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1、名校名 推薦12基因工程的基本操作程序( 時(shí)間: 30 分鐘滿分: 50 分 )考查知識(shí)點(diǎn)及角度難度及題號(hào)基礎(chǔ)中檔稍難目的基因的獲取4基因表達(dá)載體的構(gòu)建及導(dǎo)入1、 2、 3目的基因的檢測(cè)與鑒定5綜合運(yùn)用6、 7一、選擇題 ( 共 5 小題,每小題6 分,共 30 分 )1基因工程的核心是() 。a目的基因的獲取b基因表達(dá)載體的構(gòu)建c將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞d目的基因的檢測(cè)與鑒定解析目的基因構(gòu)建表達(dá)載體后才能使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能發(fā)揮作用,只有構(gòu)建表達(dá)載體后,才能根據(jù)載體上的標(biāo)記基因鑒別目的基因是否導(dǎo)入了受體細(xì)胞,從而篩選出含目的基因的受體細(xì)胞,避
2、免進(jìn)行盲目的無效工作。答案b2下列選項(xiàng)中不是表達(dá)載體必要的組成成分的是() 。a目的基因b啟動(dòng)子c終止子d抗青霉素基因解析 a、 b、 c 三項(xiàng)均為表達(dá)載體的必要的組成成分;具有標(biāo)記基因也是表達(dá)載體必要的組分,但抗青霉素基因只是標(biāo)記基因中的一種。答案 d3將目的基因?qū)胗衩浊o尖分生區(qū)細(xì)胞和小鼠受精卵,應(yīng)分別采用的方法是() 。a顯微注射法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法b基因槍法花粉管通道法1名校名 推薦c農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法d基因槍法顯微注射法解析 本題考查將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法, 解題關(guān)鍵是理解針對(duì)不同受體細(xì)胞采取的不同方法。玉米是單子葉植物,對(duì)單子葉植物來說,常用的方法是基因槍法;對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞來說,
3、常用的方法是顯微注射法。答案d4下面甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法,下列說法中,錯(cuò)誤的是() 。a甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫(kù)b乙方法可建立該細(xì)菌的cdna文庫(kù)c甲方法要以脫氧核苷酸為原料d乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與解析甲方法是從細(xì)菌的dna中直接提取,故可以建立該細(xì)菌的基因組文庫(kù)。乙方法是由 mrna逆轉(zhuǎn)錄獲得的目的基因,故可以建立該細(xì)菌的cdna文庫(kù)。乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核苷酸為原料。答案c5檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體dna上是否插入了目的基因的常用方法是() 。a dna分子雜交技術(shù)b熒光分子標(biāo)記技術(shù)c放射性同位素標(biāo)記技術(shù)d顯微注射技術(shù)解析檢測(cè)目的基因常采用dna分子雜交技
4、術(shù), 即在含有目的基因的dna片段上用放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記,以此作為基因探針,并使基因探針與基因組dna雜交,若顯示出雜交帶,則表明目的基因已插入染色體dna中。答案a二、非選擇題 ( 共 2 小題,共20 分 )6(10 分) 在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan r ) 常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。2名校名 推薦請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問題。(1)a 過程需要的酶有_ 。(2)b 過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為載體必須具備的兩個(gè)條件是_ 。(3)c 過程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加入_。(4)
5、在 d 過程中,抗蟲基因遺傳信息的傳遞過程是_ 。(5) 獲取真核生物的基因常用的方法是_ ,包括 _。(6) 如 果 利 用 dna 分 子 雜 交 原 理 對(duì) 再 生 植 物 進(jìn) 行 檢 測(cè) , d 過 程 應(yīng) 該 用_ 作為探針。(7) 科學(xué)家在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過程中,采用了兩種方案:一是將抗蟲基因?qū)腚x體的棉花葉片細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng); 請(qǐng)你想另外一種方案: 可以將抗蟲基因?qū)胫参锏?_中,再進(jìn)行培養(yǎng),導(dǎo)入成功的標(biāo)志是_ 。解析(1) 將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過程需要同一種限制酶,連接時(shí)還需要 dna連接酶。 (2) 作為基因工程的載體,必須具備三個(gè)條件:在宿主細(xì)胞中能穩(wěn)定保存并能大
6、量復(fù)制。有多個(gè)限制酶切點(diǎn),而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個(gè)。有一定的標(biāo)記基因,便于篩選。題目中能體現(xiàn)的是;(3) 由題可知,我們需要的植株是含有抗蟲基因的植株, 因此要進(jìn)行篩選, 含有抗蟲基因的植株也一定含有抗卡那霉素基因,所以要利用卡那霉素進(jìn)行篩選。(4) 抗蟲基因最終要表現(xiàn)出抗蟲的性狀就必須表達(dá),即通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實(shí)現(xiàn)。(5) 真核生物的基因的獲取常用人工合成的方法,包括反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。(6) 目的基因的檢測(cè)最關(guān)鍵是看受體細(xì)胞是否含有目的基因,常用 dna分子雜交技術(shù),以已知目的基因片段作為探針,利用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行檢測(cè)。(7)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,可以選用體細(xì)胞或受精卵,最后要進(jìn)
7、行個(gè)體水平檢測(cè),即看是否能抗蟲。答案(1) 限制酶和dna連接酶(2) 具有標(biāo)記基因;能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存(3) 卡那霉素(4) 抗蟲基因轉(zhuǎn)錄成 mrna,再翻譯成為蛋白質(zhì)(5) 人工合成法反轉(zhuǎn)錄法、化學(xué)合成法3名校名 推薦(6) 放射性同位素 ( 或熒光分子 ) 標(biāo)記的抗蟲基因(7) 受精卵 棉花有抗蟲性狀的表現(xiàn)7(10 分 ) 科學(xué)家從某細(xì)菌中提取抗鹽基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。如圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程,含目的基因的 dna和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答下面的問題。(1) 過程獲得的抗鹽基因可用pcr技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)須用 _酶,所需的原料是
8、_。(2) 已知幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)( 如下表 ) :限制酶bamhhind ecor sma識(shí)別序列及ggatccaagcttgaattccccggg切割位點(diǎn)cctaggttcgaacttaaggggccc)用 圖 中 的 質(zhì) 粒 和 目 的 基 因 構(gòu) 建 重 組 質(zhì) 粒 , 不 能 使 用sma 酶 切 割 , 原 因 是_ 。圖中過程為防止質(zhì)粒和含目的基因的外源dna片段自身環(huán)化, 應(yīng)選用 _酶對(duì)外源 dna、質(zhì)粒進(jìn)行切割。(3) 圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中抗鹽煙草細(xì)胞的_、_過程。(4) 為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn) 行 分 子 雜
9、 交 檢 測(cè) , 又 要 在 個(gè) 體 水 平 上 鑒 定 , 后 者 具 體 過 程 是_ 。解析(1)pcr 技術(shù)所需的原料是合成dna的四種脫氧核苷酸。根據(jù) pcr反應(yīng)原理, 每次循環(huán)可分為在95 時(shí)進(jìn)行變性,在55 時(shí)進(jìn)行復(fù)性,在72 時(shí)延伸,該過程需要耐熱的 dna聚合酶。4名校名 推薦(2) 從圖中信息可知, sma酶的切割位點(diǎn)位于目的基因和 m 抗生素抗性基因上。分析抗鹽基因的 dna片段,可知該 dna含四種限制酶切點(diǎn),其中 sma位于目的基因上,不宜采用。 ecor 位于目的基因兩側(cè),若用ecor 切割則目的基因會(huì)自身環(huán)化。bamh 與 hind 位于目的基因兩端,且質(zhì)粒中也有相應(yīng)的適合的切割位點(diǎn),因此用bamh和hind 才能完整地切下該抗鹽基因,同時(shí)保證目的基因與質(zhì)粒連接方式的唯一性,防止自身環(huán)化。(3) 轉(zhuǎn)基因后的植物細(xì)胞,經(jīng)脫分化產(chǎn)生愈傷組織,
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