人感染h7n9禽流感標(biāo)本采集要求

1、 人感染人感染H7N9禽流感病毒的病原學(xué)禽流感病毒的病原學(xué) 人感染人感染H7N9禽流感監(jiān)測病例定義禽流感監(jiān)測病例定義 標(biāo)本采集種類標(biāo)本采集種類 標(biāo)本采集主要器材和試劑標(biāo)本采集主要器材和試劑 標(biāo)本采集方法標(biāo)本采集方法 標(biāo)本的保存、運(yùn)送標(biāo)本的保存、運(yùn)送 標(biāo)本采集要求標(biāo)本采集要求 禽流感病毒屬正粘病毒科甲型流感病毒屬。禽甲 型流感病毒顆粒呈多形性，其中球形直徑80 120nm，有囊膜?；蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。 依據(jù)其外膜血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）蛋白 抗原性不同，目前可分為16個(gè)H亞型（H1H16） 和9個(gè)N亞型（N1N9）。 禽甲型流感病毒除感染禽外，還可感染人、豬、馬、 水貂和海洋哺乳

2、動(dòng)物?？筛腥救说那萘鞲胁《緛喰?為H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。 此次報(bào)道的為全球首次發(fā)現(xiàn)人感染H7N9禽流感病 毒。該病毒為H7N9和H9N2重配的新型病毒，其內(nèi) 部基因來自于H9N2禽流感病毒，基因序列分析表 明為禽源病毒。 同時(shí)具備以下4項(xiàng)條件 1、發(fā)熱(腋下體溫38)； 2、具有肺炎的影像學(xué)特征； 3、發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)降低或正常,或淋巴細(xì)胞分類計(jì) 數(shù)減少； 4、不能從臨床或?qū)嶒?yàn)室角度診斷為常見病原所致肺炎。 除第除第4條不同于不明原因肺炎病例定義，以上三條均相符。條不同于不明原因肺炎病例定義，以上三條均相符。不不 明原因肺炎第明原因肺炎第4 條為：經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治

3、療條為：經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治療35天，病情無明天，病情無明 顯改善或呈進(jìn)行性加重。顯改善或呈進(jìn)行性加重。 醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)及時(shí)采集病例相關(guān)臨床樣本。 1、上呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱 液和鼻洗液）； 2、下呼吸道標(biāo)本下呼吸道標(biāo)本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本） 3、血清標(biāo)本血清標(biāo)本（發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血 清）； 4、尸檢標(biāo)本尸檢標(biāo)本（如病人死亡，應(yīng)當(dāng)盡可能說服家屬同意尸檢，及 時(shí)進(jìn)行尸體解剖，采集肺組織、氣管、支氣管等組織標(biāo)本）； 5、應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道 標(biāo)本）?！卑l(fā)燒72小時(shí)標(biāo)本” 1、拭子：W

4、HO及美國CDC規(guī)定，鼻煙拭 子采集只能用塑料桿的滌綸或人造棉拭子 （如常用的聚酯纖維拭子），不能用藻酸 鈣拭子或木桿拭子，因可能使某些病毒失 活或抑制PCR；脫脂棉含有熒光物質(zhì)，影 響實(shí)時(shí)應(yīng)熒光定量PCR結(jié)果。 2、壓舌板 3、3ml Hanks液螺口采樣管 4、封口袋 5、冷藏運(yùn)輸包 6、油性標(biāo)記筆或標(biāo)簽紙 7、樣品登記表 8、真空采血管 9、個(gè)人防護(hù)裝備 鼻咽拭子采樣是流感病原學(xué)監(jiān)測中的一個(gè)重要環(huán)節(jié), 操作簡單,但在流感監(jiān)測工作中卻極為重要。標(biāo)本采集的 時(shí)間、位置及質(zhì)量對(duì)能否分離到病毒或提取到有活性的 RNA至關(guān)重要，而標(biāo)本保存與運(yùn)輸不當(dāng)，也會(huì)影響病毒的 分離。為提高病毒的分離率，在用于

5、病毒分離樣品的采集 數(shù)量、類型和地點(diǎn)方面，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)與流行病學(xué)人 員達(dá)成共識(shí)。一般來說，用于病毒分離的樣品應(yīng)與血樣同 時(shí)采集，以便進(jìn)行血清學(xué)診斷。 1 鼻拭子 采集標(biāo)本時(shí)，囑咐病人頭部盡量保持不動(dòng)， 將聚酯纖維頭拭子輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)緩緩插入病人 鼻孔至顎部(注意：不可太用力，但要盡量 深，通常5cm以上)，停留數(shù)秒吸取分泌物， 輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子，置采樣管折斷手接觸 部位的塑料柄，使拭子浸泡至采樣液中， 旋緊管蓋。 2 咽拭子 囑咐病人放松，發(fā)“啊”聲， 立即用壓舌 板壓住病人舌前23，聚酯纖維頭拭子適 度用力多次抹擦懸雍垂（腭垂或小舌，見 圖）后部咽后壁及雙側(cè)扁桃體，避免觸及 舌部，取出后置采樣

6、管，折斷手接觸部位 的塑料柄，使拭子浸泡至采樣液中，旋緊 管蓋。 3、切記：、切記：咽拭子與鼻拭子采到一個(gè)咽拭子與鼻拭子采到一個(gè) Hanks管（管（23ml ）。如商品化采樣管液）。如商品化采樣管液 體過多，采樣前倒掉一部分，以提高病毒體過多，采樣前倒掉一部分，以提高病毒 濃度及陽性率。聚丙烯拭子采樣前不需用濃度及陽性率。聚丙烯拭子采樣前不需用 生理鹽水濕潤，以吸收更多的分泌物。生理鹽水濕潤，以吸收更多的分泌物。 4、漱口液標(biāo)本：在病人發(fā)熱72小時(shí)內(nèi)盡早 采集。先讓病人咳嗽幾聲，將5-10ml無菌 生理鹽水（不含青霉素）倒入病人口中， 讓病人頭向后傾并發(fā)出“噢”的聲音，反 復(fù)幾次。將漱口液吐入

7、50ml帶墊圈的螺口 塑料離心管中，旋緊管蓋。 5、尸檢組織標(biāo)本：病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖， 采集肺、氣管、腎、脾、肝、心臟、腦、血凝塊 等組織和淋巴結(jié)等重要器官標(biāo)本。每一采集部位 分別使用不同消毒器械；每種組織應(yīng)多部位取材， 每部位應(yīng)取2050g，淋巴結(jié)2個(gè)，分別置于50ml 帶墊圈的無菌螺口塑料管中，立即置于-70以下 保存或冷藏（48）送至有關(guān)實(shí)驗(yàn)室。尸檢組 織標(biāo)本對(duì)于病原學(xué)研究非常重要，應(yīng)盡量多采集。 標(biāo)識(shí)標(biāo)識(shí)：油性記號(hào)筆或標(biāo)簽紙?jiān)诓蓸庸苌蠘?biāo)記標(biāo)本名稱、姓 名、編號(hào)等； 包裝包裝：符合符合“生物安全相關(guān)規(guī)定生物安全相關(guān)規(guī)定” 所采集的標(biāo)本首先用 封口袋密封，周圍最好包裹吸水緩沖材料，用

8、第二個(gè)封口 袋再次密封，放入帶冰排的標(biāo)本運(yùn)輸箱； 填寫填寫“不明原因肺炎病例/聚集性病例標(biāo)本送檢表”，送 檢表用另一個(gè)封口袋密封，不要與標(biāo)本放到一起； 于24 小時(shí)內(nèi)送當(dāng)?shù)貒伊鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測，最遲 不超過48小時(shí)，如果有-70冰箱，可長期保存。 無菌操作：采樣人員須以無菌操作采集各類標(biāo)本。 采集標(biāo)本所使用的容器、采樣液等均應(yīng)無菌。 標(biāo)識(shí)：每份標(biāo)本必須標(biāo)明標(biāo)本編號(hào)、標(biāo)本種類及 采集日期。采集單位應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)標(biāo)本信息的 登記、收集和管理，詳細(xì)記錄信息，并認(rèn)真填寫 “不明原因肺炎病例/聚集性病例標(biāo)本送檢表”。 不明原因肺炎病例標(biāo)本送檢表.doc 所有標(biāo)本的收集、運(yùn)輸和保藏都應(yīng)裝在有螺旋蓋 的塑料管中，以防止開、關(guān)標(biāo)