151 B. 0.250 C. 0.301 D. 0.500 E. 0.6028用波長相同的單色光測定甲乙兩個濃度不同的同一種有色物質,若甲溶液用厚度為1cm的吸收池,乙溶液用2cm的吸收池進行測定,結果吸光度相同,甲乙兩溶液濃度的關系是 ( )A. 甲與乙濃度相等 B. 乙的濃度是甲的2倍 C.

9、甲的濃度是乙的1/4 D. 甲的濃度是乙的2倍 E. 乙的濃度是甲的1/49有一濃度為2.0010-4molL-1的有色溶液,在某一波長處,用3.00cm的吸收池測得其吸光度為0.120,將此溶液稀釋一倍,在同樣波長處于5.00cm的吸收池中測得其吸光度仍為0.120,則此溶液的吸光度與溶液濃度、液層厚度的關系 ( )A. 呈線性關系 B. 符合Beer定律,但不符合Lambert定律 C. 符合Lambert定律,但不符合Beer定律D. 不符合Lambert-Beer定律 E. 符合Lambert-Beer定律10在可見分光光度法中,影響吸光系數的因素是 ( )A. 入射光波長 B. 溶液

10、濃度 C. 溶液厚度 D. 入射光強度 E. 吸收池大小11摩爾吸光系數與下列哪個因素無關 ( )A. 溶液的濃度 B. 溶液的性質 C.溶液的溫度 D. 入射光波長 E. 溶劑性質12質量吸光系數a與摩爾吸光系數e的關系可用下式表示 ( )A. ae=1 B. a=e C. ae=M D. a=e M E. e=aM13下面說法正確的是 ( )A. 吸收光譜的基本形狀與溶液的濃度無關 B. 吸收光譜與物質的特性無關C. 濃度愈大,吸光系數愈大 D. 其他因素一定時,吸光度值與測定波長成正比 E. 波長一定時,測定不同濃度溶液的A值可繪制吸收光譜曲線14符合Beer定律的某有色物質溶液,當其濃

11、度改變時,其吸收光譜曲線上的最大吸收峰的位置將( )A. 向短波方向移動 B. 向長波方向移動 C. 不改變,但峰高度改變 D. 不改變,峰高度也不變 E. 改變,但峰高度不變15溶液偏離Beer定律的重要原因之一是 ( )A. 顯色劑過量 B. 存在干擾物質 C. 儀器測量誤差 D. 單色光不純 E. 讀數不準16關于選擇max作入射光進行分光光度法測定的原因,下列敘述中不正確的是 ( )A. 在max處,單色光純度最高 B. 在max處,e 最大C. 在max處的一個較小范圍內,e 隨波長的變化較小D. 在max處,溶液的A與c成直線關系E. 以max為入射光,測定的靈敏度最高17分光光度

12、計顯示透光率T(%)為0時,相應的吸光度A為 ( )A. 0 B. 100% C. D. I0 E. It18下面有關顯色劑的敘述正確的是 ( )A. 能與被測物質生成穩(wěn)定的有色物質B. 必須是本身有顏色的物質 C. 與被測物質的顏色互補D. 本身必須是無色試劑 E. 在測定波長處,應有明顯吸收19分光光度法中使用試劑空白作對照的目的是 ( )A. 用以消除儀器測量誤差B. 用以消除溶液偏離Beer定律引起的誤差C. 用以消除單色光純度差引起的誤差D. 用以消除溶劑、顯色劑等物質對入射光的吸收E. 用來掩蔽干擾離子20相同條件下,測得1.010-3molL-1標準溶液的透光率為50%,待測溶液

13、的透光率為55%,則待測溶液的濃度為 ( )A. 1.210-3molL-1 B. 1.110-3molL-1 C. 1.010-3molL-1D. 8.610-4molL-1 E. 9.110-4molL-1三、填空題1. 分光光度法是根據物質的_光譜及光的_定律,對物質進行定性定量分析的一種方法。2. 可見分光光度計測定的波長范圍為_,紫外分光光度計測定的波長范圍為_。3. 以不同波長單色光作入射光測得的某一溶液吸光度作縱坐標,入射光的波長作橫坐標作圖,所得的曲線叫_。溶液濃度越大,吸收峰值_,最大吸收波長_。4. 朗伯-比爾定律只有在入射光為_時才適用。5. 為提高測定的準確度,溶液的吸

14、光度讀數范圍應調節(jié)在_為好,可通過調節(jié)溶液的_和_來達到。6. 分光光度計是通過_ _來獲得單色光的。7. 當空白溶液置入光路時,應使T=_, A=_ 。8. 吸光度A=0.30,則透光率T=_。當其他條件不變,而溶液濃度增大至原來2倍時,吸光度A=_, 透光率T=_。9. 某有色溶液,在一定波長下用1cm吸收池測得A=0.30。相同條件下,若用2cm吸收池測定,則A=_,T=_。10. 分光光度法中選擇入射光波長的原則是 _。四、問答題1. 寫出Lambert-Beer定律的數學表達式,簡述各數學符號的物理意義。2. 列出構成分光光度計的主要部件(用方框圖表示)??梢姺止夤舛扔嬇c紫外分光光度

15、計的玻璃元件有何不同?五、計算題1.在波長為520nm處,KMnO4(Mr=158.04)的摩爾吸光系數等于2235Lmol-1cm-1,問在此波長下,在2.00cm吸收池中,1.0010-2 gL-1的溶液的透光率為多少?2. 維生素D2在264nm處有最大吸收,e 264=1.84104 Lmol-1cm-1,Mr=397,稱取維生素D2粗品0.8100g,配成1000ml溶液,從該溶液中吸取10.0ml,再稀釋至1000ml,取稀釋液在1.50cm吸收池中用264nm紫外光測得該溶液吸光度A=0.456,計算粗品中維生素D2的含量。3. 取2.00ml含2molL-1NH3的Cu2+溶液

16、放入1.00cm的吸收池中。測得在某一確定波長的吸光度為0.60。然后取0.010 molL-1CuSO4溶液1.00ml添加到第一個吸收池中。再測得的吸光度為0.80。試指出第一個溶液中Cu2+的濃度為多少?答案:一、判斷題1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 二、選擇題1.D 2.C 3.D 4.C 5.C 6.A 7.E 8.D 9.D 10.A 11.A 12.E 13.A 14.C 15.D 16.A 17.C 18.A 19.B 20.D三、填空題1. 吸收; 吸收2. 380780nm; 200380nm3. 吸收曲線; 越大; 不變4. 單色光5. 0.20.7; 濃度; 選擇厚度適當的吸收池6. 單色光器7. 100%; 0.008. 50%; 0.60; 25%9. 0.60; 25%10

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