H7N9禽流感病毒_實驗室檢測課件

1、H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,1,人感染H7N9禽流感實驗室檢測,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,2,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,3,病例定義,人感染H7N9禽流感疑似病例與確診病例定義參照人感染H7N9禽流感診療方案（2013年第2版）（衛(wèi)發(fā)明電201317號,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,4,標(biāo)本采集、運送,當(dāng)醫(yī)務(wù)人員懷疑病人感染H7N9禽流感病毒時，應(yīng)當(dāng)盡早采集其上、下呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）和發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及與急性期血清采集時間間隔2-4周的血清等,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,5,標(biāo)本采集、運送,對符合衛(wèi)生部發(fā)布的人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第二版）

2、中規(guī)定的病例定義的病人進(jìn)行采樣。 上呼吸道標(biāo)本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液） 下呼吸道標(biāo)本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,6,標(biāo)本采集、運送,血清標(biāo)本：發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血清 尸檢標(biāo)本 環(huán)境標(biāo)本：禽類糞便、籠具涂拭標(biāo)本和環(huán)境污水等標(biāo)本,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,7,標(biāo)本采集,要求,呼吸道標(biāo)本：發(fā)病早期采樣，采集的呼吸道標(biāo)本每份分為3 管，每份不少于1ml。 血清標(biāo)本：每份分為2管，每管不少于0.5ml,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,8,標(biāo)本采集、運送,標(biāo)本采集、包裝、運送等應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照可感染人類的高致病性病

3、原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定（衛(wèi)生部第45號令）等生物安全相關(guān)規(guī)定執(zhí)行,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,9,標(biāo)本采集、運送,H7N9禽流感病毒實驗室活動和樣本運輸按照人間傳染的病原微生物名錄中高致病性禽流感病毒進(jìn)行管理,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,10,實驗室檢測,有條件開展核酸檢測的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要對呼吸道標(biāo)本開展H7N9病毒核酸檢測，進(jìn)行病例診斷，并指導(dǎo)早期應(yīng)用抗病毒藥物；沒有條件開展核酸檢測的醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)盡快利用快速抗原檢測試劑進(jìn)行甲型流感病毒抗原檢測，并將甲型流感病毒抗原檢測陽性的標(biāo)本送當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室進(jìn)一步開展H7N9病毒核酸檢測,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,11,實

4、驗室檢測,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,12,流感樣病例強(qiáng)化監(jiān)測,尚未發(fā)生人感染H7N9禽流感病例的地區(qū)，在既往流感樣病例監(jiān)測工作基礎(chǔ)上，要提高監(jiān)測強(qiáng)度。增加標(biāo)本采集和檢測數(shù)量，南方省份每家流感監(jiān)測哨點醫(yī)院每周采集流感樣病例和人感染H7N9禽流感相關(guān)病例標(biāo)本20份，送當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室開展檢測,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,13,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,14,相關(guān)技術(shù)文件,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,15,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,標(biāo)本采集 為進(jìn)行病例診斷，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)盡早采集病人的相關(guān)臨床樣本。采集的臨床標(biāo)本包括病人的上呼吸道標(biāo)本（如咽拭子、鼻拭子、

5、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道標(biāo)本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本）和血清標(biāo)本等,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,16,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）和發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血清。如病人死亡，應(yīng)當(dāng)盡可能說服家屬同意尸檢，及時進(jìn)行尸體解剖，采集組織（如肺組織、氣管、支氣管組織）標(biāo)本。醫(yī)療機(jī)構(gòu)采集的呼吸道標(biāo)本每份不少于3ml。血清標(biāo)本每份分為2管，每管不少于0.5ml,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,17,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,對人感染H7N9禽流感確診病例可能

6、暴露的禽類飼養(yǎng)或交易等場所，由疾控機(jī)構(gòu)采集禽類糞便、籠具涂拭標(biāo)本和環(huán)境污水等標(biāo)本，技術(shù)要求參考職業(yè)暴露人群血清學(xué)和環(huán)境高致病性禽流感監(jiān)測方案（2011年版）。（,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,18,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,19,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,20,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,21,當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室收到標(biāo)本后24 小時內(nèi)，立即對呼吸道標(biāo)本開展甲、乙型流感病毒通用引物，H5、H7亞型的檢測。 若當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實

7、驗室檢測結(jié)果為H5、H7核酸檢測陽性時，應(yīng)當(dāng)于12小時內(nèi)將其中2管呼吸道相關(guān)原始標(biāo)本送至省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室。 若當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測到甲通陽性，不能分亞型的標(biāo)本，要12小時內(nèi)送省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,22,標(biāo)本分裝： 流感網(wǎng)絡(luò)實驗室收檢的呼吸道標(biāo)本每份分為3管，每管應(yīng)不少于1ml。1管用于檢測，另外2管用于復(fù)核和病毒分離。標(biāo)本儲存應(yīng)在-70或以下溫度，避免反復(fù)凍融,人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實驗室檢測策略,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,23,H7N9禽流感病毒檢測方法,H7N9禽流感病

8、毒_實驗室檢測,24,H7N9禽流感病毒檢測方法,Realtime PCR檢測方法： 引物探針、陽性對照由國家流感中心和四川省疾控中心統(tǒng)一下發(fā) 請認(rèn)真閱讀引物探針說明,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,25,H7N9流感病毒檢測方法,將新合成的引物探針在開蓋前短暫離心 用RNase Free Water溶解，管上標(biāo)記為Xul/100pmol ,引物加上X的2.5倍體積的水，探針加上X的5倍體積的水，變成為使用濃度。 引物/探針未溶解前（干粉狀態(tài)）4保存。 引物/探針溶解之后 -20或 -20以下保存（注意：反復(fù)凍融易導(dǎo)致引物/探針降解，建議分裝保存,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,26,人感染H

9、7N9禽流感強(qiáng)化監(jiān)測實施方案,適用范圍 本方案適用于各地在已發(fā)生人感染H7N9禽流感確診病例的縣（區(qū)）開展強(qiáng)化監(jiān)測工作。僅發(fā)現(xiàn)動物或環(huán)境H7N9禽流感病毒檢測陽性結(jié)果的地區(qū)可參考此方案，自行決定是否開展強(qiáng)化監(jiān)測工作,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,27,人感染H7N9禽流感強(qiáng)化監(jiān)測實施方案,發(fā)生人感染H7N9禽流感確診病例的縣（區(qū)），應(yīng)當(dāng)從病例確診后次日開始在所有二級及以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)門急診開展為期2周的流感樣病例（ILI）和住院嚴(yán)重急性呼吸道感染（SARI）強(qiáng)化監(jiān)測,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,28,人感染H7N9禽流感強(qiáng)化監(jiān)測實施方案,嚴(yán)重急性呼吸道感染（SARI）病例 （1）5歲以上兒童

10、及成人。 新收入院患者具有以下4項臨床表現(xiàn)： 急性起??； 腋下體溫38； 咳嗽或咽痛； 氣促（呼吸頻率25次/分鐘）或呼吸困難 正在住院治療的患者如出現(xiàn)上述4項臨床表現(xiàn)，也視為嚴(yán)重急性呼吸道感染病例,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,29,人感染H7N9禽流感強(qiáng)化監(jiān)測實施方案,2）5歲及以下嬰幼兒。 新收入院患兒具有以下臨床表現(xiàn)： 急性起病； 咳嗽或呼吸困難； 伴以下癥狀或體征之一： A氣促：呼吸頻率大于 60次/分鐘（2個月的嬰兒）；呼吸頻率大于50次/分鐘（2-11月齡嬰兒）；呼吸頻率大于40 次/分鐘（1-5歲）。 B拒食或嗆奶。 C嚴(yán)重嘔吐。 D抽搐。 E嗜睡或昏迷。 F胸壁凹陷或平靜時喘鳴。 正在住院治療的患兒如出現(xiàn)上述臨床表現(xiàn)，也視為嚴(yán)重急性呼吸道感染病例,H7N9禽流感病毒_實驗室檢測,30,人感染H7N9禽流感強(qiáng)化監(jiān)