高中生物選修動物細胞工程

1、整理ppt,1,2.2動物細胞工程,專題2 細胞工程,整理ppt,2,動物細胞培養(yǎng),動物細胞融合,單克隆抗體技術,核移植,動物細胞工程常用技術,胚胎移植技術,整理ppt,3,（一）動物細胞培養(yǎng),1.過程：,整理ppt,4,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細胞,加培養(yǎng)液,制成,細胞懸液,細胞株,細胞系,（一）動物細胞培養(yǎng),細胞增值,無限傳代,去掉組織間 蛋白,動物細胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成生物體,細胞貼壁,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),胰蛋白酶,整理ppt,5,如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？,（一）動物細胞培養(yǎng),遺傳物質(zhì)改變,整理ppt,6,2、有關概念,原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原

2、代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。,整理ppt,7,2、有關概念,細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到4050代，這種傳代細胞為細胞株。 細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。 細胞株和細胞系的區(qū)別： 細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。,整理ppt,8,3、動物細胞培養(yǎng)條件,1。無

3、菌、無毒 2。營養(yǎng)：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素和動物血清等。 3。溫度：36.5+0.5 4。PH=7.27.4 5。氣體環(huán)境：O2和CO2（95%空氣+5%CO2）,整理ppt,9,思考：,2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？,1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？,3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？,4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等,因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂

4、能力強,成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng),不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體,整理ppt,10,獲得細胞,細胞的全能性,細胞株、細胞系,植物體,培養(yǎng)結(jié)果,或細胞分泌蛋白,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清 促生長因子,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較,整理ppt,11,4. 動物細胞培養(yǎng)技術的應用,()大規(guī)模生產(chǎn)有重要價值的蛋白質(zhì)生物制品。,()解決為大面積燒傷病人移植皮膚問題。 （利用貼壁生長和接觸抑制原理）,()檢

5、測有關物質(zhì)毒性。,()培養(yǎng)正?；虿∽兗毎糜诳蒲?。,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體,整理ppt,12,（二）、動物體細胞核移植技術和克隆動物 1.動物核移植 (1)概念：將供體體細胞的_與受體去核卵細胞的細胞質(zhì)進行_，借助于_的發(fā)育能力，經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進而形成_的技術。 (2)關鍵技術：_技術。,細胞核,人工組合,卵細胞,個體,細胞核移植,整理ppt,13,動物體細胞核移植技術和克隆動物 （3）哺乳動物核移植可以分為_核移植（比較容易）和_核移植（比較難）。 （4）選用去核卵(母)細胞的原因：卵(母)細胞比較_，容易操作；卵(母)細胞細胞質(zhì)_，營養(yǎng)豐富。,胚胎細胞,體細胞,大,多,整理p

6、pt,14,整理ppt,15,多莉羊的培育過程,整理ppt,16,整理ppt,17,整理ppt,18,2、體細胞核移植技術的應用 加速家畜遺傳改良進程，促進良畜群繁育； 保護瀕危物種，增大存活數(shù)量； 生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白； 作為異種移植的供體； 用于組織器官的移植等。 3、體細胞核移植技術存在的問題 克隆動物存在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。,整理ppt,19,動物細胞融合與單克隆抗體,整理ppt,20,（三）動物細胞融合,2、過程：,1、概念： “2個或多個動物細胞”“1”、“雜交單核細胞”,整理ppt,21,用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程,思考討論： 為什么細胞融合過程 中使用的病毒

7、需要 滅活？,病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。 滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。,整理ppt,22,3、動物細胞融合的意義：克服了_雜交的不親合性，成為研究細胞_、_、腫瘤和生物_培育的重要手段。 4、動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較,遠緣,遺傳,細胞免疫,新品種,整理ppt,23,主要用于制備,單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學方法,（同左）,滅活的病毒,物理（離心、振蕩、電刺激）,化學（聚乙二醇）,誘導方法,使細胞分散后誘

8、,導細胞融合,去除細胞壁后誘,導原生質(zhì)體融合,細胞融合的方法,細胞膜的流動性,細胞膜的流動性、,植物細胞全能性,原理,動物細胞融合,植物體細胞雜交,比較項目,植物、動物細胞融合的比較,整理ppt,24,（四）單克隆抗體,1、什么是抗體？其本質(zhì)是什么？,2、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？ 抗體是從何來的？,B淋巴細胞產(chǎn)生抗體。,3、B淋巴細胞有什么特點？,抗體是機體受抗原刺激后產(chǎn)生的、 并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的 具有免疫功能的球蛋白。,整理ppt,25,B淋巴細胞與抗體,B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。 動物體內(nèi)的B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫

9、作用。 每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。,整理ppt,26,單克隆抗體,由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募毎?，這一細胞群所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。 特點： 特異性強、靈敏度高,整理ppt,27,如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？,利用淋巴細胞產(chǎn)生抗體的功能 利用腫瘤細胞無限增殖的特性 利用細胞融合的技術將兩種細胞融合獲得具有淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞 利用動物細胞培養(yǎng)技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞,整理ppt,28,單克隆抗體制備過程,細胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群,單克隆抗體,整理ppt,29,思考：,1、本過程利用了哪些原理？,免

10、疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理,2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？,這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領，因而可以獲得大量單克隆抗體,整理ppt,30,（1）為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合?,（小鼠骨髓瘤細胞可以在體外培養(yǎng)條件下大量增殖，B淋巴細胞能夠產(chǎn)生抗體，細胞的同源性越近，融合形成的雜種細胞越易成活。）,（2）骨髓瘤細胞是癌細胞嗎?,（有無限增殖能力（失去凋亡機制，失去接觸抑制等）的細胞是腫瘤細胞，而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞，所以說，瘤細胞不能等于癌細胞。）,整理ppt,31,（3）整個

11、制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選?,（第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。）,整理ppt,32,單克隆抗體的應用,與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。,應用主要有：,1、臨床診斷,2、作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導彈”治療腫瘤,資料：目前世界各國已經(jīng)研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。許多缺

12、乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。,生物導彈：單克隆抗體作為載體分子，同抗癌藥物相結(jié)合，將他們運載到腫瘤部位，殺死癌細胞，這種抗體藥物結(jié)合物稱之為生物導彈。它能定向殺滅癌細胞，避免或減少對正常細胞的傷害，大大減輕了抗癌藥物的副作用。,整理ppt,33,小結(jié),一種誘導細胞融合的新方法-,滅活的病毒,一種新細胞-,雜交瘤細胞,一種優(yōu)勢-,單克隆抗體特異性強、靈敏度高,整理ppt,34,整理ppt,35,整理ppt,36,整理ppt,37,整理ppt,38,1.動物細胞工程技術的基礎是：（） A動物細胞融合 B胚胎移植 C動物細胞培養(yǎng) D核移植,教學目標鞏固,整理ppt,39,在動物細胞融合和植物體細胞雜交的 比較中，正確的是（） A結(jié)果是相同的 B雜種細胞的形成過程基本相同 C操作過程中酶的作