完整版)ABI7500儀器驗(yàn)證方案

1、編號(hào)：ABI 7500 驗(yàn)證方案方案制定：日期：方案審核：日期：方案批準(zhǔn)：日期：上海 * 生物技術(shù)有限責(zé)任公司1、簡(jiǎn)介ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量PCF儀，是美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司推出的基于微孔 板的高通量實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)，其反應(yīng)速度及準(zhǔn)確性、操作實(shí)用性和使用靈活 性均有較好的提高，能滿足科研工作者對(duì)于定量 PCR系統(tǒng)高通量方面的要求， 是特異性靶基因檢測(cè)與定量的一體化平臺(tái)。它主要有一臺(tái) ABI 7500 Block kit 96和PC計(jì)算機(jī)及顯示器組成。2、驗(yàn)證內(nèi)容ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量PCF儀的驗(yàn)證，主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行：PC計(jì)算機(jī) 運(yùn)行環(huán)境的確認(rèn)、ABI7500運(yùn)行軟件及分析軟件的確

2、認(rèn)、 ABI7500 PCR擴(kuò)增及熒 光檢測(cè)系統(tǒng)的確認(rèn)。3、驗(yàn)證目的通過用HBV熒光PCF檢測(cè)試劑盒來確認(rèn) ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量PCF儀的擴(kuò)增 和檢測(cè)體系精密度、線性、準(zhǔn)確度等，驗(yàn)證儀器能否正常準(zhǔn)確運(yùn)行，給出可靠 的分析結(jié)果，以及 96 孔孔間差異是否在允許范圍內(nèi)。4、驗(yàn)證內(nèi)容4.1 PC 計(jì)算機(jī)運(yùn)行環(huán)境確認(rèn)4.1.1 運(yùn)行環(huán)境確認(rèn)內(nèi)容檢查配套計(jì)算機(jī)能否正常開機(jī)運(yùn)行，是否有中病毒等現(xiàn)象，能否為ABI7500運(yùn)行軟件和分析軟件提供安裝平臺(tái)和運(yùn)行平臺(tái)。4.1.1.2 結(jié)果記錄4.2 ABI7500 運(yùn)行軟件及分析軟件的確認(rèn)4.2.1 軟件確認(rèn)內(nèi)容雙擊電腦桌面上的ABI7500運(yùn)行軟件及分析軟

3、件的圖標(biāo)，看應(yīng)用軟件能否 打開，能否正常使用。4.2.2 結(jié)果記錄4.3 ABI7500 PCR 擴(kuò)增及熒光檢測(cè)系統(tǒng)的確認(rèn)431靈敏度和線性431.1 方法利用HBV熒光PCF檢測(cè)試劑盒，配制 20支HBV-PCR Mix并分別加入 HBV 企業(yè)靈敏度質(zhì)控品（3.0E2,3.0E3,3.0E4 ，3.0E5, 3.0E6，3.0E7）、陰性對(duì) 照、空白對(duì)照，均做復(fù)管，按照說明書的操作步驟進(jìn)行。4.3.1.2 合格標(biāo)準(zhǔn)（1）空白對(duì)照和陰性對(duì)照無起跳（2） 經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)靈敏度質(zhì)線性相關(guān)系數(shù)R 0.98，復(fù)管重復(fù)性良好。4.3.1.3 數(shù)據(jù)記錄4.3.2孔間差異4.3.2.1 方法利用HBV熒光PC

4、R檢測(cè)試劑盒，配制96支HBV-PCR Mix 88支分別加入相 同的模板HBV standard（3.0E4），另有3支加入不同濃度的 HBV standard 3.0E7 （管號(hào) 91 ）、HBV standard 3.0E6 （管號(hào) 90）、HBV standard 3.0E5（管號(hào)89），剩余5支分別為臨界對(duì)照（管號(hào)92）、陽性對(duì)照（管號(hào)93）、 陰性對(duì)照（管號(hào)94,管號(hào)96）、空白對(duì)照（管號(hào)95），同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)擴(kuò)增檢 測(cè)。4.3.2.2 合格標(biāo)準(zhǔn)（1）空白、陽性對(duì)照無起跳（2）每孔相對(duì)偏差值不大于8%4.3.2.3 數(shù)據(jù)記錄4.3.2.4 數(shù)據(jù)分析孔間差計(jì)算方法：C Tix 100%(C T1 +Ct2 +Ct3 +Gn)/n5 異常情況處理在驗(yàn)證的過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照驗(yàn)證方案操作，若出現(xiàn)個(gè)別項(xiàng)目不合格，應(yīng)查 明原因后重新進(jìn)行驗(yàn)證。如果屬于儀器設(shè)備原因，則由驗(yàn)證小組和質(zhì)量部負(fù)責(zé) 人協(xié)同處理或聯(lián)系廠家進(jìn)行維修，并填寫相應(yīng)記錄。6 驗(yàn)證最終結(jié)果分析和評(píng)定評(píng)定人： 評(píng)定時(shí)間：7再驗(yàn)證周期7.1 在一般情況下每一年驗(yàn)證一次。7.2 如更更換儀器零部件或重大維