基因工程基礎(chǔ)知識填空

1、. 專題一 基因工程 1. 1 DNA重組技術(shù)的基本工具 連接酶“分子縫合針”三、DNA一、基因工程的基本概念 片段“縫合”DNA?1. 作用實質(zhì)：將雙鏈概念：基因工程是指按照人們的愿望，進1. 起來，恢復被限制酶切開了的兩個核苷酸之和行嚴格的設(shè)計，并通過_ 。間的_等技術(shù)，賦予生物以新的_分子必須含有DNA2. 從而創(chuàng)造出更符合人們需要的_，作用前提：兩個 。_和_。由于基因新的 種類分子水平上進行設(shè)計和施工3. DNA工程是在 連接酶coli(1) 。 E DNA 的，因此又叫做_ 基本原理：?2. _ 來源： ?3. 理論基礎(chǔ)_ 功能：只能連接 (1) 不同生物的基因可以拼接的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)連

2、接酶(2) TDNA4_ 來源：細胞生物的遺傳物質(zhì)都是_，都是 又可以，既可以連接_ 功能：以_為基本單位構(gòu)成的雙鏈大時效率，但連接_連接分子。 _ 比較低。(2) 目的基因轉(zhuǎn)入后可以表達的基礎(chǔ)DN聚合比DN連接酶【拓展】 。有生物共用一套_ DNA 聚合酶DNA 連接酶 (3) 生物遺傳信息的表達都遵循。_都是催化兩個核苷酸之間形成作用 4. ?優(yōu)點_ 實質(zhì) 的改造生物的性目的性強，能(1) _ 是否_ _ 狀。 需模板 的障礙。(2) 克服_連接 _鏈 _鏈 DNA鏈在兩個DNA將_加 二、限制性核酸內(nèi)切酶分子手術(shù)刀作用 片段之間形到已存在的核苷 1. _。簡稱：過程 成酸鏈上，形成中分離

3、純化來源：主要是從_2. _ _ 而來。將兩個DNA合成作用 DNA3. ?功能特點：特異性，即識別雙鏈片段連接成_ 結(jié)果并且使每一條鏈，分子某種特定_ 中_的兩個核苷酸之間的四、基因進入受體細胞的載體“分子運_斷開。 輸車”末端。 _末端和_4. 酶切結(jié)果：?1. 基因工程中最常用的載體_ 酶切后的結(jié)果：EcoR畫出 (1) 來源：_等微生物 GAATTC (2) 結(jié)構(gòu)：裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于CTTAAG _ 之外，并具有_ 分子。_的,. . 基因的載體必須具備的條件?2. 以便提取和在體外進行操適合，(5) _ 作。(1) 有_個限制酶切割位點，載體的種類：除質(zhì)粒外，還有 3. 供外源

4、DNA片段（基因）插入其中。 等。、，(2) 能在宿主細胞內(nèi)_或整合到染_在進行基因工程操作中，真正被用作載體 4. 上，隨染色體DNA進行_。色體DNA的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進行過(3) 有特殊的_，如四環(huán)素抗性 的。的鑒定和選擇。 _DNA基因等，供重組 不會對受體細胞有害。(4) 必須是_的， 基因工程的基本操作程序1. 2 ?一、基因工程的基本操作程序_ _55-60 ，b. 復性（退火）：冷卻到1. _的獲取。 2. _的構(gòu)建。 _結(jié)合與的穩(wěn)定，在3. 將目的基因_。 熱延c. 伸：加熱到70-75 的作用下進行延伸)。目的基因的_ _(Taq酶4. 的方式成指數(shù)形式_ 結(jié)果

5、：目的基因以 二、目的基因的獲取 擴增。且，的結(jié)構(gòu)基因。_ 法：如果基因比較_(3) 人工合成1. 目的基因主要是用化學方_2獲取目的基因的方法 _，可以通過 (1) 從基因文庫中獲取目的基因 法直接人工合成DNA復制的比技術(shù)【拓展PCR 將含有某種生物不同基因基因文庫概念： DNA復制 PCR_的許多_，導入的群體中技術(shù)_ 原理 相分別含有這種生物的不儲存，各個_同原料 _ 同的基因，稱為基因文庫。點 條件 _、_、_ 文庫和基因文庫分類：可分為 _?解旋 _解旋 _催化 文庫_( 。文庫如cDNA)場所 _復制 _ 技術(shù)擴增目的基因利用(2) PCR不熱穩(wěn)定的細胞內(nèi)含有的的縮寫。PCR 技

6、術(shù)是_同酶 DNA 聚合酶 DNA聚合酶 點 的_PCR是一項在生物體外在短時間內(nèi)形形成 結(jié)果 核酸合成技術(shù)。成_ _ 的技術(shù)的原理：PCRDNA _。 ? 擴增的前提：要有一段已知目的基 PCR三、基因表達載體的構(gòu)建 以便根據(jù)這一序列合成引物。，因的_ ?基因表達載體的構(gòu)建是實施基因工程的第目的擴增的條件： ?PCR_(、_二步，也是基因工程的_ 即_(料原，因基)1. 基因表達載體構(gòu)建目的：使目的基因在受，耐高溫的、dATP、dCTPdGTP、dTTP)體細胞中_，并且可以_給 (Taq酶_。)酶 下一代，同時，使目的基因能夠_。 PCR 擴增的過程除了目的基因外，基因表達載體的組成：2.

7、 ?受熱變性后a. 90-95加熱到變性：，DNA,. . ，吸引農(nóng)桿菌移向_及分泌大量的_、_以還必須有上的等。 _這些細胞，這時農(nóng)桿菌中的_可轉(zhuǎn)移到受體細DNA)(1) 啟動子：位于目的基因的_，是一_(可轉(zhuǎn)移的 DNA上。胞染色體的DNA段有特殊結(jié)構(gòu)的序列，是到插入程：將_化_識別和結(jié)合的部位，有了它 轉(zhuǎn)過上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，最終獲得所需_mRNA 才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出，可以使目的基因進入植物細胞，并將其插入的蛋白質(zhì)，即轉(zhuǎn)錄開始的部位。 使目的基因的DNA_終止子：位于目的基因的，也是，到植物細胞中染色體的(2) _一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA序列，使轉(zhuǎn)錄在所需。遺傳特性得以 的地方停止下

8、來，即轉(zhuǎn)錄停止的部位。 標記基因：用于鑒別受體細胞中是否?(3) 胞基含_，從而將有目的因的細，如氨出來，常為_ 芐青霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。 將目的基因?qū)雱游锛毎?2. _。? (1) 常用受體細胞： 常用方法：? (2) _。 含有目的基因的表_(3) 基本操作程序： _達載體_(受精卵) 胚胎移植新性狀動物表達載體構(gòu)建過程中，獲取目的基因與3? 切割質(zhì)粒時一般用_3. 將目的基因?qū)胛⑸锛毎拗菩院怂醿?nèi)切細胞，其中(1) 常用受體細胞：酶，目的是產(chǎn)生相同的_，以便_ _最為廣泛。于連接。；多? (2) 原核生物的特點：_ 四、將目的基因?qū)胧荏w細胞_ 為單細胞；遺傳物質(zhì)相對 法

9、。 ? (3) 轉(zhuǎn)化方法：_的概念：目的基因進入受體細胞內(nèi)，_ 轉(zhuǎn)化過程 (4) 并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，（如大腸桿處理受體細胞? 用_ 。 _稱為 ，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中菌）為胞稱種狀子DNA分 將目的基因?qū)胫参锛毎?. 的生理態(tài)，這細或_常用受體細胞：植物的?(1) _。_ 將重組表達載體 。_分子溶于DNA_方法：? (2) 法、_下促進_中與混合，在一定完成轉(zhuǎn)化過程。分子，DNA吸收法_法，其中，_法、_ 是導入植物細胞最常用的方法。 易感染雙子葉植物和裸子植 農(nóng)桿菌特點：物。當植物體受到傷害是，傷口處的細胞會,. . 五、目的基因的檢測與鑒定 目的基因?qū)胧?/p>

10、體細胞是否可以_，只有通過檢測與鑒定才能知道，這是基因工程的第四步，也是檢查基因工程是否成功的一步。 類型 步驟 檢測內(nèi)容 ?方法 結(jié)果顯示 _檢測 第一步 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入了目的基因 _ (DNA 探針轉(zhuǎn)基因生物DNA ) 是否_ 第二步 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄 _ (DNA 探針轉(zhuǎn)基因生物 mRNA ) 是否_ 第三步 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) _ 是否_ _水平的檢測 包括抗蟲、抗病的接種實驗，以確定是否具有抗性的及抗性程度；基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較等 1. 3 基因工程的應用 _或設(shè)法除去 _，一、植物基因工程碩果累累再結(jié)合_，培育植物基因工程技術(shù)

11、主要用于提高農(nóng)作物的出沒有_的轉(zhuǎn)基因克隆動物器_(如抗除草劑、抗蟲、抗病、官。，以及改良農(nóng)作物的 抗干旱和抗鹽堿等) 和利用植物生產(chǎn)_等方面。 三、基因工程在醫(yī)學、藥學上的應用 1 基因工程藥物：利用“工程菌”生產(chǎn)基因動物基因工程前景廣闊二、 工程藥品包括動物基因工程主要應用于動物品種_、_、_、_、_、_ 建立_、器官移植等多方面。 等。 工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得度速：將物于(1) 用提高動生長到高效率表達的菌類細胞株系一般稱為“工_導入動物體內(nèi)，以提高動程菌”物生長速率。 。 2基因治療：是把 (2) 用于改良畜產(chǎn)品的品質(zhì)。 _導入病人體內(nèi)，使該基因的將藥用蛋白基因_發(fā)揮功能，從而達到治用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物：(3) 療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的的啟動子等調(diào)控組件重組與_手段,包括_和等方法，通過在一起，_導入哺乳_。 中，然后，將受精卵送入母_動物的補體內(nèi)，使其生長發(fā)育成1：用于基因治療的基因有三種類型：。轉(zhuǎn)基因動_ 來物進人泌乳期后，可以通過分泌的_; _;生物反應)(生產(chǎn)所需要的藥品，稱為乳腺房 器。 _. ?補2：基因診斷。 將器官(4) 用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體：原理：某入導組因基體供種抑，子因節(jié)調(diào)_;工具制_ ,. . 1. 4 蛋白質(zhì)工程 1.實質(zhì)：根據(jù) 的關(guān)系，通過 ，對 現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或