2021年控制菌有些控制菌檢查方法驗證操作規(guī)程

1、控制菌有些控制菌檢查方法驗證操作規(guī)程 GMP管理文件 題 目 控制菌檢查方法驗證操作規(guī)程 編碼： 頁序/ 總頁 1/1 制 定 審 核 批 準 制訂日期 審核日期 批準日期 頒發(fā)部門 質(zhì)量部 生效日期 分發(fā)部門 化驗室 一、 目的：為使控制菌檢查的操作規(guī)范化、制度化，故建立此規(guī)程 二、 適用范圍：控制菌檢查必須按本規(guī)程執(zhí)行。 三、責任者：微生物限度檢查化驗員，質(zhì)量檢測中心主任。 四、正文： 1、 控制菌檢查方法適應(yīng)性試驗 1、1 供試液的制備 取樣品10g，用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在2025培養(yǎng) ,培養(yǎng)時間應(yīng)使供試品中的細菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小

2、時）。 1.2 試驗菌 大腸埃希菌和銅綠假單胞菌 1.3適用性試驗 取相當于1mL供試品的上述預(yù)培養(yǎng)物及不大于100cfu的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌分別接種至適宜體積腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)24小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035培養(yǎng)18小時。應(yīng)能分別檢出所加大腸埃希菌和銅綠假單胞菌相應(yīng)的反應(yīng)特征. 1.4結(jié)果判斷 上述試驗若檢出試驗菌，按此供試液制備法和控制菌檢查方法進行供試品檢查； 若未檢出試驗菌，應(yīng)消除供試品的抑菌活性，并重新進行 山GMP管理文件 題 目 控制菌檢查方法驗證操作規(guī)程 編碼： 頁序/總頁：2/2 方法適用性試驗。 1.5耐膽鹽革蘭氏陰性菌

3、的檢查 供試液的制備和預(yù)培養(yǎng)：取樣品10g，用胰酪大豆胨肉湯瓊培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在2025培養(yǎng) ,培養(yǎng)時間應(yīng)使供試品中的細菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小時） 1.5.1定性試驗： 除另有規(guī)定外，取相當于1g或ml供試品的預(yù)培養(yǎng)物接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗確定）腸道增菌液培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)2448小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，3035 培養(yǎng)1824小時。 判斷結(jié)果：如果平板上無菌生長，判供試品未檢出耐膽鹽革蘭氏陰性菌。 1.5.2定量檢查： 選擇和分離培養(yǎng)：取相當于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01、0.001ml）供試品的預(yù)培養(yǎng)物或其稀釋劑分別接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗確定）腸道增菌液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)2448小時后，上述每一培養(yǎng)物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，3035 培養(yǎng)1824小時。