YY∕T 1649.1-2019 醫(yī)療器械與血小板相互作用試驗(yàn) 第1部分：體外血小板計數(shù)法

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中華人民共和

醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

YY/T1649J—2019

醫(yī)療器械與血小板相互作用試驗(yàn)

III

第1部分:體外血小板計數(shù)法

Testmethodforinteractionsofmedicaldeviceswithplatelet——

Part1：/nvitroplateletcountassay

2020-06-01實(shí)施

2019-05-31發(fā)布

國家藥品監(jiān)督管理局 發(fā)布

巾華人民共和M醫(yī)藥

行鼎標(biāo)準(zhǔn)

醫(yī)療器械與血小板相互作用試驗(yàn)

第1部分：體外血小板計數(shù)法

YY/T1649,1—2019

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書號：155066?2-34056

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YY/T1649.1—2019

YY/T1649?醫(yī)療器械勾血小板相互作川試驗(yàn)》分為以下部分：

——第1部分:體外iflL小板計數(shù)法；

—第2部分:體外血小板激活試驗(yàn)。

木部分為YY/T1619的第1部分4

本部分按照GB/T1J—2009給出的規(guī)則起草。

請注意本文什的某些內(nèi)容川能涉及專利、本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)仃。

本部分山國家藥品監(jiān)竹管理W捉出。

本部分由全同K療器械生物學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC248)歸口、

本部分主要起草單位：山東省醫(yī)療器械產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)中心、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所、上海松立生物技術(shù)有限公M_h

木部分+:要起草人:喬春霞、￡紅/示洪海、李春令。

YY/T1649J—2019

GB/T 中給Hl了醫(yī)疔器械/材料血液相容性的試驗(yàn)方法以及試驗(yàn)的選擇策略。伍只給出了

選擇原則。YY/T1649的木部分是體外血小板計數(shù)的具體試驗(yàn)方法，可作為GB/T1688(>.4屮醫(yī)療器械/材料與血小板相互作用評價的補(bǔ)充。

作為血液的有要組分，血小板對干防止岀血起關(guān)鍵作用。接觸器械后血液中血小板數(shù)H下降是由于血小板吸附、聚集或激活等作用川起的?將接影響醫(yī)療器械/材料的血液相容性。YY/T1649的本部分所描述的體外血小板il數(shù)的測定方法，4用來篩選具打潛在血小板粘附和激活作川的醫(yī)療器械/材料。

醫(yī)療器械與血小板相互作用試驗(yàn)

第1部分：體外血小板計數(shù)法

1范圍

YY/T1M9的本部分規(guī)定了用T在血液相容性評價中檢測舊療器械/材料在體外U血小板扣與:怍川的血小板計數(shù)試驗(yàn)方法。

本部分適用于醫(yī)療器械/材料表面血小板粘附性能和激活潛能的評價。

本部分巾建）:的試驗(yàn)體系適用于人血.使川動物W液進(jìn)行試驗(yàn)-可參照本部分-其適宜性應(yīng)進(jìn)行論證，

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡足注日期的⑴用文作，僅注II期的版本適用于本文件。凡是不注i丨期的引用文n：，其最新版本（包括所有的修改單）適用t本文件。

GB/T16886.1醫(yī)療器械化物學(xué)評價笫1部分:風(fēng)險管理過程巾的評價~試驗(yàn)（GIVT16886J-20114SO10993-1：2009.IDT）

GB/T168S6.4醫(yī)療器械生物卞評價第4部分:與血液相互作川試驗(yàn)選擇（GB/T16886.4-2003,ISO109934：2002,IDT）

3術(shù)語和定義

GB/T16886.LGB/T16886.4界定的術(shù)語和定義適用于本文件。

4概述

當(dāng)醫(yī)療器械/材料與人血接觸時液中的血小板可能會粘附在醫(yī)療器械/材枓的表而并發(fā)生潛在的激活反應(yīng)。醫(yī)療器械/材料與血液接觸液十的血小板數(shù)黽發(fā)生顯著降低吋，表叫血小板發(fā)生了粘附和激活自勾誘導(dǎo)體內(nèi)血栓形成相關(guān)，

5試劑和材料

5J試劑

5兒1適用十rtn液分析儀校準(zhǔn)的質(zhì)控品或其他參照品。

5.1.2新鮮健康抗凝人全血。

注：K驗(yàn)結(jié)束&xd仉液及血液接觸.G的物品按梠關(guān)規(guī)定進(jìn)行處理。

5.1-3EDTA鹽溶液〔分析純〉.500mmd/U

5.L4 0+9%氯化鈉注射液，供選擇。

5丄5CaCl」溶液（氯化鈣，分析純）」_1/L。

5.1,6肝崠鈉或肝素鋰溶液.200U/m]^

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5.2試驗(yàn)對照

521陰性對照[例如：高密度聚乙烯（HDPE）:。

5.2.2陽性對照（例如：黑橡膠或玻璃、rw橡膠、天然橡膠）。

5+2+3空白對照（未接觸材料的Ifll液）。

5+2+4對照樣品（已合法丄市的同類醫(yī)療器械）。供選擇。

注：使川者竹對所選抒試驗(yàn)xl照的適川性進(jìn)行確認(rèn)。

6儀器和試驗(yàn)器具

6J血液分析儀，叫用T全血計數(shù)。

6.2帶蓋試管、如試管的材料是促血栓形成的，則會對試驗(yàn)產(chǎn)T:潛在的干擾＜如玻璃）。因此.推薦使用聚乙烯或聚丙烯材質(zhì)試管。

6+3Ifll液采集管■含3-2%（0.109mol/L）枸櫞酸鈉。

6.4水浴搖床，（37丄l）r,

6.5移液管（非玻璃管7樣品制備

制備試驗(yàn)樣品、陰性對照、陽性對照和對照樣品（如選擇），各平行3份。推薦按12的樣品或材料和ImL血液接觸的比例制備置于試管中，樣品或材料宜剪碎以保證血液完全覆蓋試驗(yàn)樣品。空A對照同時平行制備3份。

注：如采川It他體積的血液，則忭品總表Ifli積1血液體積之比ft保持在12cm2:1mU如采川其他模擬臨床使川或能對潛樸危古進(jìn)行適'「1測的比例，應(yīng)OBT說叫并IfJ述理由、

8試驗(yàn)前準(zhǔn)備

8.1初始化血液分析儀并進(jìn)行自檢P備用。在分析樣本前，立確認(rèn)該分析儀的功能的適用性。8.2新鮮抗凝人全血.顛倒混勻后置十冰上保存?zhèn)溆谩?/p>

8+3推薦對血液進(jìn)行預(yù)篩以確保仉液參數(shù)落在適竹的il:常成人血小板計數(shù)范圍內(nèi)。如供血的血液參數(shù)落在適宜范圍外.宜選川其他供血者。

9試驗(yàn)步驟

9+1按每1niL[fit液中加人0.01mL氯化鈣溶液的比例.在抗凝Ifll液屮加人適量氣化鈣溶液，使其終濃度為10mmol/L.再加人適量的低濃度肝素鈉或肝素鋰滸液。

注：推打的肝素銪或腫素鋰溶液的終濃度范W為0.5U/rnL?2U/mL.使川者*對肝素鈉或肝素鋰的終濃度的述仃性進(jìn)行驗(yàn)iiL

9+2將試驗(yàn)樣品、陰性對照、陽忡對照和對照樣品（如選擇）放人試管中，按12 的樣品或材料和

1m.L血液接觸的比例在每支試管屮加人按9.1步驟調(diào)整后的全I(xiàn)IU。空白對照為未接觸材料的NIL液。可選押在接觸血液rilW相同比例的19%氯化鈉注射液預(yù)濕每一試管中的材料.室溫靜置30s.加人lfl[_液前移除所有0.9%氯化鈉注射液D

9+3所有試管在（37—1）X：的水浴十振蕩孵育（60+G）minJ￡R的轉(zhuǎn)速為60r/minD

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9.4孵育1h后，每個試管中加人終濃度為5mmol/L的EDTA來終止反應(yīng)。通常足存:LOmL的人全血十加人0川mL的EDTA（500mmol/L）來達(dá)到迠宜的終濃度。

9.5輕輕混合每一試管?轉(zhuǎn)移全部血液至另一相應(yīng)標(biāo)記的試管中.冰上放置備用。9+6每-試管至少輕轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)和倒S混合S次后放人ifk液分析儀檢測D亜復(fù)操作立至所有樣本完成檢測。

10結(jié)果計算

10.1分別計算3管試驗(yàn)樣品、陰性對照、陽忭對照、空A對照和對照樣W（如選擇）的血小板計數(shù)平均值。

10.2試驗(yàn)樣品、陰性對照和陽性對照計數(shù)的平均值除以空A對照的平均值或?qū)φ諛悠罚ㄈ邕x擇）的平均值。桉式（1〉計算弓空A対照或?qū)φ諛悠罚ㄈ邕x擇）的可分比：

aC=^X100% （1）

式中：

C——試驗(yàn)樣品與空A對照/對照樣品（如選擇）相比的百分比

A—試驗(yàn)樣品血小板計數(shù)平均值；

b——空n對照/對照樣品（如選擇）的血小板計數(shù)平均值、

11試驗(yàn)有效性

11.1空門對照、陰性對照、陽性對照、試驗(yàn)樣品和對照樣品（如選擇）的3個讀數(shù)的每一個值應(yīng)在（讀數(shù)均值+20%）區(qū)間內(nèi)。如該條件不滿足、則應(yīng)取新鮮血s復(fù)試驗(yàn)。

11.2陰性對照的血小板讀數(shù)的接受準(zhǔn)則應(yīng)在空ft對照的80%?120%范闈內(nèi)。ra性對照的血小板值與空白對照相比的百分?jǐn)?shù)值應(yīng)小于50%.

12結(jié)果評價

12.1因?yàn)樯腥狈y(tǒng)一的可接受標(biāo)準(zhǔn)，H此建議將檢測數(shù)據(jù)1上市器械或其他適ft材料的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。

12.2所初牛物材料都有可能對所接觸的血液巾血小板產(chǎn)生影響。5屮物材料接觸的血液中化小板的?_著性降低可能預(yù)示著血小板的激活。

12.3當(dāng)樣品的血小板計數(shù)值落在明性對照值和陽性對照值之間吋（如、在空白對照血小板計數(shù)值的50%?80%范圍內(nèi)■^苜進(jìn)行附加的評價。

6loc\ll「6sL1/AA

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參考文獻(xiàn)

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