安捷倫1260型高效液相色譜儀詳細(xì)操作規(guī)程

1、.1.目的：規(guī)范Agilent 1260高效液相色譜儀維修、保養(yǎng)、校正操作。2.適用范圍：本公司化驗(yàn)室Agilent 1260高效液相色譜儀的維修、保養(yǎng)。3.有關(guān)責(zé)任：化驗(yàn)室精密儀器室4.引用標(biāo)準(zhǔn)：儀器說(shuō)明書(shū)及Agilent化學(xué)工作者現(xiàn)場(chǎng)操作培訓(xùn)教材5.規(guī)程內(nèi)容：5.1開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備5.1.1根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求配制流動(dòng)相，須經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾，之后再進(jìn)行脫氣處理，使用前必須用超聲波振蕩l0-15min，按無(wú)機(jī)相和有機(jī)相分開(kāi)別裝入溶劑瓶A（裝有洗鹽裝置，最好固定盛放無(wú)機(jī)鹽水相）、B中；對(duì)照品和樣品溶液進(jìn)樣前要經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。5.1.2若流動(dòng)相中含有緩沖鹽,則必須以每分鐘23滴的速度虹吸10%的異丙

2、醇水沖洗seal-wash，以防有鹽結(jié)晶在泵頭產(chǎn)生而損壞泵頭。5.2.采樣前準(zhǔn)備5.2.1打開(kāi)計(jì)算機(jī),進(jìn)入 Windows 系統(tǒng), 從上到下依次打開(kāi)各模塊電源。5.2.2待各模塊自檢完成后，雙擊桌面上的“儀器1聯(lián)機(jī)”圖標(biāo)，將自動(dòng)進(jìn)入化學(xué)工作站畫(huà)面。5.2.3從“視圖”菜單中選擇“方法和運(yùn)行控制”畫(huà)面,也可單擊工作站畫(huà)面左側(cè)的“方法和運(yùn)行控制”項(xiàng)，進(jìn)入方法和運(yùn)行控制窗口。5.2.4打開(kāi)Purge閥（逆時(shí)針），右擊“泵”圖標(biāo)出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單單擊“設(shè)定泵”選項(xiàng)進(jìn)入泵編輯畫(huà)面。5.2.5設(shè)“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道設(shè)到100%，單擊“確定”。 5.2.6單擊“泵”圖標(biāo)，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定

3、菜單，單擊“泵控制“選項(xiàng)選中“開(kāi)”單擊“確定”則系統(tǒng)開(kāi)始Purge，直到管路內(nèi)由溶劑瓶A到泵入口無(wú)氣泡為止；切換B通道(B通道設(shè)到100%)繼續(xù)Purge直到所有通道管路內(nèi)均無(wú)氣泡為止。(查看柱前壓力，若大于10Bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)濾芯/過(guò)濾白頭。) 5.2.7將泵的流量設(shè)到0.5ml/min，若使用雙泵則應(yīng)設(shè)定溶劑配比，如A=80%，B=20%；關(guān)閉排氣閥（順時(shí)針）；再將流量設(shè)到0.8ml/min，2分鐘后設(shè)定至方法所需流速，沖洗色譜柱20-30min。5.2.8單擊泵下面的瓶圖標(biāo)，輸入溶劑瓶A、B內(nèi)流動(dòng)相的實(shí)際體積（為保護(hù)泵和色譜柱，請(qǐng)按實(shí)際體積輸入）和停泵的體積單擊“確定”，如果各溶

4、劑瓶溶劑體積小于停泵體積，泵將自動(dòng)停止。 5.2.9把緩沖液（用于柱子過(guò)渡的，與流動(dòng)相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）換成流動(dòng)相，排氣后，逐步增加至所需流速，待柱壓基本穩(wěn)定后，打開(kāi)檢測(cè)器等，觀察基線情況。5.3.數(shù)據(jù)采集5.3.1采集方法編輯5.3.1.1編輯完整方法：從“方法”菜單中選擇“編輯完整方法”項(xiàng)，選中除“數(shù)據(jù)分析”外的三項(xiàng)，單擊“確定”進(jìn)入下一畫(huà)面。5.3.1.2方法信息：在“方法注釋”欄中加入（如方法的用途等），單擊“確定”進(jìn)入下一畫(huà)面。5.3.1.3泵參數(shù)設(shè)定：在“流速”處輸入方法所需流量（如1ml/min）；默認(rèn)為A為100%，如需二元高壓，在“溶劑B”處輸入所需

5、比例,則溶劑A=100-B ，也可“插入”一行“時(shí)間表”編輯二元梯度；在“壓力限”處輸入柱子的最大耐高壓（建議設(shè)定200bar）以保護(hù)柱子 ,單擊“確定”進(jìn)入下一畫(huà)面 。5.3.1.4 VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：在“波長(zhǎng)”下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng)，如254nm；在“峰寬(響應(yīng)時(shí)間)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間（如0.1min (2s)）；如有特殊要求，也可在“時(shí)間表”中可以“插入”一行輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng)（如1min 波長(zhǎng)=300nm），點(diǎn)擊“確定”。5.3.1.5在“運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表”中選中“數(shù)據(jù)采集”選項(xiàng)，單擊“確定”。5.3.1.6單擊“方法”菜單選中“方法另存為”輸入方法名

6、，單擊“確定”。5.3.1.7從“視圖”菜單中選中“在線信號(hào)”,選中“信號(hào)窗口1”,然后單擊“改變”鈕,將所要查看的信號(hào)移到右邊框中,單擊“確定”。5.3.1.8進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定：在進(jìn)樣模式中輸入“進(jìn)樣量”xxl，默認(rèn)為20l?！皹?biāo)準(zhǔn)進(jìn)針”只能輸入進(jìn)樣體積，此方式無(wú)洗針功能?！搬樓逑春筮M(jìn)樣”可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置為xx，此方式針從樣品瓶抽完樣品后會(huì)在洗瓶中洗針。進(jìn)樣器進(jìn)樣程序參數(shù)設(shè)定：選中使用進(jìn)樣程序，在“函數(shù)”中添加相應(yīng)函數(shù)即可按程序進(jìn)樣。5.3.1.9 TCC檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：在“溫度”左側(cè)下面的方框內(nèi)輸入所需溫度，并選中它，右側(cè)選中“與左側(cè)相同”使柱溫箱的溫度左右一致。5.3.2運(yùn)行方法

7、5.3.2.1單針進(jìn)樣5.3.2.1.1選擇“單針進(jìn)樣”圖標(biāo)。5.3.2.1.2從“運(yùn)行控制”菜單中選擇“樣品信息”選項(xiàng)，輸入“操作者名稱”，數(shù)據(jù)存儲(chǔ)目錄路徑中的子目錄，子目錄即為數(shù)據(jù)圖譜存儲(chǔ)的文件夾，輸入后，鼠標(biāo)點(diǎn)擊其他地方，會(huì)自動(dòng)彈出“E：不存在，要?jiǎng)?chuàng)建它嗎？”單擊“確定”?！皵?shù)據(jù)文件”中選擇“手動(dòng)”或“前綴/計(jì)數(shù)器”。（區(qū)別:“手動(dòng)”-每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會(huì)將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉；“前綴/計(jì)數(shù)器”在“前綴”框中輸入前綴，如20120505,在“計(jì)數(shù)器” 框中輸入計(jì)數(shù)器的起始位,儀器會(huì)自動(dòng)命名如000001、000002等等。）“樣品位置”填寫(xiě)進(jìn)樣瓶的位置。5.3.2.1.3點(diǎn)

8、擊畫(huà)面中的“開(kāi)始”運(yùn)行方法，中間停止采樣點(diǎn)“結(jié)束”。5.3.2.2 序列進(jìn)樣5.3.2.2.1“序列”下“序列參數(shù)”，設(shè)置同單針進(jìn)樣，樣品位置不填。5.3.2.2.2“序列”下選擇“序列表”，在表格中可進(jìn)行“插入”、“剪切”“復(fù)制”“粘貼”“追加行”等操作，表格中必須填寫(xiě)“樣品瓶”“樣品名稱”“方法名稱”“進(jìn)樣次數(shù)”“數(shù)據(jù)文件”“進(jìn)樣量”等信息，其他信息可選擇編輯。編輯完成后，單擊“確定”。在“序列菜單中選擇“序列模板另存為”為新建序列命名。5.3.2.2.3在“儀器”菜單中選擇“運(yùn)行序列”運(yùn)行當(dāng)前序列。停止采集數(shù)據(jù)選擇“儀器”菜單中“停止運(yùn)行/進(jìn)樣/序列”?；蛘咄瑔吾樳M(jìn)樣的方法。5.4.數(shù)據(jù)

9、分析方法編輯 5.4.1 從“視圖”菜單中單擊“數(shù)據(jù)分析”進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫(huà)面。5.4.2從“文件”菜單選擇“調(diào)用信號(hào)”選中所做的數(shù)據(jù)文件，單擊“確定”，也可直接雙擊打開(kāi)。5.4.3做譜圖優(yōu)化：從“圖形”菜單中選擇“信號(hào)選項(xiàng)”，再?gòu)摹胺秶敝羞x擇“自動(dòng)量程”及合適的顯示時(shí)間單擊“確定”或選擇“自定義量程”調(diào)整,反復(fù)進(jìn)行直到圖的比例合適為止。5.4.4積分優(yōu)化 5.4.4.1從“積分”中選擇“自動(dòng)積分”, 若積分結(jié)果不理想,再?gòu)牟藛沃羞x“積分事件”選項(xiàng)，選擇合適的“斜率靈敏度”、“峰寬”、“最小峰面積”、“最小峰高”。5.4.4.2從“積分”菜單中選擇“積分”選項(xiàng)，則數(shù)據(jù)被積分。5.4.4.3如積分

10、結(jié)果還不理想，則修改相應(yīng)的積分參數(shù)直到滿意為止。 5.4.4.4單擊左邊“保存并退出”圖標(biāo)將積分參數(shù)存入當(dāng)前方法中。 5.5打印報(bào)告5.5.1從“報(bào)告”菜單中選擇“設(shè)定報(bào)告”選項(xiàng)。5.5.2單擊“定量結(jié)果”框中“定量”右側(cè)的黑三角選中所采用的報(bào)告方法（如面積外標(biāo)法等），單擊“確定”。 5.5.3從“報(bào)告”菜單中選擇“打印”則報(bào)告打印結(jié)果將顯示在屏幕上，如想輸出到打印機(jī)，則單擊“報(bào)告”底部的“打印”鈕即可。5.6關(guān)機(jī)5.6.1關(guān)機(jī)前，用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1小時(shí)，流量0.5-l.0ml/min，再用100%有機(jī)溶劑沖0.5小時(shí)，然后關(guān)閉系統(tǒng)。5.6.2退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)（用shutd