《藥物分析實驗》word版

1、藥物分析實驗word版可編輯藥物分析實驗2012年9月精品可編輯目錄實驗一薄層色譜檢查雜質(一) 薄層板的制備(二) 自制撲痛的雜質檢查實驗二阿司匹林片的分析實驗三鹽酸普魯卡因注射液的分析實驗四高效液相色譜法測定阿莫西林膠囊的含量實驗五氣色譜法測定酊劑中乙醇含量附錄13 藥品檢驗操作標準原料藥檢驗報告書成品檢驗報告書標準液配制及標定記錄精品可編輯實驗一薄層色譜檢查雜質一、目的1.了解藥物雜質檢查的意義。2.掌握薄層色譜檢查雜質的原理和方法。3.掌握雜質限量的計算方法。二、實驗內容(一)薄層板的制備1.羧甲基纖維素鈉溶液的配制稱取羧甲基纖維素鈉1-2g備用。在帶有攪拌子的燒杯內加入200-400

2、ml純凈水（加入水量為羧甲基纖維素鈉稱取量的200倍），在開啟攪拌的情況下，將羧甲基纖維素鈉緩慢均勻地撒到燒杯內的水中，不停攪拌，使羧甲基纖維素鈉和水充分融合，加完后于攪拌下加熱使羧甲基纖維素鈉充分溶解，放涼，備用。2.硅膠板的制作取硅膠H或GF254約2g，以玻棒攪動下緩慢加入0.5羧甲基纖維素鈉水溶液適量調成粘度適當?shù)暮隣?，取少許硅膠糊均勻涂布于玻璃板(515cm)上，置水平臺上，在空氣中晾干（陰干），待板上濕圈消失后再于110烘0.5-1小時，取出放置干燥器中備用。精品可編輯(二)自制撲痛的雜質檢查1.展開系統(tǒng)預測取撲熱息痛純品少許，加丙酮（或無水乙醇）完全溶解，取干燥薄層板點樣，以氯仿

3、:丙酮:甲苯(大約比例1352 )展開，測定藥物斑點Rf，調整丙酮加入量使Rf = 0.7為佳，此時采用的即為合適展開劑。2.樣品雜質觀察取自制撲痛少許，加丙酮（或無水乙醇）完全溶解，點樣，展開，燈下觀察雜質情況（多少、斑點位置及明暗程度等）。3.雜質限度檢測取自制撲痛少許，于5ml容量瓶中加丙酮適量使全部溶解，以丙酮稀釋至刻度，即為樣品液。精密量取樣品液適量，采用不同規(guī)格容量瓶（3個）以丙酮稀釋100、150或200倍，得參比液1、2或3。干燥薄層板，同時取相同體積樣品液和參比液點樣，展開，燈下觀察、比較，對比藥物主斑點與雜質斑點。樣品雜質斑點不深于參比液藥物主斑點時即檢得雜質限度。精品可編

4、輯實驗二阿司匹林片的分析一、目的1.掌握片劑分析的特點及賦形劑的干擾與排除方法。2.掌握阿司匹林片鑒別、檢查、含量測定的原理及方法。二、操作鑒別1.取本品的細粉適量(約相當于阿司匹林0.1g)，加水10ml煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。2.取本品的細粉(約相當于阿司匹林0.5g)，加碳酸鈉試液10ml，振搖后，放置5分鐘，濾過，濾液煮沸2分鐘，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。檢查游離水楊酸取本品的細粉適量(約相當于阿司匹林0.1g)，加無水氯仿3ml，不斷攪拌2分鐘，用無水氯仿濕潤的濾紙濾過，濾渣用無水氯仿洗滌2次，每次1ml，合并濾液與洗液，在室溫下通風

5、揮發(fā)至干；殘渣用無水乙醇4ml溶解后，移至100ml量瓶中，用少量5乙醇洗滌容器、洗液并入量瓶中，加5乙醇稀釋至刻度，搖勻，分取50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液取鹽酸液(1mol/L)1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100ml 1ml，搖勻；30秒鐘內如顯色，與對照液(精密稱取水楊酸0.1g，置1000ml量瓶中，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水適量至刻度，搖勻，精密量取1.5ml，加無水乙醇2ml與5乙醇使成50ml，再加上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻)比較，不得更深。含量測定取本品10片，精密稱定，研細，精密稱出適量(約相當于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇

6、(對酚酞指示液顯中性)20ml，振搖，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4。本品含阿司匹林(C9H8O4)應為標示量的95.0105.0。精品可編輯精品三、說明1楊酸與三氯化鐵試液顯紫堇色。+FeFe3+33OO H+H 3+OOHOH3OC 2.為消除阿司匹林水解產(chǎn)物水楊酸，醋酸及穩(wěn)定劑枸椽酸、酒石

7、酸對含量測定的影響故采用兩步滴定法。第一次滴定：CH 3COOH NaOH CH 3COONa H 2OCOOHOH+NaOHCOONaOH+H 2OCOOHOCOCH 3+NaOHCOONaOCOCH 3+H 2OC CH 2COOH CH 2COOHHO COOH+3NaOHC CH 2COONa2COONaHO COONa+3H 2O 第二次滴定： COONaOCOCH 3+NaOHCOONaOH+CH 3COON a 四、思考題1.簡述鑒別試驗的原理。2.檢查游離的水楊酸時，為防止阿司匹林水解，操作中應注意哪些問題? 計算供試品中阿司匹林的限量。3.含量測定時，為什么要作空白試驗?空白

8、試驗的操作如何進行? 為什么加中性乙醇溶解供試品?如何制備中性乙醇?4.你認為含量測定時，應注意哪些問題才可以獲得準確的結果? 可編輯精品 實驗三 鹽酸普魯卡因注射液的分析 一、目的1.掌握用薄層層析法檢查鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸限量的原理及方法。2.掌握用分光光度法測定鹽酸普魯卡因含量的原理及方法。二、實驗內容(一)鑒別 取本品適量(約相當于鹽酸普魯卡因50mg)，加稀鹽酸1ml ，加0.1mol/L 亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，生成橙紅色沉淀。(二)對氨基苯甲酸的檢查 薄層層析法：精密量取本品，加乙醇稀釋成每1ml 中含鹽酸普魯卡因2.5mg 的溶液，作為供試品溶液，

9、另取對氨基苯甲酸對照品，加乙醇制成每1ml 含30g 的溶液，作為對照品溶液，吸取上述兩種溶液各10l ，分別點于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H 薄層板上，用苯冰醋酸丙酮甲醇(14114)為展開劑，展開后，取出晾干，用對一二甲氨基苯甲醛溶液2對一二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml ，加入冰醋酸5ml 制成噴霧顯色。供試溶液如顯與對照品相應的雜質斑點，與對照品溶液的主斑點比較，不得更深。 (三)含量測定精密量取本品1ml 于100ml 量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取此稀釋液10ml 于另一100ml 量瓶中，加水至刻度(即每1ml 含鹽酸普魯卡因10g)，搖勻，照分光光度法在290nm 的

10、波長處測定吸收度，按C 13H 20N 2O 2HCl 的吸收系數(shù)(E 11cm )為680計算，即得。 可編輯精品 三、說明1鹽酸普魯卡因，對氨基苯甲酸在冰醋酸中與對二甲氨基苯甲醛縮合而呈色。 NH 2COOH +NH 2COOC H 2CH 2N(C 2H 5)2H Cl CHO C H 3C H 3N H +NH COOH CH C H 3CH 3N +NHCH C H 3C H 3N +COOC H 2CH 2N(C 2H 5)2 四、思考題 計算用TLC 法檢查對氨基苯甲酸的限量。可編輯實驗四高效液相色譜法測定阿莫西林膠囊含量一、目的1熟悉HPLC法測定的原理及操作；2掌握外標法測定

11、阿莫西林膠囊含量。二、操作1鑒別取本品內容物適量，在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品主峰的保留時間應與對照品主峰的保留時間一致。2含量測定（1）譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液（pH5.0）（取磷酸二氫鉀13.6g，加水溶解后稀釋到2000ml，用8mol/L氫氧化鉀溶液調節(jié)pH值至5.00.1）-乙腈（964）為流動相；流速為每分鐘約1.0ml；檢測波長254nm。理論板數(shù)按阿莫西林峰計算應不低于1700。（2）對照溶液配制：取阿莫西林對照品約30mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH5.0）溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。（3）樣品測定：

12、取裝量差異項下的內容物，混合均勻，精密稱取適量，加磷酸鹽緩沖液（pH5.0）溶解并稀釋成每ml中約含0.6mg的溶液，濾過，取續(xù)濾液20L注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿莫西林對照溶液同法精品可編輯精品 測定。按外標法以峰面積計算出樣品中阿莫西林（C 19H 19N 3O 5S ）的含量。本品含阿莫西林（C 19H 19N 3O 5S ）應為標示量的90.0%110.0%。 三、說明1. 阿莫西林結構如下： 我國藥典收載的相關制劑主要有片劑、膠囊劑及注射用阿莫西林鈉?？删庉媽嶒炍鍤庀嗌V法測定酊劑中乙醇含量一、目的：1.熟悉氣相色譜法中內標加校正因子測定含量的方法。2.了解氣相色譜法在藥物分

13、析中的應用。二、操作：1.系統(tǒng)適用性試驗：用直徑為0.250.18mm的二乙烯苯(為橫紅)乙烯苯型高分子高孔小球作為載體，柱溫為120150；精密量取無水乙醇4、5、6ml，分別精密加入正丙醇5ml，加水稀釋成100ml，混勻(必要時進一步稀釋)，取上述三份溶液適量，各進樣5次，應符合下述要求：用正丙醇計算的塔板數(shù)應大于700；乙醇與正丙醇兩峰的分離度應大于2；上述3份溶液各進樣5次，所得15個校正因子變異系數(shù)不得大于2.0。2.標準溶液的制備精密量取恒溫至20的無水乙醇和正丙醇各5ml，加水稀釋成100ml，混勻，即得。3.供試溶液的制備精品可編輯精密量取恒溫至20的從試品適量(相當于乙醇約

14、5ml)和正丙醇5ml，加水稀釋成100ml，混勻，即得。上述兩種溶液必要時可進一步稀釋。4.測定法取標準溶液與試溶液適量，分別連續(xù)注樣3次，并計算出校正因子和供試品的乙醇含量，取3次計算的平均值作為結果。三、說明：1.在不含內標物質的供試溶液的色譜圖中，內標物質峰的位置處應不出現(xiàn)雜質峰。2.標準溶液與供試溶液連續(xù)3次注樣所得各次校正因子和乙醇含量與其相應的平均值的相對偏差，均不得大于1.5，否則應重新測定。3.選用其他載體時，系統(tǒng)適用性驗必須符合本法規(guī)定。4.色譜柱的理論塔板數(shù)(n)計算公式為：n=5.54(t R/W h/2)2其中：t R為供試品主成分或內標物質峰的保留時間，W h/2為

15、半高峰寬。5.分離度(R)的計算公式為：精品可編輯精品 式中：t R2為相鄰后一峰的保留時間t R1為相鄰前一峰的保留時間W 1、W 2為此相鄰二峰的基線峰寬除另有規(guī)定上，分離度應大于1.5。6.拖尾因子(T)的計算公式為：T=2d1W 0.05h式中：W 0.05h 為0.05峰高處的峰寬；d 1為0.05峰高處峰極大至峰前沿之間的距離。除另有規(guī)定外，T 應在0.951.05間。7.校正因子(f)的計算公式為： 式中：As 為內標物質的峰面積或峰高；Ar 為對照品的峰面積或峰高；ms 為加入內標物質的量；mr 為加入對照品的量。8.含量計算公式為：含量(m i )=f 式中：f 為校正因子；A i 為供試品(或其雜質)峰面積或峰高；