血液SOP文件[特選參考]

1、血液實(shí)驗(yàn)室作業(yè)指導(dǎo)書 河北省張家口市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科編制： 審核： 批準(zhǔn)： 河北省張家口市第二醫(yī)院凝血酶原時(shí)間-纖維蛋白原（PT-FIB）測定1. 實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)可同時(shí)測定凝血酶原時(shí)間（PT）和纖維蛋白原（FIB）濃度。原理：確定量的抗凝血漿（50微升）樣本經(jīng)一定時(shí)間加溫后，將組織凝血活酶、鈣離子加入其中，激活外源凝血途徑，產(chǎn)生纖維蛋白血凝塊，通過660nm光照射血漿，測定其凝固過程中90o散射光變化，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出凝血酶原時(shí)間，再通過參數(shù)計(jì)算得出凝血酶原活動度及INR值。在檢測PT的同時(shí)，血漿濁度的變化與血漿中FIB的含量成正相關(guān)，通過測定凝固終點(diǎn)和起始點(diǎn)光散射強(qiáng)度的差值，再根據(jù)試驗(yàn)前已

2、經(jīng)做出的由不同已知FIB濃度與相應(yīng)的光散射差值關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可推測出FIB的濃度。2. 標(biāo)本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右)，靜脈采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml，混勻。3. 標(biāo)本存放：全血貯存在410oC不超過2小時(shí)，最好1小時(shí)內(nèi)(3000r/min15min)分離血漿，此血漿在室溫2224oC下可存放2小時(shí)，在24oC可存放4小時(shí)，在-20oC可存放2周，長時(shí)間保存需在冰凍條件下，在-70oC可存放6個(gè)月。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛血漿的容器置37oC水浴中，并輕輕搖動，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解凍后立即測試。冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍，否

3、則結(jié)果不準(zhǔn)確。4. 標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5. 標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合，采血量不準(zhǔn)確，凝固，溶血，脂血標(biāo)本不能作測定。6. 實(shí)驗(yàn)材料：6.1每個(gè)試劑均購自德國Dade Behring Marburg公司。1）PT-FIB測定試劑盒（代號P/N: 84688210）兔腦促凝血激酶10mL X8瓶2）定標(biāo)血漿Calibration Plasma（代號P/N:20003700）3）參比液 Reference Emulsion（代號P/N:9756900）4）因子稀釋液 Factor diluent（代號P/N: 9757600） 5）正常質(zhì)控血漿Normal control plasma（

4、代號P/N:20003110）6）低水平質(zhì)控血漿Abnormal control plasma level I/Low（代號P/N: 20003210）7）高水平質(zhì)控血漿Abnormal control plasma level II/High（代號P/N: 20003310）注：促凝血酶原激酶當(dāng)用不同的促凝血酶原激酶，或用不同的檢測方法（手工、半自動、全自動）做PT測試時(shí)，其秒數(shù)結(jié)果將會有較顯著的差異。而對于口服抗凝藥的病人來說，需要一個(gè)能進(jìn)行比較的PT結(jié)果。國際血液血標(biāo)準(zhǔn)委員會（ICSH）及國際血栓與止血委員會（ICTH）建議，根據(jù)試劑的ISI值（國際敏感度指數(shù)）計(jì)算INR值（國際標(biāo)準(zhǔn)化比

5、值），并以INR值作為PT的通用結(jié)果報(bào)告。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)及文獻(xiàn)報(bào)道，試劑的靈敏度一手測試方法及機(jī)器自動化程度的影響。但美國貝克曼庫爾特公司提供的PT-FIB試劑，每一批號都經(jīng)過了嚴(yán)格的測試，與ICSH及ICTH的參考品有很好的相關(guān)性，其ISI值均注明在試劑盒說明書中。在ACL7000上，當(dāng)輸入試劑的ISI值后，機(jī)器會自動給出INR值。INR=(PT Ratio) ISI6.2試劑準(zhǔn)備用8mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水溶解1瓶促凝血激酶，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。6.3試劑保存未開封的試劑可保存在28 oC至試劑盒上標(biāo)明的有效期。試劑溶解后，于

6、原瓶中28 oC，3天內(nèi)有效；在ACL7000上（15oC），8小時(shí)有效。建議試劑不使用時(shí)，最好將其倒回原瓶中，保存于28 oC。7. 儀器設(shè)備：7.1 儀器名稱：syxmex CA7000全自動血凝儀 7.2 儀器廠家：日本希森美康公司7.3 儀器型號：CA70007.4 儀器技術(shù)參數(shù)：7.4.1 試劑位：18個(gè)，具冷藏功能。7.4.2 樣本位：40個(gè)，可通過換盤連續(xù)添加。7.5 儀器校準(zhǔn)程序：7.5.1 校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑型號改變，儀器維修影響測定結(jié)果等情況時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2 校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)。8. 操作步驟：8.1 開機(jī)

7、：CA7000的開關(guān)在儀器的右側(cè)。開機(jī)后儀器自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示Ready時(shí)可進(jìn)行試檢8.2洗針：在主屏幕上選Rinse Probe鍵，然后按Execute進(jìn)行洗針8.3 檢查消耗品：1.準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。2.準(zhǔn)備試劑：按照儀器對試劑的要求，把每一項(xiàng)的試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示位置放置試劑。注意：共三個(gè)位置放清洗液。3.查看儀器的洗液瓶和廢液瓶8.4 準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本離心好，放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。8.5 輸入

8、檢測項(xiàng)目：主菜單上的按下Work list鍵，進(jìn)入工作菜單。輸入項(xiàng)目，直接點(diǎn)擊相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目鍵重復(fù)：按屏幕下菜單的REPEAT鍵，在屏幕彈出的鍵盤上輸入相應(yīng)測試數(shù)，儀器會自動重復(fù)與光標(biāo)所在位置相同的測試信息。輸入樣本號：按屏幕下菜單的ID NO.Entry按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。開始檢測：錄入完所有測試信息，按下屏幕右上角START鍵，開始檢測查看結(jié)果：返回到主屏幕， 檢測的項(xiàng)目如果由變成表明此試驗(yàn)已經(jīng)完成。按下Stored Date鍵，出現(xiàn)已存儲結(jié)果界面，屏幕顯示已完成的測試的信息。如果查看反應(yīng)曲線，按下邊菜單第一項(xiàng)Gragph查看凝集趨勢、吸光度、錯(cuò)誤信息等。8.6 洗針：當(dāng)做

9、完一批標(biāo)本后，需要洗針，按下Rinse Probe然后按下Execute進(jìn)行洗針8.7 關(guān)機(jī)：回到主屏幕下，在洗完針后方可關(guān)機(jī)，切斷電源，同時(shí)關(guān)閉壓力泵和總電源。9. 檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析：9.1 儀器測定PT的線性范圍在5-600秒，測定完成后儀器顯示PT秒數(shù)、PT活動度、INR值等參數(shù)。若不能對參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算，將出現(xiàn)下列信息：.出現(xiàn)錯(cuò)誤，不能得到分析數(shù)據(jù).不能計(jì)算參數(shù).數(shù)值超出線性范圍.9.2 儀器設(shè)定PT參考范圍在10-14秒，如果得不到一個(gè)正常數(shù)值，在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記： 出現(xiàn)錯(cuò)誤信息 數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限10. 質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測定兩個(gè)濃度水平(正常值和高值)的質(zhì)控品，

10、以2S為警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)建立自己的質(zhì)控均值和SD值以檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。至少每8小時(shí)做一次質(zhì)控分析。用Westgard等方法進(jìn)行質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的分析和處理，評定質(zhì)量情況。請參考CA7000全自動血凝儀操作手冊。 11. 臨床意義：PT是用于篩查外源性凝血系統(tǒng)（、）及口服抗凝藥物劑量（如華發(fā)令、雙香豆素等）的檢測項(xiàng)目。11.1 參考范圍：秒數(shù)S：12-16 S（患者結(jié)果超過正常對照35以上有臨床意義）活動度：80-120國際標(biāo)準(zhǔn)化比值INR：0.8-1.511.2 PT延長：見于先天性凝血因子、缺乏；低（無）纖維蛋白原血癥；獲得性見于急性DIC消耗性低凝期、原發(fā)

11、性纖溶癥、維生素K缺乏、廣泛而嚴(yán)重的肝臟實(shí)質(zhì)性損傷（如急性重癥肝炎及肝硬化）、血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)（如口服抗凝劑、肝素）。11.3 PT縮短：見于先天性凝血因子V增多、口服避孕藥、高凝狀態(tài)（DIC早期、急性心肌硬塞等）、血栓性疾?。X血栓形成、急性血栓性靜脈炎）、多發(fā)性骨髓瘤、洋地黃中毒、乙醚麻醉后。11.4 監(jiān)測口服抗凝藥（如華發(fā)令、雙香豆素等）的重要指標(biāo)。一般要求：PT(S)：18-24 S INR：2.5-3.5，不同疾病不同值。口服抗凝劑“華發(fā)令”，預(yù)期值約為參考植的2倍，PT活動度參考值為75%-120%，降低到40%可能有出血傾向。12. 變異的潛在來源12.1 抗凝劑：草酸鹽、ED

12、TA、肝素不適用于PT檢查12.2 標(biāo)本采集處理不當(dāng)，如血與抗凝劑未充分混勻，出現(xiàn)凝塊，混勻時(shí)過分用力，使標(biāo)本溶血，造成結(jié)果變異。12.3 纖溶藥物的影響，如雙香豆素、鏈激酶、尿酶等。12.4 超劑量使用肝素使凝固時(shí)間延長。12.5 FDP增加使凝固時(shí)間延長。12.6 某些藥物，如口服避孕藥、雌激素、天門冬酰胺酶、鈉絡(luò)酮等影響測試結(jié)果。12.7血漿中下列物質(zhì)低于指定濃度時(shí)對結(jié)果無影響。游離血紅蛋白 膽紅素 甘油三脂 肝 素PT 100mg/dl 15mg/dl 700mg/dl 0.5U/mlFIB 100mg/dl 1 5mg/dl 700mg/dl 1.0U/mlFDP對PT-FIB的影響

13、比對FIB-Clauss法小。13. 操作注意事項(xiàng)：干粉試劑及質(zhì)控血漿溶解13.1 確認(rèn)溶劑類型，一般溶解液包括：蒸餾水、生理鹽水、緩沖液、廠家特定溶解液，必須按說明書要求使用。13.2 溶解時(shí)，輕輕轉(zhuǎn)動容器，保證干粉完全溶解，避免劇烈振蕩。14. 儀器維護(hù)與保養(yǎng)14.1 每日保養(yǎng)：14.1.1開機(jī)前觀察樣品參比液液面，看是否夠做測定。14.1.2 注意檢查液面水平并倒空廢液瓶，確保廢液能順利流入廢液瓶。14.1.3讓開關(guān)機(jī)盡量減少到最少。14.1.4 檢查廢反應(yīng)盤杯，必要時(shí)倒空廢反應(yīng)盤杯。14.1.5在每天工作前和工作后，執(zhí)行沖洗程序：按“PROG”，顯示應(yīng)用菜單，選擇“PRIMING”，按

14、“ENTER”確認(rèn)。14.2每周保養(yǎng)14.2.1清潔儀器表面，標(biāo)本區(qū)域內(nèi)壁和分析腔。14.2.2進(jìn)入清潔程序清潔吸樣針14.2.3清潔沖洗/廢液池。14.3每月保養(yǎng)清潔空氣過濾網(wǎng)14.4根據(jù)需要14.4.1清潔廢液管路14.4.2清潔溢出的樣本14.4.3更換吸樣針組件14.4.4調(diào)整吸樣針位置14.4.5對吸樣針/試劑針排污處理15. 參考文獻(xiàn)15.1 葉應(yīng)嫵.王毓三等全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版，東南大學(xué)出版社.15.2CA7000全自動血凝儀操作手冊活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）測定1. 實(shí)驗(yàn)原理將試劑加入抗凝血漿中，試劑中的微粒硅膠是血小板因子3的表面活性劑，與牛腦磷脂一同作用于內(nèi)源凝

15、血系統(tǒng)，當(dāng)加入CaCl2后，開始凝集，產(chǎn)生纖維蛋白血凝塊，通過660nm光照射血漿，凝血過程中血漿的混濁度可以通過測量散射光光強(qiáng)度的改變來測定，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出活化部分凝血活酶時(shí)間。2. 標(biāo)本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右)，靜脈采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml，混勻。3. 標(biāo)本存放：全血貯存在410oC不超過2小時(shí)，最好1小時(shí)內(nèi)(3000r/min15min)分離血漿，此血漿在室溫2224oC下可存放2小時(shí)，在24oC可存放4小時(shí)，在-20oC可存放2周，長時(shí)間保存需在冰凍條件下，在-70oC可存放6個(gè)月。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛血漿的容器置3

16、7oC水浴中，并輕輕搖動，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解凍后立即測試。冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍，否則結(jié)果不準(zhǔn)確。4. 標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5. 標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合，采血量不準(zhǔn)確，凝固，溶血，脂血標(biāo)本不能作該項(xiàng)目檢測。6. 實(shí)驗(yàn)材料：6.1每個(gè)試劑均購自德國Dade Behring Marburg公司。1）APTT測定試劑盒（代號P/N: 8468710）凍干腦磷脂5瓶CaCl25瓶(25mmol/L)2）定標(biāo)血漿Calibration Plasma（代號P/N: 20003700）3）正常質(zhì)控血漿Normal control plasma（代號P/N: 20003110）4

17、）低水平質(zhì)控血漿Abnormal control plasma level I/Low（代號P/N: 20003210）5）高水平質(zhì)控血漿Abnormal control plasma level II/High（代號P/N: 20003310）6）因子稀釋液（代號P/N:9757600）6.2試劑準(zhǔn)備用9mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水溶解1瓶凍干腦磷脂，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。6.3試劑保存未開封的試劑可保存在28 oC至試劑盒上標(biāo)明的有效期。腦磷脂：試劑溶解后，于原瓶中2-8 oC，7天內(nèi)有效；在ACL9000（15oC），8小時(shí)

18、有效。CaCl2：于原瓶中28 oC，30天內(nèi)有效。建議試劑不使用時(shí)，最好將其倒回原瓶中，保存于28 oC，不要將試劑冷凍。7. 儀器設(shè)備：7.1 儀器名稱：syxmex CA7000全自動血凝儀7.2 儀器廠家：日本西森美康公司7.3 儀器型號：CA70007.4 儀器技術(shù)參數(shù)：7.4.1 試劑位：18個(gè)，具冷藏功能。7.4.2 樣本位：40個(gè)，可通過換盤連續(xù)添加。7.5 儀器校準(zhǔn)程序：7.5.1 校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑型號改變，儀器維修影響測定結(jié)果等情況時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2 校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)。8. 操作步驟：8.1 開機(jī)：CA7

19、000的開關(guān)在儀器的右側(cè)。開機(jī)后儀器自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示Ready時(shí)可進(jìn)行試檢8.2洗針：在主屏幕上選Rinse Probe鍵，然后按Execute進(jìn)行洗針8.3 檢查消耗品：1.準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。2.準(zhǔn)備試劑：按照儀器對試劑的要求，把每一項(xiàng)的試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示位置放置試劑。注意：共三個(gè)位置放清洗液。3.查看儀器的洗液瓶和廢液瓶8.4 準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本離心好，放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。8.5 輸入檢測項(xiàng)目

20、：主菜單上的按下Work list鍵，進(jìn)入工作菜單。輸入項(xiàng)目，直接點(diǎn)擊相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目鍵重復(fù)：按屏幕下菜單的REPEAT鍵，在屏幕彈出的鍵盤上輸入相應(yīng)測試數(shù)，儀器會自動重復(fù)與光標(biāo)所在位置相同的測試信息。輸入樣本號：按屏幕下菜單的ID NO.Entry按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。開始檢測：錄入完所有測試信息，按下屏幕右上角START鍵，開始檢測查看結(jié)果：返回到主屏幕， 檢測的項(xiàng)目如果由變成表明此試驗(yàn)已經(jīng)完成。按下Stored Date鍵，出現(xiàn)已存儲結(jié)果界面，屏幕顯示已完成的測試的信息。如果查看反應(yīng)曲線，按下邊菜單第一項(xiàng)Gragph查看凝集趨勢、吸光度、錯(cuò)誤信息等。8.6 洗針：當(dāng)做完一批標(biāo)

21、本后，需要洗針，按下Rinse Probe然后按下Execute進(jìn)行洗針8.7 關(guān)機(jī)：回到主屏幕下，在洗完針后方可關(guān)機(jī)，切斷電源，同時(shí)關(guān)閉壓力泵和總電源。9. 檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析：9.1 儀器測定APTT的線性范圍在5-600秒，測定完成后儀器顯示PT秒數(shù)，若不能對參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算，將出現(xiàn)下列信息：.出現(xiàn)錯(cuò)誤，不能得到分析數(shù)據(jù).不能計(jì)算參數(shù).數(shù)值超出線性范圍.9.2 儀器設(shè)定APTT參考范圍在24-36秒，如果得不到一個(gè)正常數(shù)值，在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記： 出現(xiàn)錯(cuò)誤信息 數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限10. 質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測定三個(gè)濃度水平(正常值低值和高值)的質(zhì)控品，以2S為警告限，3S為失

22、控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)建立自己的質(zhì)控均值和SD值以檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。至少每8小時(shí)做一次質(zhì)控分析。用Westgard等方法進(jìn)行質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的分析和處理，評定質(zhì)量情況。請參考CA7000全自動血凝儀操作手冊。 11. 臨床意義：APTT常用于內(nèi)源性凝血系統(tǒng)（、因子）的篩選及肝素抗凝治療的監(jiān)測。11.1參考范圍：24-36秒（患者結(jié)果超過正常對照10秒以上為異常）11.2 APTT延長：見過先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接觸因子、缺乏、VWF等）；多種凝血因子缺乏（如嚴(yán)重肝病、維生素K缺乏、DIC、纖溶亢進(jìn)等）；血液中有抗凝物質(zhì)存在。11.3 APTT縮短：見于凝血因子、活性增

23、高、血小板增多癥高凝狀態(tài)：DIC高凝期、不穩(wěn)定性心絞痛、腦血管病變、糖尿病血管病變、腦梗塞、深靜脈血栓、妊趁高血壓綜合癥和腎炎綜合癥，靜脈穿刺不順利混入組織液。11.4 是監(jiān)測肝素治療的首選指標(biāo)：肝素抗凝治療中APTT的預(yù)算期為正常值的1.5-2.5倍。12. 變異的潛在來源12.1 抗凝劑：草酸鹽、EDTA、肝素不適用于PT檢查。12.2 標(biāo)本采集處理不當(dāng)，如血與抗凝劑未充分混勻，出現(xiàn)凝塊，混勻時(shí)過分用力使標(biāo)本溶血，造成結(jié)果變異。12.3 纖溶藥物的影響（如雙香豆素、鏈激酶、尿酶等），超劑量使用肝素。12.4 FDP增加使凝固時(shí)間延長。12.5 某些藥物的影響（如口服避孕藥、雌激素、天門冬酰

24、胺酶、鈉絡(luò)酮等）。12.6血漿中下列物質(zhì)低于指定濃度時(shí)對結(jié)果無影響。游離血紅蛋白 膽紅素 甘油三脂APTT 100mg/dl 15mg/dl 700mg/dl13. 操作注意事項(xiàng)：干粉試劑及質(zhì)控血漿溶解13.1 確認(rèn)溶劑類型，一般溶解液包括：蒸餾水、生理鹽水、緩沖液、廠家特定溶解液，必須按說明書要求使用。13.2 溶解時(shí)，輕輕轉(zhuǎn)動容器，保證干粉完全溶解，避免劇烈振蕩。14. 儀器維護(hù)與保養(yǎng)14.1 每日保養(yǎng)：14.1.1開機(jī)前觀察樣品參比液液面，看是否夠做測定。14.1.2 注意檢查液面水平并倒空廢液瓶，確保廢液能順利流入廢液瓶。14.1.3讓開關(guān)機(jī)盡量減少到最少。14.1.4 檢查廢反應(yīng)盤杯

25、，必要時(shí)倒空廢反應(yīng)盤杯。14.1.5在每天工作前和工作后，執(zhí)行沖洗程序：按“PROG”，顯示應(yīng)用菜單，選擇“PRIMING”，按“ENTER”確認(rèn)。14.2每周保養(yǎng)14.2.1清潔儀器表面，標(biāo)本區(qū)域內(nèi)壁和分析腔。14.2.2進(jìn)入清潔程序清潔吸樣針14.2.3清潔沖洗/廢液池。14.3每月保養(yǎng)清潔空氣過濾網(wǎng)14.4根據(jù)需要14.4.1清潔廢液管路14.4.2清潔溢出的樣本14.4.3更換吸樣針組件14.4.4調(diào)整吸樣針位置14.4.5對吸樣針/試劑針排污處理15. 參考文獻(xiàn)15.1 葉應(yīng)嫵.王毓三等全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版，東南大學(xué)出版社.15.2 CA7000全自動血凝儀操作手冊凝血酶時(shí)間（

26、TT）測定1. 實(shí)驗(yàn)原理將試劑加入抗凝血漿中，試劑中的牛凝血酶可直接作用血漿中的纖維蛋白原生成纖維蛋白凝塊，通過660nm光照射血漿，凝血過程中血漿的混濁度可以通過測量散射光光強(qiáng)度的改變來測定，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出凝血酶時(shí)間。2. 標(biāo)本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右),靜脈采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml,混勻。3. 標(biāo)本存放：全血貯存在410oC不超過2小時(shí)，最好1小時(shí)內(nèi)(3000r/min15min)分離血漿，此血漿在室溫2224oC下可存放2小時(shí)，在24oC可存放4小時(shí)，在-20oC可存放2周，長時(shí)間保存需在冰凍條件下，在-70oC可存放6個(gè)

27、月。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛血漿的容器置37oC水浴中，并輕輕搖動，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解凍后立即測試。冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍，否則結(jié)果不準(zhǔn)確。4. 標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5. 標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合,采血量不準(zhǔn)確,凝固,溶血,脂血標(biāo)本不能作測定。6. 實(shí)驗(yàn)材料：6.1每個(gè)試劑均購自德國Dade Behring Marburg公司。1）TT測定試劑盒（代號P/N: 9758515）凍干牛凝血酶（含緩沖液和穩(wěn)定劑）4瓶濃縮稀釋液（含CaCl2500mmol/L、緩沖液、防腐劑）1瓶注意：稀釋液中含有疊氮鈉，在金屬鉛制品中可形成爆炸性疊氮化物，應(yīng)適當(dāng)處理。2）定標(biāo)血漿Cali

28、bration Plasma（代號P/N: 20003700）3）正常質(zhì)控血漿Normal control plasma（代號P/N: 20003110）6.2試劑準(zhǔn)備濃縮稀釋液：用蒸餾水1：5（1+4）稀釋濃縮的稀釋液。凍干牛凝血酶：根據(jù)樣品來源和分析需要來制備。稀釋好的稀釋液/1瓶凝血酶濃度篩選實(shí)驗(yàn)5.0ml3.0uNIH/ml8.0ml1.9uNIH/ml肝素治療2.0ml7.5uNIH/ml蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。6.3試劑保存未開封的試劑可保存在28 oC至試劑盒上標(biāo)明的有效期。稀釋好的稀釋液在1525oC可保存1個(gè)月；牛凝血酶溶解后，

29、于原瓶中28 oC，15天內(nèi)有效建議試劑不使用時(shí)，最好將其倒回原瓶中，保存于28 oC。7. 儀器設(shè)備：7.1 儀器名稱： syxmex CA7000全自動血凝儀 7.2 儀器廠家：日本希森美康公司7.3 儀器型號：CA70007.4 儀器技術(shù)參數(shù)：7.4.1 試劑位：18個(gè)，具冷藏功能。7.4.2 樣本位：40個(gè)，可通過換盤連續(xù)添加。7.5 儀器校準(zhǔn)程序：7.5.1 校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑型號改變，儀器維修影響測定結(jié)果等情況時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2 校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)。8. 操作步驟：8.1 開機(jī)：CA7000的開關(guān)在儀器的右側(cè)。開機(jī)后

30、儀器自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示Ready時(shí)可進(jìn)行試檢8.2洗針：在主屏幕上選Rinse Probe鍵，然后按Execute進(jìn)行洗針8.3 檢查消耗品：1.準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。2.準(zhǔn)備試劑：按照儀器對試劑的要求，把每一項(xiàng)的試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示位置放置試劑。注意：共三個(gè)位置放清洗液。3.查看儀器的洗液瓶和廢液瓶8.4 準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本離心好，放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。8.5 輸入檢測項(xiàng)目：主菜單上的按下Work lis

31、t鍵，進(jìn)入工作菜單。輸入項(xiàng)目，直接點(diǎn)擊相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目鍵重復(fù)：按屏幕下菜單的REPEAT鍵，在屏幕彈出的鍵盤上輸入相應(yīng)測試數(shù)，儀器會自動重復(fù)與光標(biāo)所在位置相同的測試信息。輸入樣本號：按屏幕下菜單的ID NO.Entry按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。開始檢測：錄入完所有測試信息，按下屏幕右上角START鍵，開始檢測查看結(jié)果：返回到主屏幕， 檢測的項(xiàng)目如果由變成表明此試驗(yàn)已經(jīng)完成。按下Stored Date鍵，出現(xiàn)已存儲結(jié)果界面，屏幕顯示已完成的測試的信息。如果查看反應(yīng)曲線，按下邊菜單第一項(xiàng)Gragph查看凝集趨勢、吸光度、錯(cuò)誤信息等。8.6 洗針：當(dāng)做完一批標(biāo)本后，需要洗針，按下Rinse

32、Probe然后按下Execute進(jìn)行洗針8.7 關(guān)機(jī)：回到主屏幕下，在洗完針后方可關(guān)機(jī)，切斷電源，同時(shí)關(guān)閉壓力泵和總電源。9. 檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析：9.1 儀器測定TT的線性范圍在5-600秒,測定完成后儀器顯示TT秒數(shù)，若不能對參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算,將出現(xiàn)下列信息：.出現(xiàn)錯(cuò)誤,不能得到分析數(shù)據(jù).不能計(jì)算參數(shù).數(shù)值超出線性范圍.9.2 儀器設(shè)定TT參考范圍在11-18秒,如果得不到一個(gè)正常數(shù)值,在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記： 出現(xiàn)錯(cuò)誤信息 數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限10. 質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測定三個(gè)濃度水平(正常值低值和高值)的質(zhì)控品，以2S為警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)

33、室均應(yīng)建立自己的質(zhì)控均值和SD值以檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。至少每8小時(shí)做一次質(zhì)控分析。用Westgard等方法進(jìn)行質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的分析和處理，評定質(zhì)量情況。請參考ACL9000全自動血凝儀操作手冊。 11. 臨床意義： 11.1 參考范圍：11-18秒（不同廠家試劑有不同參考范圍，請參照試劑說明書）11.2 TT延長：患者血循環(huán)中AT-活性明顯增高，肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)存在，如SLE、肝病腎病等；異常纖維蛋白原血癥，低（無）纖維蛋白原血癥（80mg/dl），纖維蛋白原降解物FDP的增加（如DIC纖溶期），異常球蛋白增多（如MM）等。11.3 TT縮短：常見于血樣本有微小凝塊或鈣離子存在及PH呈酸性時(shí)。12

34、. 變異的潛在來源12.1 抗凝劑：草酸鹽、EDTA、肝素不適用于PT檢查12.2 標(biāo)本采集處理不當(dāng),如血與抗凝劑未充分混勻，出現(xiàn)凝塊，混勻時(shí)過分用力，使標(biāo)本溶血，造成結(jié)果變異。12.3 纖溶藥物的影響，如雙香豆素、鏈激酶、尿酶等。12.4 超劑量使用肝素使凝固時(shí)間延長。12.5 FDP增加使凝固時(shí)間延長。12.6 某些藥物，如口服避孕藥、雌激素、天門冬酰胺酶、鈉絡(luò)酮等影響測試結(jié)果。12.6血漿中下列物質(zhì)低于指定濃度時(shí)對結(jié)果無影響。試劑制備 游離血紅蛋白 膽紅素 甘油三脂5ml 500mg/dl 20mg/dl 1000mg/dl8ml 500mg/dl 20mg/dl 500mg/dl2ml

35、 無影響 20mg/dl 1000mg/dl13. 操作注意事項(xiàng)：干粉試劑及質(zhì)控血漿溶解13.1 確認(rèn)溶劑類型，一般溶解液包括：蒸餾水、生理鹽水、緩沖液、廠家特定溶解液，必須按說明書要求使用。13.2 溶解時(shí)，輕輕轉(zhuǎn)動容器，保證干粉完全溶解，避免劇烈振蕩。14. 儀器維護(hù)與保養(yǎng)14.1 每日保養(yǎng)：14.1.1開機(jī)前觀察樣品參比液液面，看是否夠做測定。14.1.2 注意檢查液面水平并倒空廢液瓶，確保廢液能順利流入廢液瓶。14.1.3讓開關(guān)機(jī)盡量減少到最少。14.1.4 檢查廢反應(yīng)盤杯，必要時(shí)倒空廢反應(yīng)盤杯。14.1.5在每天工作前和工作后，執(zhí)行沖洗程序：按“PROG”，顯示應(yīng)用菜單，選擇“PRI

36、MING”，按“ENTER”確認(rèn)。14.2每周保養(yǎng)14.2.1清潔儀器表面，標(biāo)本區(qū)域內(nèi)壁和分析腔。14.2.2進(jìn)入清潔程序清潔吸樣針14.2.3清潔沖洗/廢液池。14.3每月保養(yǎng)清潔空氣過濾網(wǎng)14.4根據(jù)需要14.4.1清潔廢液管路14.4.2清潔溢出的樣本14.4.3更換吸樣針組件14.4.4調(diào)整吸樣針位置14.4.5對吸樣針/試劑針排污處理15. 參考文獻(xiàn)15.1 葉應(yīng)嫵.王毓三等全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版，東南大學(xué)出版社.15.2 CA7000全自動血凝儀操作手冊血漿纖維蛋白原（Fbg）測定1. 實(shí)驗(yàn)原理將試劑加入稀釋的抗凝血漿中，試劑中過量的牛凝血酶可直接作用血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖

37、維蛋白，此反應(yīng)過程的速率即反映了纖維蛋白原的濃度和功能。通過660nm光照射血漿，測定其凝固反應(yīng)的散射濁度變化。2. 標(biāo)本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右)，靜脈采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml，混勻。3. 標(biāo)本存放 全血貯存在410oC不超過2小時(shí)，最好1小時(shí)內(nèi)(3000r/min15min)分離血漿，此血漿在室溫2224oC下可存放2小時(shí)，在24oC可存放4小時(shí)，在-20oC可存放2周，長時(shí)間保存需在冰凍條件下，在-70oC可存放6個(gè)月。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛血漿的容器置37oC水浴中，并輕輕搖動，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解凍后立即測試。

38、冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍，否則結(jié)果不準(zhǔn)確。4. 標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5. 標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合，采血量不準(zhǔn)確，凝固，溶血，脂血標(biāo)本不能作測定。6. 實(shí)驗(yàn)材料：6.1每個(gè)試劑均購自德國Dade Behring Marburg公司。1）FIB-C測定試劑盒（代號P/N:8469110）凍干牛凝血酶（35uNIH/ml）8瓶異常質(zhì)控血漿2瓶2）定標(biāo)血漿Calibration Plasma（代號P/N: 20003700）3）正常質(zhì)控血漿Normal control plasma（代號P/N: 20003110）4）低纖維蛋白原質(zhì)控血漿Low fibrinogen control（代號P

39、/N:20004200）5）因子稀釋液（代號P/N:9757600） 6）清洗液A Cleaning solution（代號P/N:9831700）7）清洗液B Cleaning agent（代號P/N:9832700）6.2試劑準(zhǔn)備牛凝血酶：用2mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水溶解1瓶牛凝血酶，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC 30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。異常質(zhì)控血漿：用1mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水溶解1瓶血漿，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC 30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。6.3試劑保存未開封的試劑可保存在28 oC至試劑盒上標(biāo)明的有效期。試

40、劑溶解后，凝血酶：于原瓶中28 oC，3天內(nèi)有效；于原瓶中-20 oC，1個(gè)月有效；ACL（15oC），3小時(shí)有效。異常質(zhì)控血漿：于原瓶中，1525oC，4小時(shí)有效；-20 oC，7天有效。建議試劑不使用時(shí)，最好將其倒回原瓶中，保存于28 oC。7. 儀器設(shè)備：7.1 儀器名稱：syxmex CA7000全自動血凝儀 7.2 儀器廠家：日本希森美康公司7.3 儀器型號：CA70007.4 儀器技術(shù)參數(shù)：7.4.1 試劑位：18個(gè)，具冷藏功能。7.4.2 樣本位：40個(gè)，可通過換盤連續(xù)添加。7.5 儀器校準(zhǔn)程序：7.5.1 校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑型號改變，儀器維修影響測定結(jié)果等情況

41、時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2 校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)。8. 操作步驟：8.1 開機(jī)：CA7000的開關(guān)在儀器的右側(cè)。開機(jī)后儀器自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示Ready時(shí)可進(jìn)行試檢8.2洗針：在主屏幕上選Rinse Probe鍵，然后按Execute進(jìn)行洗針8.3 檢查消耗品：1.準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。2.準(zhǔn)備試劑：按照儀器對試劑的要求，把每一項(xiàng)的試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示位置放置試劑。注意：共三個(gè)位置放清洗

42、液。3.查看儀器的洗液瓶和廢液瓶8.4 準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本離心好，放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。8.5 輸入檢測項(xiàng)目：主菜單上的按下Work list鍵，進(jìn)入工作菜單。輸入項(xiàng)目，直接點(diǎn)擊相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目鍵重復(fù)：按屏幕下菜單的REPEAT鍵，在屏幕彈出的鍵盤上輸入相應(yīng)測試數(shù)，儀器會自動重復(fù)與光標(biāo)所在位置相同的測試信息。輸入樣本號：按屏幕下菜單的ID NO.Entry按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。開始檢測：錄入完所有測試信息，按下屏幕右上角START鍵，開始檢測查看結(jié)果：返回到主屏幕， 檢測的項(xiàng)目如果由變成表明此試驗(yàn)已經(jīng)完成。按下Stored Date鍵，出現(xiàn)已存儲結(jié)果界面，屏幕顯示已

43、完成的測試的信息。如果查看反應(yīng)曲線，按下邊菜單第一項(xiàng)Gragph查看凝集趨勢、吸光度、錯(cuò)誤信息等。8.6 洗針：當(dāng)做完一批標(biāo)本后，需要洗針，按下Rinse Probe然后按下Execute進(jìn)行洗針8.7 關(guān)機(jī)：回到主屏幕下，在洗完針后方可關(guān)機(jī)，切斷電源，同時(shí)關(guān)閉壓力泵和總電源。9. 檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析：9.1 儀器測定Fbg線性范圍在0.25g/L-10g/L，測定完成儀器將顯示每個(gè)參數(shù)的計(jì)算結(jié)果（包括凝固時(shí)間與Fbg含量g/L），若不能對參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算，將出現(xiàn)下列信息：，出現(xiàn)錯(cuò)誤，不能得到分析數(shù)據(jù)，不能計(jì)算參數(shù)，數(shù)值超出線性范圍.9.2 儀器設(shè)定Fbg參考范圍在2-4g/L，如果得到一個(gè)

44、不正常數(shù)值，在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記： 出現(xiàn)錯(cuò)誤信息 數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限10. 質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測定三個(gè)濃度水平(正常值低值和高值)的質(zhì)控品，以2S為警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)建立自己的質(zhì)控均值和SD值以檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。至少每8小時(shí)做一次質(zhì)控分析。用Westgard等方法進(jìn)行質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的分析和處理，評定質(zhì)量情況。請參考CA7000全自動血凝儀操作手冊。 11. 臨床意義：Fbg是用于判定血栓前狀態(tài)或血栓性疾病的必查項(xiàng)目.11.1 參考范圍： 2-4g/L11.2 Fbg含量增高：高凝狀態(tài)(如糖尿病伴血管病變，急性心肌梗塞，腦血管病變，口服避孕藥，妊娠及

45、其中毒癥，深靜脈血栓形成，動脈粥樣硬化，高血脂癥等);亦見于急性傳染病，急性感染，腎小球疾病活動期，放射治療后，燒傷，休克，外科手術(shù)后，惡性腫瘤，多發(fā)性骨髓瘤等.11.3 Fbg含量減少：肝臟疾病(重癥肝炎，慢性肝炎，肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纖溶期，溶栓治療的監(jiān)測，原發(fā)性纖維蛋白原缺乏癥，原發(fā)性纖溶活性亢進(jìn)，惡性貧血及肺、甲狀腺、子宮、前列腺手術(shù)等.11.4 纖維蛋白原異常：纖維蛋白原異常是一種遺傳疾病，是常染色體顯性遺傳.患者Fbg含量可能在正常范圍，但纖維蛋白原有質(zhì)的異常.主要是Fbg分子的一個(gè)多態(tài)上出現(xiàn)一個(gè)異常氨基酸，臨床上可無癥狀或有輕度出血傾向.12. 變異的潛在來源12.

46、1 抗凝劑：草酸鹽、EDTA、肝素不能用于Fbg測定項(xiàng)目，抗凝比例不當(dāng)也將影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。12.2 樣本采集處理不當(dāng)，如血與抗凝劑未充分混勻，出現(xiàn)小凝塊；混勻時(shí)過分用力，使紅細(xì)胞破壞出現(xiàn)溶血，均會造成結(jié)果變異。12.3 纖溶藥物的影響：如雙香豆素、鏈激酶、尿酶等12.4 妊娠與急性炎癥的影響13. 操作注意事項(xiàng)：干粉試劑及質(zhì)控血漿溶解13.1 確認(rèn)溶劑類型，一般溶解液包括：蒸餾水、生理鹽水、緩沖液、廠家特定溶解液，必須按說明書要求使用。13.2 溶解時(shí)，輕輕轉(zhuǎn)動容器，保證干粉完全溶解，避免劇烈振蕩。14. 儀器維護(hù)與保養(yǎng)14.1 每日保養(yǎng)：14.1.1開機(jī)前觀察樣品參比液液面，看是否夠做測定

47、。14.1.2 注意檢查液面水平并倒空廢液瓶，確保廢液能順利流入廢液瓶。14.1.3讓開關(guān)機(jī)盡量減少到最少。14.1.4 檢查廢反應(yīng)盤杯，必要時(shí)倒空廢反應(yīng)盤杯。14.1.5在每天工作前和工作后，執(zhí)行沖洗程序：按“PROG”，顯示應(yīng)用菜單，選擇“PRIMING”，按“ENTER”確認(rèn)。14.2每周保養(yǎng)14.2.1清潔儀器表面，標(biāo)本區(qū)域內(nèi)壁和分析腔。14.2.2進(jìn)入清潔程序清潔吸樣針。14.2.3清潔沖洗/廢液池。14.3每月保養(yǎng)清潔空氣過濾網(wǎng)14.4根據(jù)需要14.4.1清潔廢液管路14.4.2清潔溢出的樣本14.4.3更換吸樣針組件14.4.4調(diào)整吸樣針位置14.4.5對吸樣針/試劑針排污處理1

48、5. 參考文獻(xiàn)15.1 葉應(yīng)嫵.王毓三等全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版，東南大學(xué)出版社.15.2 CA7000全自動血凝儀操作手冊抗凝血酶（AT）測定1. 實(shí)驗(yàn)原理在待測血漿中加入過量的凝血酶，凝血酶與血漿中的AT形成1:1的復(fù)合物，剩余的凝血酶作用于顯色肽S2765，裂解出顯色基團(tuán)對硝基苯胺(pNA)，用405nm測吸光度，顯色程度與剩余凝血酶的量成正相關(guān)，而與血漿AT的量呈負(fù)相關(guān)。2. 標(biāo)本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右)，靜脈采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml，混勻。3. 標(biāo)本存放：全血貯存在410oC不超過2小時(shí)，最好1小時(shí)內(nèi)(3000r/min

49、15min)分離血漿，此血漿在室溫2224oC下可存放2小時(shí)，在24oC可存放4小時(shí)，在-20oC可存放2周，長時(shí)間保存需在冰凍條件下，在-70oC可存放6個(gè)月。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛血漿的容器置37oC水浴中，并輕輕搖動，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解凍后立即測試。冷凍過的標(biāo)本不能再次冷凍，否則結(jié)果不準(zhǔn)確。4. 標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5. 標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合，采血量不準(zhǔn)確，凝固，溶血，脂血標(biāo)本不能作該項(xiàng)目檢測。6. 實(shí)驗(yàn)材料：6.1每個(gè)試劑均購自德國Dade Behring Marburg公司。1）AT測定試劑盒（代號P/N:20008900）凍干發(fā)色底物S27652瓶（6

50、mg/瓶)凍干活化X因子試劑（包括?；罨疿因子、肝素、緩沖液、牛血清白蛋白）2瓶2）定標(biāo)血漿Calibration Plasma（代號P/N:8467300）3）正常質(zhì)控血漿Normal control plasma（代號P/N:8467011）4）異常水平發(fā)色底物法質(zhì)控血漿Abnormal chromogenic control plasma level I/II（代號P/N:8467600）5）Cleaning agent（代號P/N:9832700） 6）Cleaning solution（代號P/N:9831700）6.2試劑準(zhǔn)備發(fā)色底物：用2mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水

51、溶解1瓶凍干發(fā)色底物，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖?；罨疿因子試劑：用2.5mL NCCLS II型或相同質(zhì)量的蒸餾水溶解1瓶凍干活化X因子試劑，蓋上蓋子，輕搖至完全溶解，置1525oC30分鐘，用前搖勻，勿用力振搖。6.3試劑保存未開封的試劑可保存在28 oC至試劑盒上標(biāo)明的有效期。試劑溶解后，于原瓶中15 oC ，7天內(nèi)有效；28 oC，3月內(nèi)有效；-20 oC，6月內(nèi)有效。建議試劑不使用時(shí)，最好將其倒回原瓶中，保存于28 oC，不要將試劑冷凍。7. 儀器設(shè)備：7.1 儀器名稱：syxmex CA7000全自動血凝儀 7.2 儀器廠家：日本希森美康

52、公司7.3 儀器型號：CA70007.4 儀器技術(shù)參數(shù)：7.4.1 試劑位：18個(gè)，具冷藏功能。7.4.2 樣本位：40個(gè)，可通過換盤連續(xù)添加。7.5 儀器校準(zhǔn)程序：7.5.1 校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑型號改變，儀器維修影響測定結(jié)果等情況時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2 校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)。8. 操作步驟：8.1 開機(jī)：CA7000的開關(guān)在儀器的右側(cè)。開機(jī)后儀器自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示Ready時(shí)可進(jìn)行試檢8.2洗針：在主屏幕上選Rinse Probe鍵，然后按Execute進(jìn)行洗針8.3 檢查消耗品：1.準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)

53、杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。2.準(zhǔn)備試劑：按照儀器對試劑的要求，把每一項(xiàng)的試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示位置放置試劑。注意：共三個(gè)位置放清洗液。3.查看儀器的洗液瓶和廢液瓶8.4 準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本離心好，放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。8.5 輸入檢測項(xiàng)目：主菜單上的按下Work list鍵，進(jìn)入工作菜單。輸入項(xiàng)目，直接點(diǎn)擊相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目鍵重復(fù)：按屏幕下菜單的REPEAT鍵，在屏幕彈出的鍵盤上輸入相應(yīng)測試數(shù)，儀器會自動重復(fù)與光標(biāo)所在位置相同的測試信息。輸入樣本號：按屏幕下菜單的

54、ID NO.Entry按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。開始檢測：錄入完所有測試信息，按下屏幕右上角START鍵，開始檢測查看結(jié)果：返回到主屏幕， 檢測的項(xiàng)目如果由變成表明此試驗(yàn)已經(jīng)完成。按下Stored Date鍵，出現(xiàn)已存儲結(jié)果界面，屏幕顯示已完成的測試的信息。如果查看反應(yīng)曲線，按下邊菜單第一項(xiàng)Gragph查看凝集趨勢、吸光度、錯(cuò)誤信息等。8.6 洗針：當(dāng)做完一批標(biāo)本后，需要洗針，按下Rinse Probe然后按下Execute進(jìn)行洗針8.7 關(guān)機(jī)：回到主屏幕下，在洗完針后方可關(guān)機(jī)，切斷電源，同時(shí)關(guān)閉壓力泵和總電源。9. 質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測定三個(gè)濃度水平(正常值低值和高值)的質(zhì)控品，以2S為警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)建立自己的質(zhì)控均值和SD值以檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。至少每8小時(shí)做一次質(zhì)控分析。用Westgard等方法進(jìn)行質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的分析和處理，評定質(zhì)量情況。請參考CA7000全自動血凝儀操作手冊。 10. 臨床意義： 參考值75-122% 血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物：一旦凝血酶形成后，由于機(jī)體的調(diào)控和防御作用，迅速與AT-以