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1、百度文庫(kù)讓每個(gè)人平竽地捉升口我 項(xiàng)目 Y谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT) 方法 速率法 目錄 1. 檢測(cè)原理 2. 標(biāo)木采集與處理 受檢者的準(zhǔn)備 靜脈采血 抗凝劑 標(biāo)木處理 3. 試劑 試劑 校準(zhǔn)血清 試劑的穩(wěn)定性 4. 儀器 5. 操作 6. 計(jì)算 7. 操作性能 精密度 準(zhǔn)確度 靈敏度 可報(bào)告范圍 特異性 干擾 8. 參考值 9 臨床總義 附錄A:參數(shù) 1. 檢測(cè)原理 I 百度文庫(kù)讓每個(gè)人平竽地捉升口我 卜谷氨酰對(duì)硝基苯胺和雙廿肽在卜谷氮酰轉(zhuǎn)肚酶作用下,生成對(duì)硝基苯胺及卜谷氨酰雙廿肽.所釋放出 的對(duì)硝基苯胺與卜谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力成正比.通過(guò)在405nm處測(cè)定對(duì)硝基苯胺的變化,可求出卜谷氨酰轉(zhuǎn) 肽酚活力
2、。 r-GT 卜谷氨酰3按基對(duì)硝基苯胺+雙甘肽對(duì)硝基苯胺+ r谷氨酰雙廿肚+ 2. 標(biāo)本采集與處理 受檢者的準(zhǔn)備: 病人空腹12h不飲酒24h后采集血樣。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無(wú)應(yīng)用 影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物C此外,對(duì)于體檢者.采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄,因?yàn)闃幽局懈黜?xiàng)目的含:S有季節(jié) 性變動(dòng).為廣前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對(duì)彖在抽血前24小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。 靜脈采血: 除非是臥床的病人.一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布,會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。 在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘.一般從肘靜脈取血使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘,穿刺成功后立即松開(kāi) 止血帶C 抗
3、凝劑: 血漿使用肝素或EDTAN32 (1mg/mL)作為抗凝劑。 標(biāo)本處理: 血標(biāo)木室溫放宜30min45min后離心分離血清或血漿.在兩小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢:如兩小時(shí)內(nèi)不能檢測(cè) 完畢.將離心分離血清或血漿迓潔凈試管加蓋28C保存。 3. 試劑 試劑: 木科使用湖南永和陽(yáng)光科技有限責(zé)任公司GGT試劑盒.為液體雙試劑.各組分如下: 組成 R1:R2=5:1 混合后溶液的濃度 Rl:Tris緩沖液: 100mmol/L PH= 廿氨酰甘氨酸 150mmoll/L 穩(wěn)定劑 R2:起動(dòng)液 r谷氨酰3掇基對(duì)硝基苯胺 L :校準(zhǔn)血淸 使用湖南永和陽(yáng)光科技有限責(zé)任公司提供的40項(xiàng)校準(zhǔn)血清。 校準(zhǔn)頻次: 空白定標(biāo)
4、:每日需做試劑空白定標(biāo)。 全點(diǎn)定標(biāo):試劑換批號(hào)使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過(guò)規(guī)定的2SD范囤,需要全點(diǎn)定標(biāo)。 試劑的穩(wěn)定性: 廉包裝試劑儲(chǔ)存在28C至標(biāo)簽所示失效日期。 1&22C穩(wěn)定28天.試劑應(yīng)避免污染。片試劑空白吸光度高干時(shí).試劑按照失效處理。 多項(xiàng)校準(zhǔn)血清在28C儲(chǔ)存至標(biāo)簽所示失效日期.復(fù)溶后-20 C保存,可穩(wěn)定一個(gè)丿J,只可凍融一次. 避免反復(fù)凍融。參見(jiàn)校準(zhǔn)血淸說(shuō)明書(shū)。 4. 儀器 KONELAB 30型號(hào)儀器。 性能:波長(zhǎng)405nm儀器測(cè)定吸光度的靈墩度應(yīng)達(dá)到以上。 5. 操作 樣品為血淸或肝素/EDTA抗凝血漿。木法為速率法。參數(shù)見(jiàn)后附,附錄A。 試劑參數(shù)設(shè)迓.定標(biāo)操作以及樣木檢測(cè)常規(guī)操
5、作.見(jiàn)儀器操作規(guī)程。 6. 計(jì)算 ZWminxVtxlOOO GGT(U/L) = =AA/minxF exVsxd 式中:AA/min每分鐘吸光度變化率:e 摩爾吸光系數(shù): Vt 反應(yīng)液總體積(ml) : d 1比色杯光徑(cm): 1000 變化因數(shù):Vs標(biāo)本體枳(ml): 7. 操作性能 精密度: 批內(nèi)CV%,批間CVv%n 準(zhǔn)確度: 檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)不準(zhǔn)確度1O%C 靈敏度: 卜谷氨酰轉(zhuǎn)肽酚濃度為:300U/L時(shí)吸光度變化率AA340nm/min為。 可報(bào)告范圍: 血清與試劑用雖之比為1 :24時(shí)測(cè)定上限為500U/L. 特異性: 該方法測(cè)雖值在給定值的90%-110%范鬧內(nèi)。 干擾: 內(nèi)源性干擾物溶血為lOOOmg/mk脂血2000mg/ml、黃疸30mg/mk抗壞血酸300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果 無(wú)明顯影響。 8. 參考值 男:們49U/L:女:732 U/L。 9臨床意義 卜谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶是一種肽移換的,它催化谷胱什肽
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