上海交通大學遺傳學下午3組果蠅實驗

1、我們畢業(yè)啦,其,實,是,答,辯,的,標,題,地,方,果蠅雜交實驗,匯,報,小,組,成,員,呂,雪,瑩,吳,張,寬,玉,徐,軻,鄭,增,勝,日,期,2,0,1,6,年,3,月,2,4,日,實驗目的,實驗背景,實驗材料,CONTANTS,目錄,實驗方法,實驗原理,實驗目的,It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of,wisdom, it was the age of foolishness.,實,驗,目,的,實,驗,背,景,實,驗,材,料,實,驗,原,理,驗證基因連鎖與交換規(guī)律并計算重組值,驗證基因伴

2、性遺傳的規(guī)律,實,驗,方,法,通過果蠅紅眼野生型和白眼突變型遺傳雜交實驗，了解由性染色,體上基因所控制性狀的分離規(guī)律，以及伴性遺傳在正反交中的差異。,利用果蠅性染色體上已知的基因進行三點測驗，驗證連鎖遺傳規(guī),律；練習基因定位和繪制連鎖遺傳圖的方法。,實驗背景,It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of,wisdom, it was the age of foolishness.,實,驗,目,的,實,驗,背,景,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,方,法,伴性遺傳,1910,年,5,月誕生了白眼

3、雄性果蠅,摩爾根的果蠅實驗,同一只正常的紅眼雌蠅交配,子一代全是紅眼,子二代中的紅、白果蠅的比例正好是,3,：,1,，,子二代的白眼果蠅全是雄性,實,驗,目,的,實,驗,背,景,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,方,法,連鎖交換定律,小翅基因一樣位于,X,染色體,，子二代出,現(xiàn)了一些白眼正常翅和紅眼小翅的類型,摩爾根的果蠅實驗,建立了遺傳學的第三定律連鎖交換定律,1933,年，摩爾根獲得諾貝爾生理醫(yī)學獎,奠定了染色體遺傳機制理論,創(chuàng)立的基因學說,實驗材料,It was the best of times, it was the worst of times; it was the age

4、 of,wisdom, it was the age of foolishness.,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,果蠅（,fruit fly,）：,雙翅目（,Diptera,）昆蟲，,果蠅屬（,genus Drosophila,），約有,2500,個種。,本實驗：突變型（白眼、小翅、卷剛毛）雌果蠅,野生型（紅眼、長翅、直剛毛）雄果蠅,突變型（白眼）雄果蠅,野生型（紅眼）純和雌果蠅,實,驗,方,法,僅四條染色體,形態(tài)突變，對比明顯,果蠅的生活史,果蠅的生活周期長短與溫度有密切關系。一般來,說，30以上溫度能使果蠅不育或死亡，低溫能,使生活周期延長，生活力下降，

5、飼養(yǎng)果蠅的最適,溫度為,20,25。,卵（,embryo,）,幼蟲（,instar,larva,）,蛹（,pupa,）,成蟲（,adult,）,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,實驗原理,It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of,wisdom, it was the age of foolishness.,伴性遺傳,果蠅屬,XY,型生物，共有四對染色體，第一對為性染色體，其余三,對為常染色體。雌果蠅的性染色體構型為,XX,，雄果蠅為,XY,。,控制果

6、蠅眼色的基因位于,X,染色體上，在,Y,染色體則沒有與之相應,的等位基因。將紅眼（,+,）果蠅和白眼（,w,）果蠅雜交，其后代眼,色的表現(xiàn)與性別有關。而且，正反交的結果不同。,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,連鎖與交換,連鎖是指在同一同源染色體上的非等位基因連在一起而遺傳的現(xiàn)象。,連鎖基因在形成配子時，隨同源染色體非姊妹染色體單體之間發(fā)生交換而,交換，產(chǎn)生一定頻度的重組型配子，在子代中表現(xiàn)一定比例的重組性狀，,通過觀察和統(tǒng)計測交子代各種表型的個體數(shù)，可估算出連鎖基因間的交換,率，由此確定基因在染色體上的相對位置，繪制出連鎖遺傳圖。,實,驗,材,料

7、,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,實驗技術流程,親本的純種培養(yǎng),雜交親本的確定,確定雜交的遺傳式,后代的性狀觀察與記錄,實驗結果的分析與討論,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,實驗方法,It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of,wisdom, it was the age of foolishness.,1,親本飼養(yǎng)瓶的準備,果蠅以酵母菌為食，常采用發(fā)酵的培養(yǎng)基繁殖酵母,菌來飼養(yǎng)果蠅。培養(yǎng)基常用玉米粉、米粉或香蕉配,置

8、，本實驗采用玉米培養(yǎng)基，配方如下：,成份（,100ml,果蠅培養(yǎng)基）,水,80ml,玉米粉,8.25g,糖,6.2g,瓊脂,0.62g,丙酸,0.65ml,酵母,少許,親本的純培養(yǎng),實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,培養(yǎng)基配置裝瓶：,1.,溶解瓊脂和糖，煮玉米粉,2.,合到一起煮沸，再加入丙酸，,3.,充分攪拌后再分裝到指管培養(yǎng)瓶中。,4.,培養(yǎng)基冷卻后，在培養(yǎng)基表面撒上一層酵母粉，飼,養(yǎng)瓶準備完畢。,（飼養(yǎng)瓶：指管,瓶塞：紗布包的棉花球,分裝前將飼養(yǎng)瓶、棉塞等用品都要高壓蒸汽滅菌）,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,

9、實,驗,方,法,果蠅的麻醉與轉瓶,第一天，將兩個品系的雌雄果蠅用乙醚麻醉后進行挑選，,其中在野生型中挑出,3-4,對，突變型中挑出,7-8,對，分別培,養(yǎng)，,25,培養(yǎng),8,天。,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,伴性遺傳觀察,親本處女蠅的挑選,2,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,1.,雌蠅孵出后,12,小時內(nèi)不會交配，在這個時間段內(nèi)收集到的雌蠅,就是處女蠅。,2.,在突變型中挑出,7-8,對，,25,培養(yǎng),8,天，第八天開始每天中午,12,：,00,觀察記錄果蠅的情況，在觀察到發(fā)黑的蛹時，將成蠅全,

10、部趕去，,24,小時內(nèi)出來的雌蠅基本上是處女蠅。,F1,代性狀的觀察記錄及統(tǒng)計,F2,代性狀的觀察記錄與統(tǒng)計,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,累計到,3-4,只后，放入野生型（紅眼、長翅、直剛毛）雄果蠅選,擇體型較大的健康個體。,從,F1,代中收集,30,對果蠅，轉移至,3,個新的培養(yǎng)瓶中，每瓶,10,對在,25,繼續(xù)培養(yǎng)。,8,天后，麻醉子一代果蠅，棄去。新生長的果蠅,是子二代果蠅，觀察性狀并記錄。,反交實驗,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,取突變型（白眼）雄性與野生型（紅眼純合）雌性作為親本，重,復上述步驟，進行反交實驗,連鎖與交換的觀察,3,實,驗,材,料,實,驗,原,理,實,驗,背,景,實,驗,目,的,實,驗,方,法,對正交實驗中的,F2,代果蠅進一步觀察性狀，確定翅長、剛毛兩個,性狀的數(shù)目與比例，與眼色的數(shù)據(jù)匯總，用所得數(shù)據(jù)計算交換率。,至少觀察,100,只。,果