高三生物復習課件專題八生物技術實踐

1、專題八 生物技術實踐,微生物的利用 (1)微生物的分離和培養(yǎng) (2)某種微生物數量的測定,(3)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 (4)利用微生物發(fā)酵來生產特定的產物以及微生物在其 他方面的應用 酶的應用 (5)酶活力測定的一般原理和方法 (6)酶在食品制造和洗滌等方面的應用 生物技術在食品加工及其他方面的應用 (7)植物的組織培養(yǎng) (8)蛋白質的提取和分離 (9)PCR 技術的基本操作和應用,實 驗 與 探 究 能 力,酵母菌,20,醋酸菌,氮源,稀釋涂布平板法,二苯胺,微生物的培養(yǎng)與應用,1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作過程中所用菌種及控制條,件的比較：,2.培養(yǎng)基的主要種類：,3.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分：

2、,4.消毒和滅菌的區(qū)別：,5.微生物的分離和計數：,(1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數：,篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株(以尿素為唯一氮,源)。,測定微生物數量的常用方法：活菌計數法和顯微鏡直接,計數法。,過程：土壤取樣樣品的稀釋選擇培養(yǎng)與觀察。 (2)分解纖維素的微生物的分離： 實驗原理：,即：可通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。,流程：土壤取樣鑒別培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑,選菌落。,【典例 1】(2012 年江蘇高考改編雙選)下列關于制作果酒、,果醋和腐乳的敘述中，合理的是(,),A在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長 B條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒發(fā)酵過程

3、中發(fā)酵液密度會逐漸變大 D將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加 大用鹽量,名師點撥在果酒發(fā)酵后期，由于瓶中的營養(yǎng)物質減少， 單位時間內產生的 CO2 的量減少，所以擰開瓶蓋的間隔時間可 以延長；在糖源、氧氣充足的條件下，醋酸菌可將葡萄汁中的 糖分解成醋酸；果酒發(fā)酵過程中，營養(yǎng)物質被消耗，并且有水 的生成，密度會逐漸減小；將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，近 瓶口表面的鹽要鋪厚一些，但底層不需要大量用鹽，D 錯誤。,答案AB,【典例 2】(2012 年全國新課標)關于細菌的敘述中，正確,的是(,),A不同種類細菌的生長均需要相同碳源 B常用液體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落 C細菌大量培養(yǎng)過程中，

4、芽孢形成于細菌生長的調整期 D培養(yǎng)基中含有高濃度 NaCl 有利于金黃色葡萄球菌的篩 選 名師點撥細菌的碳源與其新陳代謝的類型有關，A 錯誤； 菌落的形成需要固體培養(yǎng)基，B 錯誤；芽孢大量形成于衰亡期， C 錯誤；金黃色葡萄球菌能耐高鹽，D 正確。 答案D,【典例 3】(2012 年深圳六校聯考)有些細菌可分解原油， 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤 中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：,(1) 在 篩 選 過 程 中 ， 應 將土壤樣品 稀 釋 液 接 種 于以 _為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講， 該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。,(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用

5、的接種方法有兩,種，即_和_。,(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大,小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。,(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方 法有灼燒滅菌法、_和_。無菌技術 要求實驗操作應在酒精燈_附近進行，以避免周圍 環(huán)境中微生物的污染。,名師點撥(1)由于該細菌能夠分解原油，所以應該以原油,為唯一碳源來篩選，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。,(2)菌株的接種方法，常用的有兩種：平板劃線法和稀釋涂,布平板法。,(3)菌株分解周圍的營養(yǎng)物質，出現分解圈，分解圈大說明,該菌株的降解能力強。,(4)實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸 汽滅菌；微生物的

6、培養(yǎng)要求嚴格的無菌技術，操作時在酒精燈 火焰附近進行，在酒精燈火焰處操作可避免雜菌干擾。,選擇 稀釋涂布平板法,答案(1)原油 (2)平板劃線法 (3)強,(4)干熱滅菌法,高壓蒸汽滅菌法,火焰,DNA 和血紅蛋白的分離與提純,1提取方法總結：,2.DNA 粗提取與鑒定：,(1)哺乳動物成熟的紅細胞中不含細胞核，不適于作 DNA,提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。,(2)實驗過程中兩次用到蒸餾水：,第一次的目的：使成熟的雞血細胞漲破釋放出 DNA。 第二次的目的：稀釋 NaCl 溶液。,(3)鑒定 DNA 的方法：加入二苯胺試劑并沸水浴加熱，觀,察是否出現藍色。,3血紅蛋白的提取和分離

7、操作程序：,(1)樣品處理：紅細胞的洗滌(除去血漿蛋白等雜質)血紅 蛋白的釋放(蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂)分離血紅蛋白溶液 (離心、分液)。,(2)粗分離透析：除去樣品中分子量較小的雜質。 (3)純化：一般用凝膠色譜法對血紅蛋白進行分離和純化。 (4)純度鑒定：一般用 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳來測定蛋,白質的分子量。,4PCR 技術擴增 DNA 片段： (1)過程：,變性：加熱至 90 95 ，DNA 解鏈。,復性：冷卻至 50 55 ，引物結合到互補 DNA 鏈。,延伸：加熱至 70 75 ，熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶從引物,開始互補鏈的合成。,(2)原料與特點：需要耐熱(Taq)DNA 聚合酶

8、、引物、高溫、 DNA 模板、4 種脫氧核苷酸、緩沖溶液，不需要 ATP，可在體 外迅速擴增。,【典例 1】(2012 年深圳三校聯考)在利用雞血進行“DNA,的粗提取與鑒定”的實驗中，相關敘述正確的是(,),A用蒸餾水將 NaCl 溶液濃度調至 0.14 mol/L，濾去析出 物 B調節(jié) NaCl 溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部 分雜質 C將絲狀物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺試 劑即呈藍色 D用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同,名師點撥利用 DNA 在不同濃度的 NaCl 溶液中會溶解或 析出的特點，可以除去蛋白質等雜質，而選用木瓜蛋白酶，則 可借

9、助酶作用的特異性，水解蛋白質，進而除去雜質。當NaCl 溶液濃度被調至0.14 mol/L 時，DNA 在其中的溶解度最小，會 大量析出，此時應濾取，而不是濾去析出物，A 錯； C 項描述 中缺少加熱；可用菜花作材料，但由于菜花是植物材料，需加 上研磨的操作，D 錯誤。,答案B,【典例 2】(2012 年廣東模擬)以下關于豬血紅蛋白提純的,描述，不正確的是(,),A洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可防止紅細胞破裂 B豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白 較少 C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的 雜蛋白移動慢,名師點撥洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分 離純化，加入的是生理鹽水，紅細胞內液與生理鹽水是等滲的， 所以可以防止細胞破裂。哺乳動物成熟的紅細胞沒有細