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文檔簡(jiǎn)介

1、專題八 生物技術(shù)實(shí)踐,微生物的利用 (1)微生物的分離和培養(yǎng) (2)某種微生物數(shù)量的測(cè)定,(3)培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用 (4)利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其 他方面的應(yīng)用 酶的應(yīng)用 (5)酶活力測(cè)定的一般原理和方法 (6)酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用 生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用 (7)植物的組織培養(yǎng) (8)蛋白質(zhì)的提取和分離 (9)PCR 技術(shù)的基本操作和應(yīng)用,實(shí) 驗(yàn) 與 探 究 能 力,酵母菌,20,醋酸菌,氮源,稀釋涂布平板法,二苯胺,微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用,1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作過程中所用菌種及控制條,件的比較:,2.培養(yǎng)基的主要種類:,3.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分:

2、,4.消毒和滅菌的區(qū)別:,5.微生物的分離和計(jì)數(shù):,(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù):,篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株(以尿素為唯一氮,源)。,測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法:活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡直接,計(jì)數(shù)法。,過程:土壤取樣樣品的稀釋選擇培養(yǎng)與觀察。 (2)分解纖維素的微生物的分離: 實(shí)驗(yàn)原理:,即:可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。,流程:土壤取樣鑒別培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑,選菌落。,【典例 1】(2012 年江蘇高考改編雙選)下列關(guān)于制作果酒、,果醋和腐乳的敘述中,合理的是(,),A在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng) B條件適宜時(shí)醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒發(fā)酵過程

3、中發(fā)酵液密度會(huì)逐漸變大 D將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí),底層和近瓶口處需加 大用鹽量,名師點(diǎn)撥在果酒發(fā)酵后期,由于瓶中的營養(yǎng)物質(zhì)減少, 單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的 CO2 的量減少,所以擰開瓶蓋的間隔時(shí)間可 以延長(zhǎng);在糖源、氧氣充足的條件下,醋酸菌可將葡萄汁中的 糖分解成醋酸;果酒發(fā)酵過程中,營養(yǎng)物質(zhì)被消耗,并且有水 的生成,密度會(huì)逐漸減??;將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí),近 瓶口表面的鹽要鋪厚一些,但底層不需要大量用鹽,D 錯(cuò)誤。,答案AB,【典例 2】(2012 年全國新課標(biāo))關(guān)于細(xì)菌的敘述中,正確,的是(,),A不同種類細(xì)菌的生長(zhǎng)均需要相同碳源 B常用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落 C細(xì)菌大量培養(yǎng)過程中,

4、芽孢形成于細(xì)菌生長(zhǎng)的調(diào)整期 D培養(yǎng)基中含有高濃度 NaCl 有利于金黃色葡萄球菌的篩 選 名師點(diǎn)撥細(xì)菌的碳源與其新陳代謝的類型有關(guān),A 錯(cuò)誤; 菌落的形成需要固體培養(yǎng)基,B 錯(cuò)誤;芽孢大量形成于衰亡期, C 錯(cuò)誤;金黃色葡萄球菌能耐高鹽,D 正確。 答案D,【典例 3】(2012 年深圳六校聯(lián)考)有些細(xì)菌可分解原油, 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤 中篩選出高效降解原油的菌株。回答問題:,(1) 在 篩 選 過 程 中 , 應(yīng) 將土壤樣品 稀 釋 液 接 種 于以 _為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講, 該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。,(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用

5、的接種方法有兩,種,即_和_。,(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大,小,分解圈大說明該菌株的降解能力_。,(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方 法有灼燒滅菌法、_和_。無菌技術(shù) 要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行,以避免周圍 環(huán)境中微生物的污染。,名師點(diǎn)撥(1)由于該細(xì)菌能夠分解原油,所以應(yīng)該以原油,為唯一碳源來篩選,這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。,(2)菌株的接種方法,常用的有兩種:平板劃線法和稀釋涂,布平板法。,(3)菌株分解周圍的營養(yǎng)物質(zhì),出現(xiàn)分解圈,分解圈大說明,該菌株的降解能力強(qiáng)。,(4)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸 汽滅菌;微生物的

6、培養(yǎng)要求嚴(yán)格的無菌技術(shù),操作時(shí)在酒精燈 火焰附近進(jìn)行,在酒精燈火焰處操作可避免雜菌干擾。,選擇 稀釋涂布平板法,答案(1)原油 (2)平板劃線法 (3)強(qiáng),(4)干熱滅菌法,高壓蒸汽滅菌法,火焰,DNA 和血紅蛋白的分離與提純,1提取方法總結(jié):,2.DNA 粗提取與鑒定:,(1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核,不適于作 DNA,提取的材料,但卻是提取血紅蛋白的理想材料。,(2)實(shí)驗(yàn)過程中兩次用到蒸餾水:,第一次的目的:使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出 DNA。 第二次的目的:稀釋 NaCl 溶液。,(3)鑒定 DNA 的方法:加入二苯胺試劑并沸水浴加熱,觀,察是否出現(xiàn)藍(lán)色。,3血紅蛋白的提取和分離

7、操作程序:,(1)樣品處理:紅細(xì)胞的洗滌(除去血漿蛋白等雜質(zhì))血紅 蛋白的釋放(蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂)分離血紅蛋白溶液 (離心、分液)。,(2)粗分離透析:除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)。 (3)純化:一般用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。 (4)純度鑒定:一般用 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳來測(cè)定蛋,白質(zhì)的分子量。,4PCR 技術(shù)擴(kuò)增 DNA 片段: (1)過程:,變性:加熱至 90 95 ,DNA 解鏈。,復(fù)性:冷卻至 50 55 ,引物結(jié)合到互補(bǔ) DNA 鏈。,延伸:加熱至 70 75 ,熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶從引物,開始互補(bǔ)鏈的合成。,(2)原料與特點(diǎn):需要耐熱(Taq)DNA 聚合酶

8、、引物、高溫、 DNA 模板、4 種脫氧核苷酸、緩沖溶液,不需要 ATP,可在體 外迅速擴(kuò)增。,【典例 1】(2012 年深圳三校聯(lián)考)在利用雞血進(jìn)行“DNA,的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中,相關(guān)敘述正確的是(,),A用蒸餾水將 NaCl 溶液濃度調(diào)至 0.14 mol/L,濾去析出 物 B調(diào)節(jié) NaCl 溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部 分雜質(zhì) C將絲狀物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中,加入二苯胺試 劑即呈藍(lán)色 D用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同,名師點(diǎn)撥利用 DNA 在不同濃度的 NaCl 溶液中會(huì)溶解或 析出的特點(diǎn),可以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),而選用木瓜蛋白酶,則 可借

9、助酶作用的特異性,水解蛋白質(zhì),進(jìn)而除去雜質(zhì)。當(dāng)NaCl 溶液濃度被調(diào)至0.14 mol/L 時(shí),DNA 在其中的溶解度最小,會(huì) 大量析出,此時(shí)應(yīng)濾取,而不是濾去析出物,A 錯(cuò); C 項(xiàng)描述 中缺少加熱;可用菜花作材料,但由于菜花是植物材料,需加 上研磨的操作,D 錯(cuò)誤。,答案B,【典例 2】(2012 年廣東模擬)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的,描述,不正確的是(,),A洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂 B豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白 較少 C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測(cè) D在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較小的 雜蛋白移動(dòng)慢,名師點(diǎn)撥洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分 離純化,加入的是生理鹽水,紅細(xì)胞內(nèi)液與生理鹽水是等滲的, 所以可以防止細(xì)胞破裂。哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)

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